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公开(公告)号:CN105424937B
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201510641133.1
申请日:2015-10-05
申请人: 华中农业大学
IPC分类号: G01N33/577
摘要: 本发明属于动物免疫生化检测技术领域,具体涉及一种检测猴早期妊娠的孕酮胶体金免疫层析试纸条。该试纸条包括PCV底板,吸收垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、金标垫和样品垫;硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线;吸收垫、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次粘贴在PCV底板上;其特征在于:金标垫上含有孕酮单克隆抗体;硝酸纤维素膜的两端分别是孕酮单克隆抗体金标垫和吸水滤纸,二者相互交叠组成,同时孕酮单克隆抗体金标垫又与样品垫交叠组成;能检测猴早期妊娠的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO:C2015170的杂交瘤细胞株分泌的。本发明的试纸条灵敏度高,操作简便,对提高猕猴、金丝猴等猴类的繁殖监测具有重要意义。
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公开(公告)号:CN105104726A
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201510532150.1
申请日:2015-08-26
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明公开了一种笼养金丝猴繁殖交配期的饲料及制备方法,它以玉米、豆粕、米糠、稻草、苜蓿干草、燕麦干草、维生素和微量元素预混料,配制加工步骤是:A、按一定比例称取磷酸氢钙、七水硫酸亚铁、维生素D3、维生素C、氯化胆碱、沸石粉,将各种原料混合均匀;B、按一定比例称取玉米、豆粕、米糠、蔗糖、食盐、花生油,混合均匀;C、按一定比例称取苜蓿干草、燕麦干草、稻草,粉碎成草粉,混合均匀;D、将A步骤中的各种原料混匀后,再加入B步骤中混合物混匀,再与C步骤中混合物混匀,膨化制粒成花生状,膨化系数为1.2。营养全面,能有效刺激金丝猴的食欲,提高金丝猴的采食量,促进金丝猴的繁殖,提高金丝猴繁殖力。
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公开(公告)号:CN101407782B
公开(公告)日:2011-08-10
申请号:CN200810197981.8
申请日:2008-12-01
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明属于动物疫苗制备领域,具体涉及一种非抗性筛选促动物生长的口服DNA疫苗及制备方法与应用。将带有GMCSF细胞因子的生长抑素与乙肝表面抗原融合表达基因GS/2SS克隆到真核表达载体pVAX1中,得到中间质粒pVAX-GS/2SS,用天冬氨酸β-半乳糖脱氢酶基因(asd)替换中间质粒pVAX-GS/2SS中的卡那霉素(Kan)基因,得到非抗性筛选生长抑素真核表达质粒pGS/2SS,再将质粒pGS/2SS转化至缺失asd和crp基因的猪霍乱沙门氏菌C500中,得到所述的非抗性筛选促动物生长的口服DNA疫苗。含有生长抑素真核表达质粒的猪霍乱沙门氏菌(Salmonella enterica sv.Choleraesuis)C500/pGS/2SS,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),其保藏号为CCTCC NO:M208194。本发明还公开了该疫苗的制备方法及其在促动物生长方面的应用。
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公开(公告)号:CN118086590A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410355333.X
申请日:2024-03-27
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明公开了一种检测犬细小病毒和犬腺病毒的二重实时荧光PCR引物探针组合及应用,属于生物检测技术领域。本发明根据目前犬细小病毒和犬腺病毒的特点,设计出一组检测犬细小病毒和犬腺病毒的二重实时荧光PCR引物探针组合,采用本发明的引物探针组合能够同时快速检测出目前全世界各地流行的各种类型的犬细小病毒和犬腺病毒,且灵敏度普遍高于现有技术。基于本发明引物探针组合的PCR方法可特异性检测犬细小病毒和犬腺病毒,并可根据定量结果尽快采取有效的治疗和防控措施,减少这些疾病对养犬业造成的危害,对犬传染病的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109266593A
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201810970024.8
申请日:2018-08-24
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明公开了一种基于Ngpiwi蛋白介导的禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株及其构建方法和应用;所述禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株为在禽多杀性巴氏杆菌基因组上缺失潜在毒力相关基因的ORF序列或部分序列的缺失菌株。该方法首先成功构建带有Ngpiwi和待缺失靶基因序列左右同源臂的重组质粒;其次将重组质粒电转入禽多杀性巴氏杆菌中,在28℃传代诱导双交换重组,PCR筛选出缺失靶基因序列的菌株,之后在42℃诱导质粒丢失,从而获得缺失潜在毒力基因相关序列的菌株。该遗传操作系统质粒较小,操作容易,应用广泛,不存在潜在的脱靶效应,敲除效率较高,无抗性基因筛选标记,为禽多杀性巴氏杆菌基因工程疫苗的研发提供了优良工具。
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公开(公告)号:CN106978399A
