引物组合物及其在制备T载体上的应用

    公开(公告)号:CN117402902B

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202311683884.0

    申请日:2023-12-11

    IPC分类号: C12N15/66 C12N15/63 C12N15/11

    摘要: 本发明提供引物组合物及其在制备T载体上的应用,该引物组合物具有2条互补序列pComT‑F和pComT‑R,pComT‑F和pComT‑R的核苷酸序列分别如SEQ_1和SEQ_2所示。采用该引物组合物制备T载体的方法包括:两条互补的引物在变性退火后形成带粘性末端的双链DNA,该双链DNA带有2个XcmI酶切位点,使用限制性内切酶对载体进行酶切,将酶切后的载体和引物形成的双链DNA进行连接,最后转化感受态细胞,获得序列正确的克隆体;将克隆体进行质粒提取,经XcmI酶切,即得。整个制备T载体的工艺过程成本低、操作方便、T载体连接效率达到80%以上,甚至可以达到87.5%以上,为后续的分子克隆、噬菌体抗体文库构建、可溶表达载体构建提供研究基础。

    基于生物素连接酶的蛋白邻近标记系统、方法及应用

    公开(公告)号:CN117363639B

    公开(公告)日:2024-03-26

    申请号:CN202311656709.2

    申请日:2023-12-06

    IPC分类号: C12N15/70 C12N15/52 C07K14/00

    摘要: 本发明提供基于生物素连接酶的蛋白邻近标记系统、方法及应用,该蛋白邻近标记系统包括含有生物素连接酶TurboID编码核苷酸序列的重组质粒、含有目标蛋白编码核苷酸序列的重组质粒以及用于诱导表达生物素连接酶TurboID和目标蛋白的细胞系。本发明利用含有生物素连接酶TurboID编码核苷酸序列的重组质粒和含有目标蛋白编码核苷酸序列的重组质粒在大肠杆菌中共表达,在体内进行邻近标记,纯化后直接获得一种Biotin‑EFTu(生物素标记的目标蛋白),经质谱鉴定,该生物素标记时为单一位点标记,标记效率高,表达完即标记完,不需要进行额外的操作,工艺简单,操作便捷,可为高通量表达与筛选蛋白提供思路。

    引物组合物及其在制备T载体上的应用

    公开(公告)号:CN117402902A

    公开(公告)日:2024-01-16

    申请号:CN202311683884.0

    申请日:2023-12-11

    IPC分类号: C12N15/66 C12N15/63 C12N15/11

    摘要: 本发明提供引物组合物及其在制备T载体上的应用,该引物组合物具有2条互补序列pComT‑F和pComT‑R,pComT‑F和pComT‑R的核苷酸序列分别如SEQ_1和SEQ_2所示。采用该引物组合物制备T载体的方法包括:两条互补的引物在变性退火后形成带粘性末端的双链DNA,该双链DNA带有2个XcmI酶切位点,使用限制性内切酶对载体进行酶切,将酶切后的载体和引物形成的双链DNA进行连接,最后转化感受态细胞,获得序列正确的克隆体;将克隆体进行质粒提取,经XcmI酶切,即得。整个制备T载体的工艺过程成本低、操作方便、T载体连接效率达到80%以上,甚至可以达到87.5%以上,为后续的分子克隆、噬菌体抗体文库构建、可溶表达载体构建提供研究基础。

    K亚群禽白血病病毒RT-PCR检测引物及检测方法

    公开(公告)号:CN109338012B

    公开(公告)日:2021-10-26

    申请号:CN201810923129.8

    申请日:2018-08-14

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/686 C12N15/11

    摘要: 本发明涉及分子生物学检测技术领域,具体涉及一种K亚群禽白血病病毒RT‑PCR检测引物及检测方法。本发明所述引物为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。本发明的K亚群禽白血病病毒RT‑PCR检测方法,包括如下操作:(1)RNA模板制备;(2)扩增目的片段;(3)电泳鉴定扩增产物。本发明的引物特异性高,且扩展片段较短,整个PCR鉴定过程可以在2~2.5h内完成,不需经过测序就能快速鉴定出K亚群禽白血病病毒,为临床K亚群禽白血病的诊断节约大量时间。本发明方法操作简单,使用的仪器普通实验容易配置,检测费用低,便于临床推广应用。

    用于检测鸭腺病毒2型的引物对及试剂盒

    公开(公告)号:CN105039587A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510188800.5

    申请日:2015-04-20

    摘要: 本发明公开了鉴别鸭腺病毒2型的引物对及试剂盒,该引物对核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示。该对引物特异性强,可准确高效地鉴别出待检样品是否含有鸭腺病毒2型,而包括禽腺病毒、细小病毒、坦布苏、新城疫等在内的禽类病毒并不能扩增出DNA片段;灵敏度高,至少能检测出0.2558ng的样品DNA。本发明的引物及PCR检测试剂盒,检测时间短,整个PCR过程只需要2个小时左右;简便、经济、不需要购买昂贵的实验仪器及试剂,有利于及时发现病鸭是否感染该病毒,采取相应措施,避免造成更大的经济损失。

    一种新型鸭鹅捕捉器
    19.
    实用新型

    公开(公告)号:CN208597547U

    公开(公告)日:2019-03-15

    申请号:CN201820829018.6

    申请日:2018-05-30

    IPC分类号: A01K45/00

    摘要: 本实用新型公开了一种新型鸭鹅捕捉器,包括空心外杆、内杆和捕捉钩,空心外杆一端套接有可自由伸缩的内杆,空心外杆设有用于锁紧内杆的锁紧件;内杆一端套设与空心外杆内,内杆另一端固定连接有捕捉钩;捕捉钩包括用于与内杆固定的连接杆、圆弧杆和开口逐渐增大的延伸杆。本实用新型的有益效果为:不使用时可以将内杆完全回收至外杆中,可以放置在角落或挂在棚舍墙上,可以灵活调节外杆的长度,大大提高了该新型鸭鹅捕捉器的使用半径,减少了驱赶鸭、鹅对动物的应激。不再局限于捕捉成年鸭、鹅,雏鸭、雏鹅仍可使用,大大提高了该捕捉器的使用范围。

    一种养殖料线
    20.
    实用新型

    公开(公告)号:CN210120851U

    公开(公告)日:2020-03-03

    申请号:CN201920331323.7

    申请日:2019-03-15

    IPC分类号: A01K39/012

    摘要: 本实用新型公开了一种养殖料线,包括料斗、送料装置和输料管道;送料装置包括电机和送料箱,送料箱内设有可转动的绞龙叶片,送料箱开设有进料口和出料口;输料管道的一端与送料箱的出料口连通,输料管道的另一端封闭,输料管道还设有若干输料口;养殖料线有若干料喂养装置;下料喂养装置包括软管、下料管道和料桶,软管的一端与输料口连通,软管的另一端与下料管道的一端连通,下料管道对地面的料桶内输送饲料。往料斗内投送饲料,饲料从进料口流至送料箱内,电机带动绞龙叶片旋转,绞龙叶片将送料箱内的饲料送至输料管道,再依次经过输料管道的输料口、软管和下料管道,最终输送至各个料桶内,可实现集中送料,避免人员单独对每个料桶补料。