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公开(公告)号:CN114752582B
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202210321130.X
申请日:2022-03-24
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/14 , C12R1/19 , C12R1/84
摘要: 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到249.61%的相对活力,在葡萄糖浓度为2mol/L时,其相对活力仍能达到98.37%,具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN114752582A
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202210321130.X
申请日:2022-03-24
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/14 , C12R1/19 , C12R1/84
摘要: 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到249.61%的相对活力,在葡萄糖浓度为2mol/L时,其相对活力仍能达到98.37%,具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN114703165A
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN202210376425.7
申请日:2022-04-02
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体T331Q,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,本发明突变体可在400mmol/L葡萄糖的激活下最高达到239.0%的相对活力,在葡萄糖浓度为1.5mol/L时,其相对活力仍能达到112.61%,具有良好的葡萄糖耐受能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN114276971A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202210018189.1
申请日:2022-01-07
申请人: 天津科技大学 , 山东合成远景生物科技有限公司
IPC分类号: C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/56 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/31 , C12P19/24 , C12P19/18 , C12P19/00 , C12R1/19
摘要: 本发明涉及一种构建重组大肠杆菌利用甘露糖合成GDP‑岩藻糖,进而生产2′‑岩藻糖基乳糖并提高甘露糖利用率的方法,属于微生物代谢工程领域。所述工程菌以大肠杆菌为出发菌株,敲除lac操纵子序列中Plac启动子序列以及lacI、lacZ基因,并且在1acI、lacZ基因位点上过表达wcaG、gmd、lacy基因,之后在基因组上敲除磷酸甘露糖异构酶编码基因manA,过表达磷酸甘露糖变位酶编码基因manB、α‑(1,2)‑岩藻糖基转移酶编码基因futC、甘露糖‑1‑磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因manC所得。本发明提供的2′‑岩藻糖基乳糖从头合成途径生产2′‑岩藻糖基乳糖的发酵策略,能够大幅提高大肠杆菌发酵生产2′‑岩藻糖基乳糖碳源利用率。
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公开(公告)号:CN118895267A
公开(公告)日:2024-11-05
申请号:CN202410786595.1
申请日:2024-06-18
申请人: 亚联糖业(广东)有限公司 , 天津科技大学
摘要: 本发明涉及酶工程技术领域,尤其涉及一种酶活力提高的蔗糖异构酶突变体P271F及其重组菌株和应用。本发明提供了一种蔗糖异构酶突变体,所述蔗糖异构酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述蔗糖异构酶突变体是在分散泛菌(Pantoea dispersa)来源的野生型蔗糖异构酶成熟肽的基础上,发生第271位氨基酸由Pro突变成Phe获得的。相同条件下,本发明突变体P271F的比活力为640.19U/mg,较野生型提高了22.6%;利用本发明中的蔗糖异构酶突变体进行催化实验,催化产物中异麦芽酮糖的纯度可达到99.97%。本发明为蔗糖异构酶工业化应用方面奠定了基础。
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公开(公告)号:CN118879691A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202410650601.0
申请日:2024-05-24
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/65 , C12N15/12 , C12N15/55 , C12N9/22 , C07K14/435
摘要: 本发明属于微生物与基因工程技术领域,具体涉及一种突变启动子PLC2及其应用。启动子PLC2的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示,本申请通过在乳糖诱导启动子的基础上添加CRE元件,并对CRE序列进行突变,利用葡萄糖介导的CCR效应实现负调控蛋白阻滞RNA聚合酶的转录功能,使得添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达。本发明提供的启动子PLC2,在添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达,当葡萄糖的添加量为1.5%时,在12h和24h测得表达量相比于原始启动子Plac分别下降66%和63%。与此同时,在不添加葡萄糖只添加IPTG的情况下,PLC2仍然保持与原始启动子Plac相当的转录水平。
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公开(公告)号:CN117487735A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311461344.8
申请日:2023-11-06
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明属于基因工程和酶工程领域,涉及工业微生物的育种,特别涉及一种用于生产蛋白酶的底盘菌株及其构建方法。本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌基因工程菌,该基因工程菌不表达解淀粉芽孢杆菌基因组上的六种胞外蛋白酶基因aprE,bpr,vpr,mpr,nprE,epr,胞外多糖基因簇eps,聚谷氨酸基因簇pgs,sacB基因,和双组分系统调节蛋白yycI基因。并且利用所述底盘菌株实现异源蛋白酶的高效表达,所述蛋白酶选自氨肽酶、碱性蛋白酶或角蛋白酶。
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公开(公告)号:CN116656660A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202211706161.3
申请日:2022-12-29
申请人: 天津科技大学 , 茂德科技(天津)有限公司
摘要: 本发明涉及酶工程技术领域,尤其涉及一种提高蔗糖异构酶热稳定性的突变体及其重组菌株。所述蔗糖异构酶突变体的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。所述蔗糖异构酶突变体是在分散泛菌(Pantoea dispersa)来源的野生型蔗糖异构酶的基础上,发生第199位氨基酸由Ala突变成Leu获得的,其热稳定性较野生型提高了32.51%。利用本发明中的蔗糖异构酶突变体进行催化实验,催化产物中异麦芽酮糖的纯度可达到100%。本发明为蔗糖异构酶工业化应用方面奠定了基础。
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公开(公告)号:CN115011582B
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202210525603.8
申请日:2022-05-06
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/02 , C12P7/22 , C12R1/84 , C12R1/19
摘要: 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株,获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体A354P,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。相同条件下,突变体A354P的比活力为36.71U/mg,较野生型提高了40.28%;而且突变体A354P可在600mmol/L葡萄糖的激活下最高达到190.29%的相对活力,相比野生型具有显著提高的葡萄糖耐受能力;突变体A354P对于虎杖苷也具有更强的水解能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN116334025A
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202310064132.X
申请日:2023-01-17
申请人: 天津科技大学 , 山东合成远景生物科技有限公司
IPC分类号: C12N9/12 , C12N1/21 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/31 , C12P19/00 , C12R1/19
摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种RNA聚合酶β亚单位突变体及其应用。所述RNA聚合酶β亚单位突变体,是在野生型RNA聚合酶β亚单位(RpoC,NCBI Reference Sequences:NP_418415.1)的基础上,缺失第215位至第220位的6个氨基酸获得的,具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将其应用于生产2'‑岩藻糖基乳糖和3‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌中,能够大幅提高菌株在发酵时的活细胞数,提高了菌株在发酵环境中的耐受性,并且2'‑岩藻糖基乳糖或3‑岩藻糖基乳糖产量也大幅度提高。
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