公开(公告)号：CN119082090A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411327049.8

申请日：2024-09-23

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  耿元晨 ,  陈颖钰 ,  杨浩 ,  姜传文 ,  陈建国 ,  陈曦 ,  胡长敏 ,  张磊 ,  项志杰

IPC: C12N9/48 ,  C12N15/57 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  A61K45/00 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了羧肽酶6(CPA6)基因在调控宿主抗牛肠道病毒(Bovine enterovirus，BEV)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了CPA6基因敲除的牛肾细胞系和抗BEV病毒感染的细胞模型，病毒学检测结果表明，BEV在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补CPA6基因则导致细胞的抗病毒作用消失，表明CPA6基因在调控宿主抗BEV感染中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了CPA6基因的功能，首次发现该基因可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点应用于BEV感染的抗病育种、预防与治疗，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。

公开(公告)号：CN118006811A

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202410141218.2

申请日：2024-01-31

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈曦 ,  郭爱珍 ,  赵梦莹 ,  姜传文 ,  于凡淞 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈建国 ,  张磊

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica，M.h)快速可视化检测试剂盒，该试剂盒中包括：(1)根据核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的基因片段设计的引物，用于扩增牛溶血性曼氏杆菌lptB基因目的片段；(2)根据牛溶血性曼氏杆菌lptB基因目的片段设计的sgRNA，用于引导Cas12a蛋白识别靶标分子；(3)用于切割单链DNA的Cas12a蛋白；(4)含有标记物和淬灭剂的ssDNA报告分子。本发明还公开了一种牛溶血性曼氏杆菌非诊断目的快速可视化检测方法，该方法灵敏度高、特异性强，为高效、简便、快速检测牛M.h提供了有力工具。

公开(公告)号：CN116947981B

公开(公告)日：2024-04-23

申请号：CN202310837378.6

申请日：2023-07-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  袁歆玮 ,  赵慧 ,  涂仪琳 ,  杜知航 ,  胡长敏 ,  陈颖钰 ,  陈建国 ,  陈曦 ,  张磊

IPC: C07K14/065 ,  C12N15/39 ,  C12N5/20 ,  C07K16/08 ,  C12N15/70 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种LSDV和GTPV的通用型诊断抗原及其单克隆抗体，该抗原编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还公开了一种利用该抗原和单克隆抗体建立的牛结节性皮肤病诊断试剂盒，属于免疫学领域。本发明的抗原是经蛋白免疫印迹试验结合质谱测序从LSDV基因组中筛选到的一种通用型诊断靶标，具有免疫原性，利用其制备的单克隆抗体可实现对山羊痘病毒属的LSDV和GTPV感染或免疫血清抗体检测，具有灵敏性和特异性高，检测快速便捷等优点。本发明为LSDV的血清学检测和疫苗免疫评价提供了高价值工具。

公开(公告)号：CN117866052A

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202311814707.1

申请日：2023-12-26

Applicant: 华中农业大学 ,  武汉市农业科学院

Inventor： 胡长敏 ,  陈洁 ,  龙安迎 ,  郭爱珍 ,  陈颖钰 ,  彭霞 ,  胡秀秀 ,  杨倩 ,  高进东

IPC: C07K14/00 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A61K38/16 ,  A61P31/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗菌肽具有分子质量小，稳定系数高，易于在大肠杆菌中表达、抑菌活性高等优点，对牛无绿藻的体外抑制MIC达3.875μg/mL；当用于体内时，该抗菌肽可降低乳腺组织菌载量，减少炎性因子释放并减轻炎性反应，保护动物乳腺组织免受病原侵害。本发明在牛无绿藻所致疾病的治疗和预防中具有极大应用前景。

公开(公告)号：CN115960184B

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202211187275.1

申请日：2022-09-28

Applicant: 华中农业大学 ,  天康生物制药有限公司

Inventor： 郭爱珍 ,  张宇豪 ,  杨文静 ,  杨莉 ,  陈建国 ,  胡长敏 ,  陈曦 ,  陈颖钰 ,  郝成武 ,  贺笋 ,  韩瑞

IPC: C07K14/285 ,  C07K16/12 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  A61K39/40 ,  A61P31/04 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)A6血清型白细胞毒素抗原蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了一种溶血性曼氏杆菌A6血清型白细胞毒素单克隆抗体，它是由保藏编号为CCTCC NO：C2022206的杂交瘤细胞株5D12产生的。该单克隆抗体能与牛溶血性曼氏杆菌A1和A6血清型LKT蛋白发生特异性反应，而且具有中和作用。因此不仅可用于制备LKT毒素蛋白的检测试剂盒，还可用于制备抗溶血性曼氏杆菌的药(56)对比文件F A Lainson.“Characterization ofepitopes involved in the neutralizationof Pasteurella haemolytica serotype A1leukotoxin”《.Microbiology (Reading)》.1996,第142卷(第Pt9期),第2499-2507页.Carolina Guzmán-Brambila 等.“LKTA andPlpE small fragments fusion proteinprotect against Mannheimia haemolyticachallenge”《.Research in VeterinaryScience》.2012,第93卷(第3期),第1293-1300页.陆奕彤 等.“溶血性曼氏杆菌重要抗原的免疫原性分析”《.江苏农业学报》.2022,第38卷(第2期),第446-452 页.李奕欣 等.“牛溶血性曼氏杆菌白细胞毒素、脂蛋白E和外膜蛋白A的免疫原性研究”《.中国预防兽医学报》.2021,第43卷(第7期),第753-758页.

