表达非洲猪瘟病毒p54、p30、E248R蛋白的重组腺病毒及构建方法

    公开(公告)号:CN111662916A

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN202010543058.6

    申请日:2020-06-15

    摘要: 本发明公开了一种表达非洲猪瘟病毒p54、p30和E248R蛋白的重组腺病毒及构建方法,该重组腺病毒感染细胞后可以同步表达非洲猪瘟p54、p30和E248R蛋白,其中p54和p30蛋白融合表达,E248R通过自裂解2A信号肽与p54和p30串联表达。本发明构建了能同时表达p54、p30和E248R蛋白的重组腺病毒载体,使用该载体与腺病毒骨架系统共转染细胞后获得可表达非洲猪瘟病毒p54、p30和E248R蛋白的重组腺病毒,使用该重组腺病毒免疫试验动物后可以刺激试验动物产生特异性的抗体,为非洲猪瘟疫苗的开发提供了新的试验数据。

    猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法

    公开(公告)号:CN111394319A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010241654.9

    申请日:2020-03-31

    摘要: 本发明公开了一种猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法。本发明提供了一种猪乙型脑炎疫苗抗原大规模培养工艺,使用猪肾细胞PK-15细胞培养猪乙型脑炎病毒,病毒接种一次可以连续收获多个批次的病毒,且病毒效价与BHK-21、VERO细胞相当或高于现有培养工艺,极大的提高了病毒产量,降低了生产成本,是一种适宜规模化生产的猪乙型脑炎疫苗抗原培养工艺。

    一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN116036253B

    公开(公告)日:2023-12-26

    申请号:CN202211481789.8

    申请日:2022-11-24

    摘要: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗及其制备方法,所述活疫苗通过将猪繁殖与呼吸综合征病毒2型毒株的N蛋白基因替换为Betaarterivirus属病毒的N蛋白基因得到;所述猪繁殖与呼吸综合征病毒株2型毒株为SC2012株,所述Betaarterivirus属病毒为Betaarterivirus chinrav 1,Betaarterivirus ninra,Betaarterivirus sheoin,Betaarterivirus suid 1,Betaarterivirus timiclar中的一种;制备方法包括以下工艺步骤:1)选取毒株PRRSV SC2012株F80代构建包含其基因组序列的感染性克隆载体;2)合成Betaarterivirus属病毒的N蛋白基因并替换掉PRRSV SC2012株的N蛋白基因,使用感染性克隆载体拯救出含有特殊标记的重组病毒。本发明使得构建后获得的载体具有特殊的标记位,能够解决现有技术中疫苗均不能与流行毒株感染进行有效区分的技术问题,对PRRSV的防控和净化具有重要的临床价值。

    一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN116036253A

    公开(公告)日:2023-05-02

    申请号:CN202211481789.8

    申请日:2022-11-24

    摘要: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征活疫苗及其制备方法,所述活疫苗通过将猪繁殖与呼吸综合征病毒2型毒株的N蛋白基因替换为Betaarterivirus属病毒的N蛋白基因得到;所述猪繁殖与呼吸综合征病毒株2型毒株为SC2012株,所述Betaarterivirus属病毒为Betaarterivirus chinrav 1,Betaarterivirus ninra,Betaarterivirus sheoin,Betaarterivirus suid 1,Betaarterivirus timiclar中的一种;制备方法包括以下工艺步骤:1)选取毒株PRRSV SC2012株F80代构建包含其基因组序列的感染性克隆载体;2)合成Betaarterivirus属病毒的N蛋白基因并替换掉PRRSV SC2012株的N蛋白基因,使用感染性克隆载体拯救出含有特殊标记的重组病毒。本发明使得构建后获得的载体具有特殊的标记位,能够解决现有技术中疫苗均不能与流行毒株感染进行有效区分的技术问题,对PRRSV的防控和净化具有重要的临床价值。

    一种提高猪流行性腹泻病毒毒价的培养方法

    公开(公告)号:CN110747176B

    公开(公告)日:2021-08-17

    申请号:CN201911132105.1

    申请日:2019-11-19

    IPC分类号: C12N7/00 C12N5/071 C12R1/93

    摘要: 本发明公开了一种提高猪流行性腹泻病毒毒价的培养方法,包括以下步骤:将Vero细胞分瓶传代,然后接入含新生牛血清的细胞生长液,培养后得致密单层;再在致密单层中接种猪流行性腹泻病毒,培养得混合物;在混合物中加入含新生牛血清、胰岛素和海藻糖的维持液,旋转培养,待病变率大于80%时收获病毒,得猪流行性腹泻病毒。本发明能够显著的提高病毒含量,避免病毒失活,有效解决了病毒毒价较低的问题。