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公开(公告)号:CN111705013B
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202010490045.7
申请日:2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0570基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.171,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020083,所述Mbov_0570基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。本发明通过qRT‑PCR检测T9.171株刺激BoMac细胞表达IL‑8的能力,显示该突变株诱导BoMac细胞表达细胞因子的能力下降,提示突变株毒力下降,可望作为疫苗株在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN111748507B
公开(公告)日:2021-12-03
申请号:CN202010490088.5
申请日:2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0475基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.55,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020082,所述Mbov_0475基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。该菌株具有诱导巨噬细胞增殖和提高巨噬细胞活力的作用,鉴于牛巨噬细胞是宿主抵抗病原感染的重要免疫细胞,该突变株可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN111676181B
公开(公告)日:2021-11-16
申请号:CN202010386437.9
申请日:2020-05-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域,涉及到一种牛支原体基因突变株,尤其是一种编码分泌性假想脂蛋白的牛支原体Mbov_0145基因突变株,该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020081,所述Mbov_0145基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。本发明的突变株对宿主细胞的黏附能力减弱,诱导细胞因子IL‑8的能力降低,有作为毒力致弱菌株在制备牛支原体疫苗中发挥价值的潜力。
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公开(公告)号:CN113308577A
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202110650339.6
申请日:2021-06-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的可视化快速核酸检测方法,该方法针对牛结节性皮肤病病毒的orf068基因设计RPA引物并进行扩增,然后向扩增产物中加入Cas12a蛋白并进行酶切反应,反应体系包括Cas12a蛋白、sgRNA和核酸探针,即可对核酸探针发出的信号进行检测。本发明检测orf068质粒的灵敏度是5copies/μL,检测LSDV和山羊痘病毒(GTPV)的灵敏度均为0.1TCID50/μL,检测临床样本的诊断敏感性为96.3%(95%CI:81.0%,99.9%),且特异性高,眼观颜色变化判断结果,具有简便、快速和适合现场检测等优点。
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公开(公告)号:CN111856005B
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202010571847.0
申请日:2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , A61K39/02 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP280在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用,属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP280具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,试验证明,牛支原体分泌蛋白MbovP280具有诱导宿主巨噬细胞活力下降和凋亡的能力,在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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公开(公告)号:CN112345768B
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN202011155394.X
申请日:2020-10-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于生物医药检测技术领域,尤其涉及一种基于重组蛋白rsPgp3(rsPGP3)的家畜衣原体抗体的间接ELISA检测方法及试剂盒。本发明通过基因克隆表达技术,获取家畜衣原体rsPgp3。以rsPgp3为包被抗原建立起间接ELISA方法,包括抗原rsPgp3的制备、间接ELISA建立、判定标准的建立及临床血清学检测的应用。可用于家畜衣原体Pgp3蛋白特异性抗体的检测,以此判断牛羊群中衣原体发病情况及自然感染水平。目前该方法是国内首次利用家畜衣原体Pgp3蛋白建立检测牛羊衣原体抗体的ELISA。二抗采用HRP标记的链球菌G蛋白(HRP‑SPG),其特异性和敏感性明显高于传统二抗。
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公开(公告)号:CN112481184A
公开(公告)日:2021-03-12
申请号:CN202011434431.0
申请日:2020-12-10
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株基因缺失重组卡介苗,该菌株缺失的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的BCG_0349基因,属于人兽共患病防治技术领域。本发明通过温敏型噬菌体转导介导的同源重组方式将包含BCG_0349基因上下游同源臂的同源交换底物转导进卡介苗基因组中进行BCG_0349基因敲除,成功构建该菌株并首次确认了缺失株能促进机体炎性细胞因子的表达和分泌,同时毒力致弱,具体体现在索状结构形成能力降低和小菌落表型,胞内存活能力降低更易于被机体所清除,本发明具有在人及动物结核病诊断、疫苗和药物开发等相关领域良好的应用潜能。
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公开(公告)号:CN110746504B
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN201911075944.4
申请日:2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体,它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的,所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应,不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应,具有很高的特异性,可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应,在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。
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公开(公告)号:CN109652357B
公开(公告)日:2020-12-01
申请号:CN201910128368.9
申请日:2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域,具体涉及细胞共培养下生长缺陷的牛支原体突变株及应用,从牛支原体基因突变体库中筛选得到一株牛支原体Mbov_0328基因缺失突变菌株T9.386,该基因编码环二核苷酸磷酸二酯酶。突变菌株与牛胚胎肺细胞共培养时,表现出显著生长缺陷表型;在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。所述的突变株与野生菌株间的蛋白组学呈现显著的差异表达谱。突变菌株间具有38个差异表达蛋白,其中30个蛋白呈上调表达,8个蛋白呈下调表达。该突变株可在牛支原体代谢生理、致病和免疫防制领域应用。
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公开(公告)号:CN111856005A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010571847.0
申请日:2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP280在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用,属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP280具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,试验证明,牛支原体分泌蛋白MbovP280具有诱导宿主巨噬细胞活力下降和凋亡的能力,在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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