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公开(公告)号：CN118497422A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410715620.7
申请日：2024-06-04
申请人： 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d体系检测猪乙脑病毒的方法，属于分子生物学诊断技术领域。本发明的方法可以成功检测出临床阳性JEV样本，结合RNA荧光报告分子可对JEV进行现场可视化检测，只使用蓝光透射仪进行照射，观察反应体系扩增产物是否呈现荧光即可判定检测结果，或者使用qPCR仪对其进行定量检测，1h以内即可判定结果。本发明的引物和crRNA特异性强、敏感性好，且操作简单、检测快速、结果可视化，使得本发明建立的基于RAA和CRISPR‑Cas13d技术的检测JEV的方法可以用于JEV的现场可视化检测，从而为提高生猪养殖行业检测JEV水平，降低养殖场生物安全风险提供技术手段。
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公开(公告)号：CN108409857A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810069480.5
申请日：2018-01-24
摘要： 本发明公开了一种虹鳟抗传染性造血器官坏死病卵黄抗体的制备及其应用，制备方法包括以下步骤：S1.IHNV灭活抗原制备；S2.蛋鸡免疫；S3.免疫鸡蛋卵黄收集；S4.卵黄抗体的去脂提纯，三次添加饱和硫酸铵溶液提纯IHNV卵黄抗体；本方法制备得到的传染性造血器官坏死病毒（IHNV）卵黄抗体性质稳定，效价高，可用于工业大规模制备IHNV卵黄抗体。本发明的制备方法所制得的卵黄抗体可用于治疗传染性造血器官坏死病，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102925547B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201210271618.2
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川太平洋生物技术有限公司
摘要： 本发明与动物疫病分子生物学检测领域有关，具体涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测支气管败血波氏杆菌的检测试剂盒及其方法。本发明根据NCBI中Genbank数据库中发布的支气管败血波氏杆菌序列，经过序列比对，采用LAMP引物设计软件设计引物，运用环介导等温扩增技术进行支气管败血波氏杆菌的检测，具有快速、灵敏度高、特异性强、成本低等特点，可广泛应用于临床的检测。
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公开(公告)号：CN102925588B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201210271637.5
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川省欧邦动物药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪巨细胞病毒的LAMP试剂盒，每个反应用量为23μL的LAMP反应液和1μL的BstDNA聚合酶，该23μL的LAMP反应液中各组分及浓度如下：2.5μL的聚合酶缓冲液，3mM的MgSO4，1M甜菜碱，0.4mMdNTP，0.25mM引物F3，0.25mM引物B3，2mM引物FIP，2mM引物BIP；其中，所述2.5μL的聚合酶缓冲液的组分及浓度为：20mM？Tris-HCl、其pH？8.8，10mM？KCl，10mM(NH4)2SO4，1％Triton？X-100。本发明可以高效快速的对可疑PCMV感染进行检测，且检测手段简单，不需要昂贵的实验仪器，适合在临床疾病诊断中推广。
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公开(公告)号：CN118006603B
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410036555.5
申请日：2024-01-10
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a检测猪流行性腹泻病毒的试剂盒及其应用，属于分子生物学诊断技术领域。本发明的引物(SEQ ID NO.3和4)和CrRNA(SEQ ID NO.13)特异性强、敏感性好，含有上述引物和CrRNA的试剂盒操作简单、检测快速、结果可视化，使得本发明建立的基于RT‑RAA和CRISPR‑Cas13a技术的检测PEDV的方法可以用于PEDV的现场可视化检测，从而为提高生猪养殖行业检测PEDV水平，降低养殖场生物安全风险提供技术手段。
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公开(公告)号：CN118581277A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410785519.9
申请日：2024-06-18
申请人： 四川农业大学 , 成都市畜禽遗传资源保护中心 , 生猪技术创新中心(重庆)
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13d技术检测猪圆环病毒2型的方法，属于分子生物学诊断技术领域。该方法能够成功检测出临床阳性PCV2样本，并且通过结合使用RNA荧光报告分子，可以实现对PCV2的现场可视化检测，检测过程仅需使用蓝光透射仪进行照射，通过观察反应体系中扩增产物是否呈现荧光，即可判定检测结果。此外，该试剂盒也支持使用qPCR仪器进行定量检测，从而在1小时内快速判定结果。本发明不仅减少了诊断成本和时间，并且结果可视化，对于提高生猪养殖业中PCV2水平的检测能力、降低养殖场的生物安全风险将具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117782745A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202410062279.X
申请日：2024-01-16
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： G01N1/28 , G01N1/06 , G01N1/30 , G01N1/36 , C12Q1/6895 , C12Q1/6869
摘要： 本发明公开了一种获取玉米叶片韧皮部的方法，该方法包含：石蜡切片和激光捕获显微切割。本发明通过石蜡切片和激光捕获显微切割技术的结合，获得了纯合无污染的高质量玉米叶片的韧皮部组织，建立了适用于玉米叶片韧皮部组织细胞的激光显微切割技术体系，对玉米叶片维管束组织中的韧皮部进行完整提取分离，且RNA完整未降解，有利于后续对玉米叶片如何调控根系向营养性进行进一步的探索和研究，同时为玉米叶片维管束的研究提供精准无误的实验材料，也为研究玉米叶片韧皮部的分子生物学及基因组学研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN115948473B
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202211565866.8
申请日：2022-12-07
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/869 , C12N15/41 , C12N15/66 , A61K39/125 , A61P31/14
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公开(公告)号：CN115948473A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202211565866.8
申请日：2022-12-07
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/869 , C12N15/41 , C12N15/66 , A61K39/125 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种表达外源SVA衣壳蛋白伪狂犬病毒载体及其构建方法与应用，属于生物技术领域。该构建方法包括以下步骤：(1)将SEQ ID NO.1序列插入到含有伪狂犬gI和28K基因序列同源臂的pEGFP‑gI28k真核表达质粒中，获得pEGFP‑gI28k‑VP4‑1载体；(2)将pEGFP‑gI28k‑VP4‑1和psgRNA‑gE质粒转染BHK‑21细胞，再接种已缺失TK基因的伪狂犬病毒载体PRVXJ；(3)待接种后的细胞病变80％，反复冻融细胞，离心取上清，上清液中含有PRV真核表达载体，简称为rPRVXJ‑ΔgE/gI/TK‑VP4‑2‑3‑1；(4)载体纯化。
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