PCV3 Cap蛋白B细胞线性抗原表位多肽及其筛选与应用

    公开(公告)号:CN110283235A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910649264.2

    申请日:2019-07-18

    摘要: 本发明公开了一种可以鉴别PCV3 Cap单克隆抗体的PCV3 Cap蛋白B细胞线性抗原表位多肽及其筛选与应用,包括两条多肽,其氨基酸序列分别为:PCV3 Cap 47-62:NVISVGTPQNNKPWHA;PCV3 Cap 136-149:TSKKKHSRYFTPKP;旨在对PCV3 Cap蛋白抗原表位研究提供可靠依据。本发明采用ELISA的方法,利用PCV3 Cap单克隆抗体筛选PCV3 Cap蛋白B细胞线性抗原表位,含所述短肽的氨基酸序列。将所述的PCV3 Cap蛋白抗原表位在制备预防和/或治疗PCV3抗体中应用。本发明优点在于筛选出两条PCV3 Cap蛋白新抗原表位的多肽序列,完成了表位的鉴定,为PCV3表位疫苗和相关诊断试剂的研究打下基础,对PCV3检测和鉴别诊断提供有效的检测手段。

    一种PCV3的荧光免疫层析检测卡的制备方法

    公开(公告)号:CN110174510A

    公开(公告)日:2019-08-27

    申请号:CN201910341732.X

    申请日:2019-04-26

    摘要: 本发明公开了一种PCV3的荧光免疫层析检测卡的制备方法,在粘性底板上依次粘贴样品垫、结合垫(固定抗体)、层析膜和吸水纸,还包括PCV3单克隆抗体的配对标记,是取多支PCV3单克隆抗体分别标记荧光微球,采用双抗体夹心原理:在硝酸纤维膜上的测试区包被抗PCV3抗原单克隆抗体、质控区包被的鸡IgY,荧光标记另外一株PCV3单克隆抗体和羊抗鸡IgY。本发明的优点在于,不需要接种实验室仪器,检测时间快速,检测结果可见。与层析免疫方法不同的是,荧光免疫层析技术采用荧光微球作为标记物,每个微球中可包裹成千上万个荧光分子,大大提高了标记效率,有效的提高了灵敏度;同时荧光微球表面修饰有合适密度的羧基,用于与蛋白或抗体的共价偶联,提高标记物的稳定性。

    动物复合免疫增强剂与应用及确定该增强剂最佳组分含量的方法

    公开(公告)号:CN107432929B

    公开(公告)日:2021-09-28

    申请号:CN201610373835.0

    申请日:2016-05-27

    摘要: 本发明公开了一种动物复合免疫增强剂与应用及确定该增强剂最佳组分含量的方法,所述动物复合免疫增强剂由以下重量份配比的原料制成:黄芪多糖20‑80、刀豆素10‑60、盐酸左旋咪唑7.5‑30。所述的动物复合免疫增强剂在制备预防动物病毒性疾病药物中的应用,将配方中各组分按盐酸左旋咪唑:刀豆素:黄芪多糖=3:1:2的比例溶于0.9%生理盐水中,充分混匀,制得浓度为600mg/ml的注射剂;所述注射剂的剂量为60mg/kg/日,连续注射三天,腹腔或肌肉注射,以预防动物病毒性疾病。这种动物复合免疫增强剂具有安全性高、高效多能、生产成本低廉的优点。

    一种猪圆环病毒3型感染性克隆的构建及鉴定方法

    公开(公告)号:CN110195071A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910341731.5

    申请日:2019-04-26

    摘要: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型(PCV3)感染性克隆的构建方法及鉴定方法,构建时利用圆环病毒本身的特性,即PCV3的核酸为环状DNA,任何位置都可以看做是起始位点也可以看做是终点的特征,首先对PCV3的DNA序列进行重排,再对其进行改造。以往的研究仅是根据临床组织进行PCV3病毒的鉴定,对于检测病原的Western blot鉴定标准一直未见报道。因此,本发明在制备PCV3 Cap单克隆抗体的基础上,再进行感染性克隆的构建及鉴定。本发明方法不利用外源质粒获得PCV3感染性克隆,从而排除外源基因的感染;设计独特的检测引物,该引物仅能对环状PCV3 DNA进行PCR检测,对于成环前的PCV3 DNA不能进行PCR检测。PCR检测使用了PCV3的特异性单克隆抗体对其进行检测,实验数据更加可信。

    PCV3抗原表位的多肽序列筛选方法

    公开(公告)号:CN108276480A

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201810067056.7

    申请日:2018-01-24

    摘要: 本发明公开了PCV3抗原表位的多肽序列筛选方法,包括五条多其氨基酸序列分别为PCV3-1:GTPQNNKPWH;PCV3-2:SPAQQTKTMF;PCV3-3:WLQDDPYAESSTRKV;PCV3-4:MTSKKKHSRY;PCV3-5:VPEKTGMTDFYGTKE。本发明采用ELISA的方法检测PCV2与PCV3的抗血清IgG,通过ELISA的方法,筛选出与PCV3抗体特异性结合的短肽。筛选出的短肽,可以为将来PCV3的亚单位疫苗及相关诊断圆环病毒3感染的试剂,治疗圆环病毒3感染的抗体等提供可靠依据。本发明的优点在于,筛选出的五条多肽抗原性良好,抗原表位经鉴定为PCV3所特有,且序列保守,应用其表位序列可以有效的鉴别诊断动物是否感染PCV3,为以后防治PCV3提供有效的检测手段。