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公开(公告)号：CN102925588B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201210271637.5
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川省欧邦动物药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪巨细胞病毒的LAMP试剂盒，每个反应用量为23μL的LAMP反应液和1μL的BstDNA聚合酶，该23μL的LAMP反应液中各组分及浓度如下：2.5μL的聚合酶缓冲液，3mM的MgSO4，1M甜菜碱，0.4mMdNTP，0.25mM引物F3，0.25mM引物B3，2mM引物FIP，2mM引物BIP；其中，所述2.5μL的聚合酶缓冲液的组分及浓度为：20mM？Tris-HCl、其pH？8.8，10mM？KCl，10mM(NH4)2SO4，1％Triton？X-100。本发明可以高效快速的对可疑PCMV感染进行检测，且检测手段简单，不需要昂贵的实验仪器，适合在临床疾病诊断中推广。
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公开(公告)号：CN102925588A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210271637.5
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川省欧邦动物药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪巨细胞病毒的LAMP试剂盒，每个反应用量为23μL的LAMP反应液和1μL的BstDNA聚合酶，该23μL的LAMP反应液中各组分及浓度如下：2.5μL的聚合酶缓冲液，3mM的MgSO4，1M甜菜碱，0.4mMdNTP，0.25mM引物F3，0.25mM引物B3，2mM引物FIP，2mM引物BIP；其中，所述2.5μL的聚合酶缓冲液的组分及浓度为：20mM Tris-HCl、其pH 8.8，10mM KCl，10mM(NH4)2SO4，1％Triton X-100。本发明可以高效快速的对可疑PCMV感染进行检测，且检测手段简单，不需要昂贵的实验仪器，适合在临床疾病诊断中推广。
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公开(公告)号：CN115976108B
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202310034864.4
申请日：2023-01-10
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/869 , C12N15/65 , C12N15/64 , C12N15/34 , C12N15/24 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61K38/20 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一种表达PCV2、PCV3Cap蛋白的重组伪狂犬病毒载体、构建方法与应用，属于疫苗技术领域。该构建方法包括以下步骤：(1)将SEQ ID NO.1序列插入到pEGFP‑gI28k真核表达质粒中，获得pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒；(2)pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒和psgRNA‑gE质粒转染BHK‑21细胞，再接种PRV‑XJ‑ΔTK病毒液；(3)待细胞出现80％的病变并观察到发出绿色荧光的病毒蚀斑时，反复冻融，离心取上清，上清液中含有PRV真核表达载体rPRVXJ‑ΔgE/gI/TK‑2Cap‑3Cap‑IL4；(4)纯化载体。
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公开(公告)号：CN118006603A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410036555.5
申请日：2024-01-10
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a检测猪流行性腹泻病毒的试剂盒及其应用，属于分子生物学诊断技术领域。本发明的引物(SEQ ID NO.3和4)和CrRNA(SEQ ID NO.13)特异性强、敏感性好，含有上述引物和CrRNA的试剂盒操作简单、检测快速、结果可视化，使得本发明建立的基于RT‑RAA和CRISPR‑Cas13a技术的检测PEDV的方法可以用于PEDV的现场可视化检测，从而为提高生猪养殖行业检测PEDV水平，降低养殖场生物安全风险提供技术手段。
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公开(公告)号：CN117363587A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202210793566.9
申请日：2022-07-07
