公开(公告)号：CN104789635A

公开(公告)日：2015-07-22

申请号：CN201510224891.3

申请日：2015-05-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 石贵阳 ,  王宝石 ,  张杰 ,  胡志杰 ,  蒋小东 ,  孙福新 ,  张梁 ,  李由然 ,  丁重阳 ,  李赢 ,  顾正华

IPC: C12Q1/02 ,  C12R1/685

Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度-时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。

公开(公告)号：CN104099253A

公开(公告)日：2014-10-15

申请号：CN201410329652.X

申请日：2014-07-11

Applicant: 江南大学 ,  宜兴协联生物化学有限公司

Inventor： 石贵阳 ,  王宝石 ,  张杰 ,  胡志杰 ,  蒋小东 ,  孙福新 ,  李赢 ,  张梁 ,  李由然 ,  丁重阳 ,  顾正华

IPC: C12N1/14 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

Abstract: 一种基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法，包括以下步骤：（1）将黑曲霉孢子液接种至种子培养基，培养制备成熟的种子液；（2）成熟的种子液经过分散器处理，得到分散菌丝种子液；（3）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量转接至发酵培养基发酵，当发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时发酵结束；（4）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量接种至种子培养基，培养制备得到下一级成熟的种子液，然后回到步骤（2），即实现黑曲霉种子连续培养。本发明提供的黑曲霉种子连续培养方法，能直接减少黑曲霉孢子繁琐的培养过程，同时可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率。