公开(公告)日:2017-07-25
申请号:CN201710083814.X
申请日:2017-02-16
申请人: 华中农业大学
IPC分类号: C12N5/10 , C12N15/867
CPC分类号: C12N5/0645 , C12N15/102 , C12N15/86 , C12N2510/00 , C12N2740/15043
摘要: 本发明公开了一种nlrp3基因敲除的细胞系及构建方法,该方法利用CRISPR技术将染色体基因组上NLRP3的基因一个插入A而另外一个缺失AG而使得细胞完全丧失该蛋白的表达。而且该缺失细胞系形态生长速度等方面均与对照细胞无明显的差异。使用内毒素LPS能激活TNF‑α的表达,激活缺失细胞系的免疫反应,与正常细胞无显著性差异;而使用NLRP3的激活剂,其炎性小体激活的能力丧失,基本无IL‑1β的分泌。证实本发明中细胞系NLRP3功能缺失,而其它功能未受影响。综上,本发明中NLRP3缺失细胞系Nlrp3‑/‑RAW可作为研究NLRP3蛋白质功能、NLRP3炎性小体、药物负筛选的良好细胞模型。
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公开(公告)号:CN105424937A
公开(公告)日:2016-03-23
申请号:CN201510641133.1
申请日:2015-10-05
申请人: 华中农业大学
IPC分类号: G01N33/577
CPC分类号: G01N33/577
摘要: 本发明属于动物免疫生化检测技术领域,具体涉及一种检测猴早期妊娠的孕酮胶体金免疫层析试纸条。该试纸条包括PCV底板,吸收垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、金标垫和样品垫;硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线;吸收垫、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次粘贴在PCV底板上;其特征在于:金标垫上含有孕酮单克隆抗体;硝酸纤维素膜的两端分别是孕酮单克隆抗体金标垫和吸水滤纸,二者相互交叠组成,同时孕酮单克隆抗体金标垫又与样品垫交叠组成;能检测猴早期妊娠的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO:C2015170的杂交瘤细胞株分泌的。本发明的试纸条灵敏度高,操作简便,对提高猕猴、金丝猴等猴类的繁殖监测具有重要意义。
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公开(公告)号:CN118256657A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410355367.9
申请日:2024-03-27
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明公开了犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合及应用,属于生物检测技术领域。本发明根据目前犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的特点,设计出一组检测犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒的三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合,采用本发明的引物探针组合能够同时快速检测出目前全世界各地流行的各种类型的犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒,且灵敏度普遍高于现有技术。基于本发明引物探针组合的RT‑PCR方法可特异性检测犬瘟热病毒、犬冠状病毒和犬副流感病毒,并可根据定量结果尽快采取有效的治疗和防控措施,减少这些疾病对养犬业造成的危害,对犬传染病的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN117721249A
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202311669696.2
申请日:2023-12-07
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明公开了一种犬呼吸道病毒三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合,所述三重实时荧光RT‑PCR引物探针组合包括用于扩增犬瘟热病毒的引物探针组合、用于扩增犬腺病毒的引物探针组合和用于扩增犬副流感病毒的引物探针组合,基于该试剂盒的RT‑PCR方法可特异性的检测目前全世界各地流行的各种类型的犬瘟热病毒、犬腺病毒以及犬副流感病毒,且灵敏度普遍高于世面上的检测试剂盒,具有灵敏度好、特异性高、用时短、稳定性高等特点。从而为检测犬呼吸道传染病病原提供重要工具,为犬呼吸道传染病诊断提供技术支持,对犬呼吸道传染病防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109294999B
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN201811153276.8
申请日:2018-09-30
申请人: 华中农业大学
摘要: 本发明公开了一种适合犬瘟热病毒和禽流感病毒增殖的MDCK‑KOmavs细胞系及应用,所述细胞系的全基因组中mavs基因位于第24号染色体,所述第24号染色体的一个染色体上mavs基因的第二段外显子序列上插入两个碱基GC,其插入位点位于第24号染色体的17520583位点处;第24号染色体的另一个染色体上mavs基因的第二段外显子序列上插入两个碱基GC,其插入位点位于第24号染色体的17520583位点处;同时,在第24号染色体的17520587位点上mavs基因的第二段外显子的碱基C突变成了碱基T。本发明所构建的MDCK‑KOmavs细胞系具有犬瘟热病毒和禽流感病毒感染后细胞病变快、病毒增殖滴度高、更适合犬瘟热病毒和禽流感病毒病毒增殖等特点。
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