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/50 , C07K14/165 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61K39/245 , A61P31/14 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了表达猪德尔塔冠状病毒S蛋白的重组伪狂犬病毒及其应用。所述重组病毒为将德尔塔冠状病毒S蛋白的编码基因导入缺失了致病基因部分序列的伪狂犬病毒中得到的重组病毒。所述S蛋白可为序列2或序列2的第243‑692位氨基酸所示的蛋白质。所述伪狂犬病毒为缺失了序列表中序列4所示的第39‑918位核苷酸的TK基因部分序列的伪狂犬病毒。实验证明使用该重组病毒免疫试验动物后可以刺激试验动物产生特异性的抗体，可以用于制备或开发德尔塔冠状病毒所致疾病的疫苗或药物。
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公开(公告)号：CN114177232A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202210027316.4
申请日：2022-01-11
申请人： 四川农业大学 , 成都禾正众邦动物药业有限公司
IPC分类号： A61K36/82 , A61K31/353 , A61P31/04 , A61K135/00 , A61K127/00
摘要： 本发明提供了一种茶叶多酚提取物的提取方法、提取的茶叶多酚提取物及其应用，属于细菌感染预防技术领域。本发明提供的基于老茶枝、老茶叶以及茶沫的茶叶多酚提取物的提取方法，能够使老茶枝、老茶叶以及茶沫中的多酚提取率高达16～26％，提取的茶叶多酚提取物中多酚含量达654～702mg/kg，EGCG含量达456～547mg/kg，能够充分利用茶产业资源，经济高效。同时，本发明提供的茶叶多酚提取物可在3d内使兔产气荚膜梭菌病的治愈率达到85％以上，可在3d内使牛产气荚膜梭菌病的治愈率达到100％，对兔产气荚膜梭菌病和牛产气荚膜梭菌病的治疗作用十分显著。
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公开(公告)号：CN109609520A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910005128.X
申请日：2019-01-03
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/34 , C12N15/70 , A61K39/187 , A61P31/20
CPC分类号： C07K14/005 , A61K39/12 , A61K2039/53 , A61P31/20 , C12N15/70 , C12N2710/12022 , C12N2710/12034
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种非洲猪瘟的合成基因、建立方法以及mRNA疫苗，非洲猪瘟病毒mRNA疫苗，含有包被的非洲猪瘟的mRNA；非洲猪瘟病毒mRNA疫苗的制备方法为将重组K205R-IRES-A104R-IRES-E183L基因连接至pMD19-T载体，构成亲本pMD19-K205R-IRES-A104R-IRES-E183L质粒；将亲本质粒转化感受态细胞，扩增后提取质粒即克隆质粒，在克隆质粒中提取目的片段；将目的片段进行体外转录即得mRNA。本发明非洲猪瘟mRNA疫苗，填补现有的空白区域、用于预防ASFV感染；克隆质粒制备简单，成本较低，适用于产业化生产。
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公开(公告)号：CN107034172A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710347697.3
申请日：2017-05-17
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N5/071
CPC分类号： C12N5/0686
摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，具体来说是一种适用于低血清Vero细胞系的建立方法，Vero细胞用梯度血清浓度培养液培养，解决的是Vero细胞在高血清环境中，培养成本高、血清成分损伤细胞等一系列缺点，适用于低血清Vero细胞系的建立，是培养出一种适应低血清环境的细胞系，具有省时、省力、减少血源性病原污染、降低成本等优点。现已成功应用于培养Vero细胞，并成功应用于疫苗生产、获得高质量高滴度的病毒培养液等多方面研究，本发明的适用低血清的Vero细胞系形态良好，增殖较快，可直接应用于商业化开发。
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公开(公告)号：CN106435035A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201611096843.1
申请日：2016-12-02
申请人： 四川农业大学
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143
摘要： 本发明公开了一种用于检测PRRSV和PEDV双重RT-PCR的方法及引物，该引物包括PRRSV引物对和PEDV引物对；PRRSV引物对包括引物PRRSV-P1和引物PRRSV-P2，所述PEDV引物对包括引物PEDV-P1和引物PEDV-P2；该方法通过对PRRSV的ORF7基因和PEDV的S基因序列设计特异性引物，保证扩增片段的准确性和引物的特异性；通过对反应体系中各组分的优化，实现了两种病毒在同一反应体系中的同时扩增。本发明建立的双重RT-PCR方法能快速有效地对PRRSV和PEDV进行诊断，对实际生产有重要意义。
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