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公开(公告)号：CN110713967B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201911184142.7
申请日：2019-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种转化合成左旋多巴效率提高的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌为宿主，pET系列质粒为载体，在胞内异源表达酪氨酸酚裂解酶和PdxST酶，构建酪氨酸酚裂解酶和辅因子5‑磷酸吡哆醛的共表达重组菌株，并引入核糖开关在翻译水平上调控胞内辅因子5‑磷酸吡哆醛的代谢水平。以构建重组菌株为生物催化剂进行全细胞转化，可使左旋多巴产量达到106.1g/L，相比对照菌株提高了2.3倍，且生产强度可提高至21.2g/L/h，对底物邻苯二酚的转化率高达98.7％，具有重要的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN113234610A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110244286.8
申请日：2021-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成角鲨烯的酿酒酵母菌株及其应用，属于基因工程技术领域。本发明将tHMG1和IDI1在酿酒酵母多拷贝位点Ty2整合，显著促进了角鲨烯的合成积累，并异源表达NADH依赖的HMG1，平衡酵母细胞中氧化还原水平，进一步替换了对ERG1转录有显著抑制作用的启动子HXT1，阻碍角鲨烯向下游的转化，还异源表达ACL1，ACL2、过表达PEX11和FOX3，利用β氧化强化胞质内角鲨烯合成前体乙酰辅酶A的积累，进一步促进了角鲨烯的积累，可使酿酒酵母发酵96h的角鲨烯产量达1253.4mg/L。
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公开(公告)号：CN111979259A
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN202010788755.8
申请日：2020-08-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了用于基因高效率表达的氧化葡萄糖酸杆菌穿梭载体，属于基因工程领域。本发明筛选了氧化葡萄糖酸杆菌内源质粒可能的复制蛋白，并利用该类内源复制蛋白构建一系列的穿梭载体，将其转入氧化葡萄糖酸杆菌内进行验证，发现其转化效率和广宿主质粒pBBR-MCS相比有较大的提高；并将穿梭载体用于蛋白的表达，使氧化葡萄糖酸杆菌的L-山梨糖产量比广宿主载体的表达量提高7.8％，并使底物转化时间缩短了27.2％。本发明大大提高了对氧化葡萄糖酸杆菌遗传改造的效率，实现对氧化葡萄糖酸杆菌遗传改造的不同需求。
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公开(公告)号：CN109554325B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201910019537.5
申请日：2019-01-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种可高产酪氨酸的大肠杆菌工程菌及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过敲除大肠杆菌中编码芳香族氨基酸转运蛋白的基因aroP和/或编码酪氨酸特异性转运蛋白的基因tyrP的基础上，同时，在大肠杆菌中表达编码3‑脱氧‑D‑阿拉伯庚酮糖酸‑7‑磷酸(DAHP)合成酶(DS)的基因aroGfbr和/或编码分支酸变位酶和预苯酸脱氢酶(CM‑PD)的基因tyrAfbr，大大提高了大肠杆菌的酪氨酸产量；利用本发明的大肠杆菌工程菌诱导发酵46h，可使发酵液中酪氨酸的含量高达44.5g/L，较大肠杆菌HGXP提高了57％。
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公开(公告)号：CN111733152A
公开(公告)日：2020-10-02
申请号：CN202010350471.0
申请日：2020-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种表达酪氨酸酚裂解酶活性包涵体的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明以大肠杆菌BL21作为宿主，表达重组质粒pET-28(a)-TPL及9个分别与酪氨酸酚裂解酶羧基端融合的功能性短肽，得到了生产L-DOPA的重组大肠杆菌，利用获得的重组菌全细胞转化生产L-DOPA，其中菌株TPL-ELP10,TPL-EAK16,TPL-18A,TPL-GFIL16全细胞反应的L-DOPA产量分别为37.8±1.5g/L,53.8±2.1g/L,37.5±0.5g/L,29.1±1.9g/L,相比于对照菌株分别提高111％,201％,109％,62.6％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111471638A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010439183.2
