一种幼苗期鉴定烟草青枯病抗性的方法

    公开(公告)号:CN104152532B

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201410385968.0

    申请日:2014-08-07

    IPC分类号: C12Q1/18 A01G7/00

    摘要: 本发明公开了一种幼苗期鉴定烟草青枯病抗性的方法,将保水剂与珍珠岩按2:1的比例混均,消毒后装入6孔细胞培养板,将烟草种子播种在细胞培养板上,每个品种各播种到一个孔中,10~20粒/孔,放在无菌培养室中培养,温度环境25℃、每天光照16小时、光照强度4000lux、相对湿度70~80%,出苗后,每个孔中均匀的留苗5株,用烟草育苗专用肥配制营养液,使其中氮肥浓度达到100ppm,追施到培养板中,待小苗长至两片真叶时,将青枯菌悬浮液用移液枪接种到细胞培养板的每个孔中,每孔接种1ml,15天后调查记录。本发明鉴定周期更短,25天小苗即可用于鉴定,不受季节限制,试验稳定性强。

    利用基因芯片结合RealtimePCR筛选的烟草内参基因及其方法

    公开(公告)号:CN103642907B

    公开(公告)日:2015-10-21

    申请号:CN201310594033.9

    申请日:2013-11-22

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种利用基因芯片结合Real time PCR筛选的烟草内参基因及其方法,应用本发明的方法,筛选得到烟草新的内参基因烟草磷酸核酮糖激酶基因和烟草双半乳糖二酰甘油合酶基因,其中磷酸核酮糖激酶基因的稳定性高于目前所有报道的烟草内参基因,而烟草双半乳糖二酰甘油合酶基因的稳定性仅次于目前报道烟草内参基因EF-1-a。

    一种HRM检测烟草镉转运基因NtHMA4突变的方法

    公开(公告)号:CN108251550B

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN201711320346.X

    申请日:2017-12-12

    摘要: 本发明公开了一种HRM检测烟草镉转运基因NtHMA4突变的方法,其特征在于:包含以下步骤:(1)采用CTAB法提取烟草样品苗期叶片基因组DNA;(2)以所述基因组DNA为模板,利用引物对进行PCR扩增;(3)PCR扩增产物利用HRM检测仪器LightScanner96进行突变位点扫描;(4)根据HRM曲线结果,判断烟草待检样品的基因型;当待测样品的HRM曲线与野生型对照贵烟1号一致时,则为野生型材料;如果出现其他曲线类型,且HRM荧光曲线峰值ΔF≥0.05,则为疑似基因突变材料;(5)DNA测序验证HRM筛选结果;(6)NtHMA4材料的镉表型测定。

    用于检测烟草eIF4E1基因SNP突变位点的Bi-PASA标记引物及检测方法

    公开(公告)号:CN113278725A

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN202110664941.5

    申请日:2021-06-16

    IPC分类号: C12Q1/6895 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种用于检测烟草eIF4E1基因SNP突变位点的Bi‑PASA标记引物及检测方法,外引物P的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,外引物Q的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,内引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,内引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示,上述引物序列中小写字母碱基为引入的错配碱基。采用本发明的四个引物,结合一次PCR和电泳,便可以准确地检测出eIF4E1基因SNP突变位点回交转育过程中回交和自交后代的基因型,提高分子标记辅助轮回选择效率,加快育种进程。