等温核酸扩增反应试剂及等温核酸扩增方法

    公开(公告)号:CN102816756B

    公开(公告)日:2014-04-16

    申请号:CN201210328735.8

    申请日:2012-09-07

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种等温核酸扩增反应试剂,包含以下成分:Tris缓冲液、醋酸钾、醋酸镁、二硫苏糖醇、聚乙二醇、ATP、dNTPs、磷酸肌酸、肌酸激酶、引物组、SSB蛋白、大肠杆菌解旋酶RecQ蛋白、UvsY蛋白、UvsX蛋白和DNA聚合酶。本发明还公开了一种等温核酸扩增的方法,包括如下步骤:①提取DNA,或提取RNA后反转录得到cDNA;②加入上述核酸扩增反应试剂,25-45℃下反应10—60分钟,即可完成核酸的扩增。相比传统PCR技术,本技术几乎不需要专业仪器,操作更为简单,对操作人员的技术要求更低,而且反应时间仅需半小时左右。

    一种荧光等温核酸扩增方法

    公开(公告)号:CN105803045A

    公开(公告)日:2016-07-27

    申请号:CN201410717877.2

    申请日:2014-11-27

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种荧光等温核酸扩增方法,该扩增方法包含以下成分:Tris缓冲液、醋酸钾、醋酸镁、二硫苏糖醇、聚乙二醇、ATP、dNTPs、磷酸肌酸、单链结合蛋白、重组酶、UvsY蛋白、DNA聚合酶、核酸外切酶、荧光探针和引物组。应用该方法,可对DNA进行实时荧光监测。在此基础上,加入RNA逆转录酶,可实现对RNA的扩增。本发明公开的等温核酸扩增方法步骤如下:(1)提取DNA或RNA;(2)将DNA或RNA加入到上述核酸扩增体系;(3)混合均匀后放入到可荧光检测仪器中,35-45℃下反应,5-30分钟内即可观察到荧光信号。本方法操作简单,反应快速,对操作人员要求低,具有更广泛的应用范围。