申请日：2020-05-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 发明公开了一株产L-高丝氨酸的谷氨酸棒杆菌突变株的构建与应用，属于发酵工程技术领域。本发明以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032为出发菌株，敲除调控蛋白McbR、高丝氨酸激酶、转运蛋白MetD、磷酸烯醇丙酮酸羧激；下调表达异柠檬酸脱氢酶；过表达转运蛋白BrnFE、天冬氨酸半醛脱氢酶、高丝氨酸脱氢酶；并且提高天冬氨酸激酶、丙酮酸羧化酶以及来源于大肠杆菌的天冬氨酸激酶I的表达。所述突变株摇瓶培养48h，L-高丝氨酸的产量可达到8.8g/L。
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公开(公告)号：CN111424020A
公开(公告)日：2020-07-17
申请号：CN202010348949.6
申请日：2020-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了淫羊藿来源半乳糖基转移酶及其在制备金丝桃苷中的应用，属于基因工程及生物医药技术领域。本发明提供了半乳糖基转移酶及表达半乳糖基转移酶的重组酿酒酵母在催化合成黄酮类化合物方面的应用，可以使构建的重组酿酒酵母在不添加UDP糖基供体的情况下，催化UDP-半乳糖转移至槲皮素、山奈酚、杨梅素、二氢槲皮素、二氢山奈酚、二氢杨梅素、非瑟酮、桑色素以及淫羊藿素等多种黄酮底物。
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公开(公告)号：CN109517747A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811445149.5
申请日：2018-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位的黄酒酵母，属于遗传工程领域。本发明是以黄酒酵母XZ-11(MATa，Δura3，Δtrp1)作为出发菌株，通过敲除雷帕霉素结合亚基编码基因FPR1，阻断雷帕霉素与内源基因FPR1编码产物的结合。同时将TOR1基因1972位的丝氨酸残基突变为精氨酸，使菌株生长不受雷帕霉素抑制。由此构建的重组菌JNZ01(MATa,Δura3,Δtrp1，TOR1 S1972R，Δfpr1)在含有1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL雷帕霉素的培养基中生长良好，为运用雷帕霉素介导调控蛋白亚细胞定位提供了基础。
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公开(公告)号：CN109468286A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811383747.4
申请日：2018-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了新型多铜氧化酶及其在降解生物胺中的应用，属于分子生物学技术领域。本发明提供的多铜氧化酶的最适pH为3.5，最适温度为50℃，铜离子能够促进酶活，使酶活提高2倍；且该酶能够耐受18％的NaCl，显著优于现有的多铜氧化酶。本发明提供的多铜氧化酶重组酶具有较强的降解生物胺的性能，降解谱广，能够在24h内降解色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺，在生物胺模拟体系中对总胺的降解率达39％，其中，对组胺的降解效果最好；该酶在酱油中对总胺的降解率达到13％，对腐胺、苯乙胺具有较明显的降解作用。本发明提供的多铜氧化酶有助于提高发酵食品的安全性。
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公开(公告)号：CN109342415A
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201811435786.4
申请日：2018-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量检测圣草酚的方法，属于合成生物技术领域。本发明使用的显色剂为氢氧化钠或者氢氧化钾，经显色处理后，圣草酚呈现紫色，浓度越高，紫色越深，且显色越快，静置时间越长，颜色也会加深，一般5min内反应完毕，即便在干扰物质柚皮素存在时依然可以直接用目视法选择高产菌株。该反应液也可以使用酶标仪做进一步检测。在水溶液中，建议使用NaOH处理，最佳检测波长为550-580nm，在无色的合成培养基中建议使用KOH处理，最佳检测波长为560-570nm。该方法简便高效，抗干扰，精准度高，时间和人力成本低，适用于高通量筛选圣草酚高产菌株。
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