一种标记苹果授粉后花粉管微丝细胞骨架的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN109061133B

    公开(公告)日:2019-11-05

    申请号:CN201810748383.9

    申请日:2018-07-10

    IPC分类号: G01N33/533 G01N21/64

    摘要: 本发明属于植物生物技术领域,涉及一种标记苹果授粉后花粉管微丝细胞骨架的试剂盒及方法。先提供一种标记苹果授粉后花粉管微丝细胞骨架的试剂盒,包括:花柱固定液试剂A,花柱洗涤液试剂B,微丝染料试剂C和胼胝质免疫荧光试剂D。再应用所述试剂盒标记微丝细胞骨架,步骤为:1)取授粉的花柱;2)用花柱固定液试剂A对花柱固定;3)用花柱洗涤液试剂B对花柱洗涤;4)用微丝染料试剂C和胼胝质免疫荧光试剂D的混合溶液对花柱染色;5)对花柱滴加抗荧光猝灭剂,在激光共聚焦显微镜下观察花柱中花粉管微丝细胞骨架。本发明所述试剂盒和方法实现了快速、灵敏、准确、简便地观察苹果花粉管内微丝骨架的结构与排列方式。

    苹果花柱自花与异花授粉差异SUMO激酶蛋白筛选方法

    公开(公告)号:CN109254092A

    公开(公告)日:2019-01-22

    申请号:CN201811136907.5

    申请日:2018-09-28

    IPC分类号: G01N30/02 G01N27/62 G01N33/68

    摘要: 本发明属于分子生物学和基因工程领域,涉及一种苹果花柱自花与异花授粉差异SUMO激酶蛋白筛选方法,尤其涉及两个苹果SUMO激酶分子,涉及2个在苹果花柱自花授粉及异花授粉过程中差异表达的SUMO激酶SUMO-activating enzyme subunit 1和SUMO-activating enzyme subunit 2,两个SUMO激酶都含有激酶结构域,属于SUMO家族成员。本发明公开了在利用自花授粉及异花授粉的苹果花柱筛选差异蛋白的方法,自花授粉及异花授粉所筛选的SUMO激酶差异倍数均在1-1.5倍之间,明确了在苹果自花授粉过程中有SUMO化修饰的参与。

    一种标记植物花粉微丝微管细胞骨架的方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN108424876A

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201710081736.X

    申请日:2017-02-15

    IPC分类号: C12N5/04 C12Q1/02

    摘要: 本发明提供一种用于标记植物花粉微丝微管细胞骨架的试剂盒,包括花粉固定液试剂A,花粉洗涤液试剂B,花粉微丝染料试剂组合C,以及花粉微管染料试剂组合D。本发明还提供利用该试剂盒标记植物花粉微丝微管细胞骨架的方法,具体流程如下:培养花粉—固定花粉管—洗涤花粉管—微丝染料室温染色花粉管—微管染料室温染色花粉管—激光共聚焦显微镜观察。本方法可实现快速、灵敏、准确性高、简便地观察木本植物花粉管内微丝微管骨架结构与排列方式,为直观观察木本植物花粉管内微丝微管骨架结构与排列方式提供技术支持。

    一种木本植物花粉基因枪瞬时转化方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN106801066A

    公开(公告)日:2017-06-06

    申请号:CN201710039678.4

    申请日:2017-01-18

    IPC分类号: C12N15/82 A01H5/00

    摘要: 本发明提供一种高效木本植物花粉基因枪瞬时转化方法及其试剂盒。所述试剂盒中包括以下试剂组合:用于配制金粉悬液的试剂、用于制备DNA子弹的试剂以及花粉液体培养基。本发明以苹果花粉为试材,通过水合花粉、DNA子弹制备以及利用氦气轰击刚萌发的花粉粒,进行高效的基因枪瞬时转化。采用本发明的方法可实现快速、灵敏、准确性高、简便地验证木本植物材料花粉管基因的功能,为直观鉴定木本植物花粉管内基因表达及功能验证提供技术体系。

    同时检测樱桃是否感染苹果褪绿叶斑病毒和李属坏死环斑病毒的方法及专用引物

    公开(公告)号:CN103031387A

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201210585593.3

    申请日:2012-12-28

    摘要: 本发明公开了一种同时检测樱桃是否感染苹果褪绿叶斑病毒和李属坏死环斑病毒的方法及专用引物。该用于检测植物病毒的引物,为引物对甲和引物对乙;所述引物对甲为检测苹果褪绿叶斑病毒的引物对,一条引物序列如SEQ ID No.1所示,另一条引物序列如SEQ ID No.2所示;所述引物对乙为检测李属坏死环斑病毒的引物对,一条引物序列如SEQ ID No.3所示,另一条引物序列如SEQ ID No.4所示。本发明中所建立的多重RT-PCR可以同时检测出生产中樱桃ACLSV和PNRSV病毒复合侵染现象,比单一RT-PCR节省时间;操作上也更为简单;此外,也减少了试验中所消耗的药品,更为经济。当反转录体系中的带病植株的总RNA量为10-4μg时,经过PCR扩增后,仍可以同时检测到两种病毒。

    一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法

    公开(公告)号:CN101260146B

    公开(公告)日:2010-11-03

    申请号:CN200810104851.5

    申请日:2008-04-24

    IPC分类号: C07K1/26

    摘要: 本发明公开了一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法。该方法包括以下步骤:1)将植物材料在液氮中研碎,加入-20℃预冷的含有10g/100mL的三氯乙酸和0.07ml/100mL的β-巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆,-20℃放置1h,然后12000rpm离心15min,保留沉淀;2)向沉淀中加入4倍沉淀体积的含有0.07ml/100mL的β-巯基乙醇的丙酮溶液,混匀-20℃放置1h,然后12000rpm离心15min,保留沉淀;3)重复步骤2)6次,得到总蛋白;4)对步骤3)的总蛋白进行等电聚焦电泳,蛋白质上样量为300ug/170mm胶条,然后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳结束后进行银染。

    基于聊天用摄像头的QR二维条码识读方法

    公开(公告)号:CN101059834A

    公开(公告)日:2007-10-24

    申请号:CN200710099877.0

    申请日:2007-05-31

    IPC分类号: G06K7/00

    摘要: 本发明公开了一种基于聊天用摄像头的QR二维条码自动识读方法,对于目前已广泛普及的聊天用摄像头所读取的QR二维条码,能够快速有效的识别。本发明不局限于专用二维条码识读设备,可对输入条码的限制条件放宽。针对自然光照下的QR条码图像,设计了自适应阈值分割算法进行条码图像的二值化。在精确定位QR条码的四个顶点时,根据QR码中位置探测图形的特性确定了其中的三个顶点;在定位第四个顶点时,通过挖空算法将QR条码图像挖空,排除了条码内部点对使用Hough变换时的干扰;同时针对传统的Hough变换计算量大、空间复杂度高的缺点,设计了过已知点的Hough变换。根据QR码图像不失真时为正方形的特点,采用控制点变换的方法进行几何失真校正,变换时的灰度插值采用双线性插值法。