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公开(公告)号：CN104087624B
公开(公告)日：2017-08-08
申请号：CN201410329786.1
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。
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公开(公告)号：CN104789635B
公开(公告)日：2017-05-03
申请号：CN201510224891.3
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度‑时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
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公开(公告)号：CN104789635A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510224891.3
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度-时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
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公开(公告)号：CN104099253A
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201410329652.X
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 一种基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法，包括以下步骤：（1）将黑曲霉孢子液接种至种子培养基，培养制备成熟的种子液；（2）成熟的种子液经过分散器处理，得到分散菌丝种子液；（3）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量转接至发酵培养基发酵，当发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时发酵结束；（4）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量接种至种子培养基，培养制备得到下一级成熟的种子液，然后回到步骤（2），即实现黑曲霉种子连续培养。本发明提供的黑曲霉种子连续培养方法，能直接减少黑曲霉孢子繁琐的培养过程，同时可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率。
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公开(公告)号：CN104789616B
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201510224774.7
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种制备分子量窄分布糊精的方法，包括以下步骤：淀粉与水混合均匀，调节pH至5.8～6.0，加入高温α‑淀粉酶；置于99℃水浴槽中搅拌均匀，碘试为浅棕色即合格；灭酶；配置成浓度为1.5～10％(w/w)糊精溶液；在糊精溶液中添加乙醇至乙醇20％(v/v)，协同添加聚乙二醇与氯化钠，静置，离心，沉淀，洗涤，干燥获得组分1；上清液中，添加乙醇至终浓度为30％(v/v)，协同添加聚乙二醇与氯化钠，静置，离心，沉淀，洗涤，干燥获得组分2；重复上述过程，至乙醇浓度为90％(v/v)；组分1、2等即为所述各级分子量窄分布糊精。凡提及经有机溶剂逐级或协调聚乙二醇与盐沉淀分离淀粉或糊精方法，均适用本发明技术。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104099253B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410329652.X
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法，包括以下步骤：（1）将黑曲霉孢子液接种至种子培养基，培养制备成熟的种子液；（2）成熟的种子液经过分散器处理，得到分散菌丝种子液；（3）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量转接至发酵培养基发酵，当发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时发酵结束；（4）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量接种至种子培养基，培养制备得到下一级成熟的种子液，然后回到步骤（2），即实现黑曲霉种子连续培养。本发明提供的黑曲霉种子连续培养方法，能直接减少黑曲霉孢子繁琐的培养过程，同时可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率。
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公开(公告)号：CN104109697B
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201410321671.8
申请日：2014-07-08
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 柠檬酸废水回流发酵生产柠檬酸的方法：（1）淀粉质原料与柠檬酸废水混合均匀，加入高温α-淀粉酶；（2）将混合液经两次喷射，经碘试合格得到液化混液；再将液化混液经过板框压滤得到液化清液；（3）将液化清液与液化混液混合，加入柠檬酸废水进行补水得到种子培养基，进行菌种的种子培养；（4）将液化清液与液化混液混合，加入柠檬酸废水进行补水得到发酵营养液，进行发酵培养；（5）发酵结束后经固液分离除去菌体，经氢钙法或色谱法提取得到柠檬酸，产生的废水回到步骤（1）和步骤（3）、（4），如此循环。本方法发酵稳定且与原工艺技术水平相当，节约了工艺用水和蒸汽用量，节省了污水处理成本，具有重要的环境效益、经济效益。
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公开(公告)号：CN105586366A
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201610135591.2
申请日：2016-03-10
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开一种基于控制菌丝体结构改善柠檬酸发酵性能的方法，包括：将培养成熟的黑曲霉孢子配制成孢子悬液，接种至种子培养基进行种子培养；在种子培养过程中，提高搅拌转速扰动孢子萌发与菌丝缠绕过程，获得成熟种子液；将上述成熟种子液接种至发酵培养基进行发酵培养，结束发酵；所述提高搅拌速度扰动的工艺是在所述种子培养进行6~20h启动的。本发明可获得有利于柠檬酸合成的特定结构菌丝体形态，改善发酵性能，提高柠檬酸产量，同时可降低孢子使用量，降低生产成本，简单易行，具有重要的经济效益和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN105543112A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610122783.X
申请日：2016-03-04
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种黑曲霉种子培养方法，通过在培养过程中对产酸速率、耗葡萄糖速率或糖化酶活力中的监控来选择移种的时机；并具体公开了产酸速率、耗葡萄糖速率或糖化酶活力中的测定方法和披露了溶氧浓度对培养过程的影响，解决了现有培养方法中主要依靠观察黑曲霉菌球大小、形态来判断种子的生长状态的不足。本发明的方法培养的种子发酵结果标准差更小，批次间更稳定，发酵转化率提高，发酵周期明显缩短。
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公开(公告)号：CN104087624A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201410329786.1
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。
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