公开(公告)号：CN114574611B

公开(公告)日：2023-09-15

申请号：CN202210086609.X

申请日：2022-01-25

Applicant: 武汉市农业科学院 ,  华中农业大学

Inventor： 陈洁 ,  胡长敏 ,  张海艳 ,  郭爱珍 ,  陈夏冰 ,  邵志勇 ,  万平民 ,  陈颖钰 ,  许顺鑫 ,  胡秀秀 ,  袁晓丹

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种根据牛无绿藻cob基因设计的PCR检测引物，其核苷酸序列如下：cob‑5‑F：CTAGTTATTCAAGTCCTCG；cob‑5‑R：AATTACTGTAGCACCCC，所述牛无绿藻cob基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，本发明还公开了所述的PCR检测引物在牛无绿藻非诊断目的检测中的应用。本发明通过对牛无绿藻cob基因的PCR引物进行筛选，得到一对灵敏度高且特异性强的引物，将该引物结合荧光定量PCR技术，能够直接对牛奶样品中的牛无绿藻进行定性以及定量测定，在早期快速诊断牛无绿藻性乳腺炎方面具有明显的优势。

公开(公告)号：CN114774340B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202210415743.X

申请日：2022-04-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  张慧 ,  张怡秋 ,  路豆昆 ,  赵刚 ,  陈颖钰 ,  陈曦 ,  陈建国 ,  胡长敏

IPC: C12N1/21 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一株牛支原体基因突变株，属于动物传染病防治技术领域，该菌株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.210，保藏在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2022260，发生突变的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Mbov_0703基因。该突变株黏附牛肺上皮细胞的能力和诱导牛肺巨噬细胞炎性反应的能力降低，而且生物膜形成能力降低，从而毒力致弱和抗逆性能下降，在牛支原体致病和免疫防制领域具有应用前景。

公开(公告)号：CN113512559B

公开(公告)日：2022-11-11

申请号：CN202110467490.6

申请日：2021-04-28

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  郝智瑜 ,  李茜茜 ,  朱习芳 ,  赵刚 ,  张慧 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈曦 ,  陈建国

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/22 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/04 ,  A61K35/74 ,  A61P31/04 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域。本发明提供了牛支原体Mbov_0701突变基因及其突变株和应用。所述基因突变株在Mbov_0701基因的701核苷酸位点后出现插入突变，在与牛胚胎肺细胞共培养时，表现出显著生长缺陷表型，在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。Mbov_0701基因编码蛋白是一种核酸外切酶MbovP701，本申请的基因突变株可应用于牛支原体代谢生理、致病和防治药物制备等领域。

公开(公告)号：CN115044686A

公开(公告)日：2022-09-13

申请号：CN202210508577.8

申请日：2022-05-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  徐恩红 ,  胡长敏 ,  陈颖钰 ,  陈曦 ,  祁明普 ,  易萍

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93 ,  C12R1/35 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种同时检测牛呼吸疾病综合征七种病原体的实时荧光定量PCR引物对和探针组合，该套引物探针能够特异性的扩增出牛支原体的oppD/F基因、牛多杀性巴氏杆菌的ompH基因、牛溶血曼氏杆菌的GCP基因、牛传染性鼻气管炎病毒的gB基因、牛合胞体病毒的N基因、牛副流感病毒3型a基因型的N基因、牛副流感病毒3型c基因型的N基因，可同时用于上述七种病原体的检测以提高检测效率。

公开(公告)号：CN114774588A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210550478.6

申请日：2022-05-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  马耀争 ,  胡长敏 ,  陈颖钰 ,  朱杰 ,  陈曦 ,  陈建国

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一套用于同时检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus，BVDV)、牛轮状病毒(Bovine Rotavirus，BRV)和牛冠状病毒(Bovine Coronavirus，BCV)的三重实时荧光定量PCR(Multiplex real‑time fluorescence quantitative PCR)引物和探针组合，所述引物和探针特异性针对BVDV病毒的5’UTR基因片段、BRV病毒的VP6基因片段、BCV病毒的N基因片段，核苷酸序列如SEQ ID No.1‑9所示。本发明只需要将样品进行一次PCR扩增即可实现对三种病毒的定性或定量检测，具有操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。