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公开(公告)号：CN118165961A
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202410393850.6
申请日：2024-04-02
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种新型嗜盐古菌氨肽酶的制备方法及其应用；步骤为：将重组质粒pTA04‑apHap转化原核宿主并表达；超声破碎裂解细胞，离心收集上清用于后续纯化；经镍柱亲和层析纯化后，得到APHap，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。APHap具有优良的酶学特性，尤其是对盐度、温度、pH均具有广适性和稳定性，同时对金属离子、有机溶剂及表面活性剂具有良好的耐受性。APHap可应用于高盐发酵食品中蛋白质N端氨基酸的水解，提高水解液中游离氨基酸的含量，同时可以脱除高盐发酵食品中的苦味，为高盐发酵食品行业提供了一种新型酶制剂。
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公开(公告)号：CN114807203B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202210338020.4
申请日：2022-04-01
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，涉及一种嗜盐古菌胞外蛋白酶截短体的制备方法及其应用；步骤为：将重组质粒pET28a‑hlyA转化原核宿主，诱导表达得嗜盐古菌蛋白酶，对其进行纯化和复性，孵育后得到高纯度的嗜盐古菌胞外蛋白酶截短体HlyA△CTE，其氨基酸序列为HlyA的成熟酶序列缺少了CTE结构域(SEQ ID No.1)。HlyA△CTE具有优良的酶学特性，尤其是在高温、低盐、高盐、碱性等环境下均具有良好的稳定性；同时HlyA△CTE可用于催化蛋白类底物水解，包括对偶氮酪蛋白为代表的大分子蛋白质底物的催化作用，具体应用于鱼露发酵中促进对鱼蛋白的水解，为高盐、高温等环境中的蛋白降解提供新型酶制剂。
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公开(公告)号：CN114134125B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202110593384.2
申请日：2021-05-28
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，涉及一种嗜盐古菌亚硝酸盐还原酶的制备方法及其应用；步骤为：首先基于嗜盐古菌(Haloterrigena sp.)KZCA68‑1的基因组获得编码基因nirKHtg；通过分子克隆技术将nirKHtg连接到载体上构建重组质粒；将重组质粒转化嗜盐古菌宿主，得到转化后的重组宿主细胞在Hv‑YPC液体培养基中培养至稳定期后低温离心收集菌体，于细胞裂解液中进行重悬，经超声破碎、离心收集上清液，用于重组蛋白纯化；采用镍亲和层析纯化以及凝胶过滤层析纯化后，获得高纯度还原酶，记为NirKHtg。本发明得到的NirKHtg具有良好的酶学特性，高盐腌制食品、废水处理等过程中降解亚硝酸盐。
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公开(公告)号：CN114807203A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210338020.4
申请日：2022-04-01
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，涉及一种嗜盐古菌胞外蛋白酶截短体的制备方法及其应用；步骤为：将重组质粒pET28a‑hlyA转化原核宿主，诱导表达得嗜盐古菌蛋白酶，对其进行纯化和复性，孵育后得到高纯度的嗜盐古菌胞外蛋白酶截短体HlyA△CTE，其氨基酸序列为HlyA的成熟酶序列缺少了CTE结构域(SEQ ID No.1)。HlyA△CTE具有优良的酶学特性，尤其是在高温、低盐、高盐、碱性等环境下均具有良好的稳定性；同时HlyA△CTE可用于催化蛋白类底物水解，包括对偶氮酪蛋白为代表的大分子蛋白质底物的催化作用，具体应用于鱼露发酵中促进对鱼蛋白的水解，为高盐、高温等环境中的蛋白降解提供新型酶制剂。
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公开(公告)号：CN107828686A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201711130735.6
申请日：2017-11-15
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明公开了一种高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌亚种及其应用，属于生物技术领域。通过从豆豉中分离、纯化，采用奶粉培养基初筛、液体发酵培养基复筛得到一株纤溶活性强的纳豆激酶生产菌株，通过生理生化鉴定与16S rRNA鉴定为枯草芽孢杆菌亚种Bacillus subtilis subsp.UJS-1，保藏编号为CGMCC NO：14434。利用该菌种与液体发酵培养基生产含有纳豆激酶发酵液，酶活高达29020U/g，利用发酵液制备高纯纳豆激酶粉，酶活高达527230u/g，以纳豆冻干粉和高纯纳豆激酶粉为主要原料制备的一种可预防心脑血栓疾病的保健品具有纳豆激酶活性高，食疗效果好，无副作用的特点。
