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公开(公告)号：CN113185588A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110466319.3
申请日：2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域，尤其涉及一种牛支原体MbovP701蛋白及其制备方法与应用。本发明的MbovP701蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，编码该蛋白的核苷酸如SEQIDNO：2所示。本发明的MbovP701蛋白在Mg2+存在条件下具有降解外源双链DNA的核酸外切酶功能，且为非经典的分泌蛋白，可以分泌至胞体外发挥核酸外切酶的作用，为牛支原体生长提供必需的营养物质。因此该蛋白可作为分子靶标，应用于制备牛支原体防治药物。
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公开(公告)号：CN111635880A
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN202010372788.4
申请日：2020-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株，命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20191038，所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白，生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降，有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。
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公开(公告)号：CN111393513A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010225626.8
申请日：2020-03-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种牛支原体分泌性黏附蛋白MbovP58。该蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。根据大肠杆菌密码子偏爱性，将Mbov_0581基因进行突变，突变后的序列如SEQ ID NO:3所示。用免疫转印法证实该蛋白为分泌蛋白，能与感染牛血清反应。用免疫荧光试验和流式细胞术检测大肠杆菌表达的重组蛋白rMbovP581对牛肺上皮细胞(EBL)的黏附，发现MbovP581对EBL细胞具有良好的黏附能力。综合该蛋白的分泌特征、免疫原性和黏附性，该蛋白可望在制备牛支原体诊断试剂、药物和疫苗中应用。
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公开(公告)号：CN104726413B
公开(公告)日：2018-03-09
申请号：CN201510054798.2
申请日：2015-02-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一株牛支原体NADH氧化酶的单克隆抗体。该单克隆抗体是由交瘤细胞株8B7分泌的，所述的NADH氧化酶是一种牛支原体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，本发明修饰的NOX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。公开了NOX基因的克隆和表达及纯化步骤，重组蛋白质rNOX单克隆抗体的制备步骤以及免疫荧光检测法的建立和初步应用的步骤及效果。所述的杂交瘤细胞株8B7保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C2014221，该单克隆抗体能特异性地识别牛支原体。
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公开(公告)号：CN114774340B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202210415743.X
申请日：2022-04-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株牛支原体基因突变株，属于动物传染病防治技术领域，该菌株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.210，保藏在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2022260，发生突变的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Mbov_0703基因。该突变株黏附牛肺上皮细胞的能力和诱导牛肺巨噬细胞炎性反应的能力降低，而且生物膜形成能力降低，从而毒力致弱和抗逆性能下降，在牛支原体致病和免疫防制领域具有应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113512559B
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202110467490.6
申请日：2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域。本发明提供了牛支原体Mbov_0701突变基因及其突变株和应用。所述基因突变株在Mbov_0701基因的701核苷酸位点后出现插入突变，在与牛胚胎肺细胞共培养时，表现出显著生长缺陷表型，在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。Mbov_0701基因编码蛋白是一种核酸外切酶MbovP701，本申请的基因突变株可应用于牛支原体代谢生理、致病和防治药物制备等领域。
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公开(公告)号：CN111778177B
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202010490087.0
申请日：2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0274基因突变株，属于动物传染病防治技术领域，所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.202，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020084，所述Mbov_0274基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。本发明通过qRT‑PCR检测T9.202株刺激BoMac细胞表达IL‑8的能力，结果显示牛支原体菌株T9.202诱导BoMac细胞表达细胞因子的能力下降，可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN107176977A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201610144587.2
申请日：2016-03-11
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/30 , C12N1/21 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及牛支原体MbovP730蛋白在自然感染和疫苗免疫鉴别中的应用。根据大肠杆菌的密码子偏爱性，对M.bovis HB0801的Mbov_730基因进行克隆，将Mbov_730基因修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中的色氨酸密码子UGG，进而在大肠杆菌中表达重组的牛支原体MbovP730蛋白。本发明的MbovP730蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示,该蛋白可作为抗原蛋白在制备鉴别诊断牛支原体野毒株感染和疫苗株免疫鉴别试剂盒中的应用。
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公开(公告)号：CN104726413A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510054798.2
申请日：2015-02-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一株牛支原体NADH氧化酶的单克隆抗体。该单克隆抗体是由交瘤细胞株8B7分泌的，所述的NADH氧化酶是一种牛支原体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，本发明修饰的NOX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。公开了NOX基因的克隆和表达及纯化步骤，重组蛋白质rNOX单克隆抗体的制备步骤以及免疫荧光检测法的建立和初步应用的步骤及效果。所述的杂交瘤细胞株8B7保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C2014221，该单克隆抗体能特异性地识别牛支原体。
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公开(公告)号：CN114432433B
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202111645435.8
申请日：2021-12-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了牛支原体(Mycoplasma bovis)分泌蛋白MbovP725在制备防治牛支原体感染的药物中的用途，所述牛支原体分泌蛋白MbovP725的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述牛支原体分泌蛋白MbovP725能以剂量依赖性抑制脂多糖诱导的牛巨噬细胞和牛乳腺上皮细胞IL‑1β，IL‑6，TNF‑α的表达从而发挥抗炎作用，同时还能作为磷酸酶与底物进行酶促反应，从而抑制MAPK信号通路关键蛋白分子的磷酸化表达，在防治牛支原体感染方面具有很好的应用前景。
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