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公开(公告)号：CN103468600B
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201310261606.6
申请日：2013-06-26
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明一种发酵谷物的乳酸菌及其用途，涉及食品生物技术领域。乳酸菌Dy-1，建议的分类名称为植物乳杆菌，即Lactobacillus plantarum；该菌株于2012年4月18日送交位于中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.6016。利用上述乳酸菌冻干粉发酵麦胚或大麦，其发酵液经离心所得上清液再经冷冻干燥所获得的发酵提取物，对HT-29结肠癌、SGC-7901胃癌细胞具有显著的促进凋亡和抑制增殖作用；对HT-29结肠癌诱发的荷瘤裸鼠模型具有显著的抑制肿瘤生长和提高其免疫力的功能。
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公开(公告)号：CN102687792B
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201210176743.5
申请日：2012-06-01
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明涉及利用啤酒糟和米糠粕经益生菌三期发酵，生产一种高效、极低成本的饲用微生态制剂，或者叫微生物饲料添加剂。其特征是：啤酒糟和米糠粕经过脉孢菌一期初步发酵预处理，充分降解木质素、纤维素等，再添加部分米糠粕和少量豆粕经芽孢杆菌和酵母菌二期发酵，吸收霉菌降解废弃物产生的营养物质及霉菌本身解体的营养物质。然后加部分米糠粕和少量豆粕，经乳酸菌、双歧杆菌等最后在单向膜厌氧袋中经三期厌氧发酵成成品。本发明固体原料不需高温灭菌，成品不需要干燥处理，保质期一年以上，添加量达5-30%，活性益生菌数极高，酶量丰富，杂菌极少，饲养效果明显，具有明显的生态和社会效益。
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公开(公告)号：CN116445437A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310421084.5
申请日：2023-04-19
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种新型嗜盐古菌硝酸盐还原酶的制备方法及其应用；步骤为：将构建的重组质粒pTA04‑nasHor转化原核宿主，扩大培养后离心收集菌体；超声破碎裂解细胞，离心后收集上清用于后续纯化；经镍柱亲和层析纯化和超滤浓缩后，得到NasHor，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；NasHor具有优良的酶学特性，尤其是对盐度、温度、pH均具有广适性，并且具有较佳的盐度、温度、pH稳定性，同时对金属离子和有机溶剂具良好的耐受性。NasHor可应用于腌制蔬菜和污水中硝酸盐的降解，为高温、高盐、碱性等环境中的硝酸盐降解提供了一种新型酶制剂，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN111705050B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202010425190.7
申请日：2020-05-19
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，涉及一种新型嗜盐古菌胞外蛋白酶的制备方法及其应用；步骤为：首先基于嗜盐古菌DYF 46的基因组获得编码基因hly；通过分子克隆技术将hly连接到载体上构建重组质粒；将重组质粒转化原核生物宿主，得到转化后的重组宿主细胞在含有卡那霉素的LB液体培养基中培养，经培养、诱导表达后低温离心收集菌体，于细胞裂解液中进行重悬，经超声破碎、离心收集上清液，用于重组蛋白纯化；采用镍亲和层析纯化蛋白结合柱上复性方法获得成熟酶，经凝胶过滤层析纯化后获得高纯度Hly。本发明得到的Hly具有优良的酶学特性，可应用于洗涤剂、废水处理、制药和环境修复等复杂、含盐的降解蛋白质的生产加工过程中。
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公开(公告)号：CN110862978B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN201910938849.6
申请日：2019-09-30
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种重组嗜盐古菌蛋白酶的制备方法；步骤为：以Halostella sp.DL‑M4的基因组为模板，pET28a质粒为表达载体构建重组质粒；重组质粒转化大肠杆菌细胞，诱导表达，离心收集菌体进行细胞重悬及破碎，再次离心取上清液，加入β‑巯基乙醇得到混合液过镍柱，酶原与镍介质结合复性，最后经二次除杂蛋白及目标蛋白洗脱、超滤离心浓缩、凝胶过滤层析，得到重组嗜盐古菌蛋白酶；本发明具有良好的通用性，纯化步骤更简单，生产周期更短，获得的蛋白酶纯度高，最终获得比酶活为1159.15U/mg的嗜盐古菌蛋白酶。
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