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公开(公告)号：CN118127234A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410335283.9
申请日：2024-03-22
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种基于RAA‑CRISPR/Cas12a检测杂交鳢弹状病毒的引物对、体系、试剂盒和应用。所述引物对包括引物对1、引物对2、引物对3和引物对4中的任一对。本发明利用HSHRV糖蛋白序列，使用PRIMER 5.0软件，设计4对特异性上下游引物，成功对核酸进行扩增。随后根据设计选择，手动设计特异性crRNA探针，使用阳性样品为模板，分别对引物及探针进行筛选，成功构建特异性、灵敏性、准确性均表现良好的检测方法。可检测出10copies/μL的阳性样品，且只在阳性模板有荧光信号，其他常见水生动物常见病毒均无扩增。在临床样品检测实验中，表现出较好的准确性。
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公开(公告)号：CN116731203B
公开(公告)日：2023-12-19
申请号：CN202310520431.X
申请日：2023-05-09
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C07K19/00 , A23K10/18 , A23K20/147 , A23K20/153 , A23K50/80 , C12N15/62 , C12N15/74 , C12N1/21 , A61K39/15 , A61K39/385 , A61P31/14 , C12R1/01
摘要： 本发明属于基因工程及分子免疫学技术领域，具体涉及一种融合表达GCRV VP4和LTB的重组乳酸菌及其制备方法与应用。本发明提供了一种融合蛋白，包含GCRV VP4蛋白和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白；通过大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白可以进一步提升VP4蛋白被肠黏膜免疫组织抗原呈递细胞直接识别并呈递抗原，激活先天性免疫Toll样受体信号转导，提高免疫相关基因(IFNα、TLR3、TLR5、MyD88、NF‑κ
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公开(公告)号：CN116836912A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310765642.X
申请日：2023-06-26
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种大口黑鲈吻端细胞系及其构建方法和应用；所述细胞系的保藏编号为CCTCC NO：C2023121；该细胞系的染色体为56条，为永久细胞系，可以无限增殖，并可对其进行冷冻保存；而且YL03‑S细胞对大口黑鲈易感的LMBV、ISKNV、MSRV均非常敏感，用此细胞系扩增这三种病毒的增殖量显著高于大口黑鲈心肌细胞系、鳜鱼脑细胞系CPB，可以用于大口黑鲈易感病毒疫苗的研发中；还可用于表达外源基因进行基因功能的研究；该细胞系的建立在丰富大口黑鲈细胞库的同时可为水产动物病毒性疾病的病原分离、培养、检测提供保障，还可为开展大口黑鲈易感病毒的感染途径、感染机理以及研制病毒疫苗等提供了便利。
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公开(公告)号：CN113604438B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110751722.0
申请日：2021-07-02
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种抗罗非鱼湖病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用，该杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞TiLV S10E3，于2020年11月5日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2020209。该杂交瘤细胞株由SP2/0骨髓瘤细胞与免疫了罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的小鼠脾细胞融合得到，能够无限增殖并持续产生抗罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的单克隆抗体，产生的单克隆抗体效价高，对罗非鱼湖病毒具有较好的特异性，可用于各类体外检测、野毒株病毒筛选分离以及抗病毒药物筛选等多个方面，具有极高的应用及科研价值。
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公开(公告)号：CN109517806B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN201811530181.3
申请日：2018-12-14
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N7/00 , C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种罗非鱼湖病毒强毒株及其RPA检测引物和方法，本发明设计了针对RPA反应的引物组；本发明首次分离出罗湖病毒，而且检测方法快速简便、特异性强，灵敏度高，适用于养殖场的现场检测等，具有极高的应用价值。
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公开(公告)号：CN113214407A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110243753.5
申请日：2021-03-05
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
摘要： 本发明公开了一种II型草鱼呼肠孤病毒VP4‑NS38融合蛋白基因、表达载体、菌株及其应用。本发明通过融合PCR的方式将能够引起草鱼产生不同方式免疫应答反应的VP4和NS38蛋白以柔性linker连接，构建能够在枯草芽孢杆菌芽孢体中融合表达GCRVVP4‑NS38蛋白的重组芽孢杆菌。以该重组芽孢杆菌口服免疫草鱼能够刺激鱼体产生具有中和活性的黏膜抗体和血清抗体，而且能够引起草鱼产生体液免疫反应，也能够引起草鱼产生细胞免疫反应；同时还能够减少草鱼在病毒感染过程中的炎症反应。具有很好的安全性，对草鱼的生长不产生显著影响，也不会对草鱼的组织器官造成病理损害，可以应用在草鱼出血病口服疫苗的研究中。
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公开(公告)号：CN112048571B
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202010915296.5
申请日：2020-09-03
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT‑PCR检测引物组、试剂盒及其应用。本发明设计得到草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT‑PCR引物组，并基于该引物组，通过特定法扩增体系和条件检测草鱼呼肠孤病毒II型。其PCR反应第一次扩增可以检测到103稀释的cDNA浓度，第二次扩增可以检测到104次稀释的cDNA浓度，特异性强，比现有国标中GCRVⅡ型病毒的检测敏感性更高。
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公开(公告)号：CN112940982A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110314681.9
申请日：2021-03-24
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N1/20 , A61K35/742 , A61P31/04 , A61P37/04 , C02F3/34 , A23K10/18 , A23K50/80 , C12R1/07 , C02F103/20
摘要： 本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及其在水产养殖中的应用。贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)WLYS23菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60890。本发明的贝莱斯芽孢杆菌分离自健康杂交鳢，是一种内源性菌株，该菌株对舒氏气单胞菌、简氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌、水生气单胞菌、类志贺邻单胞菌和鰤鱼诺卡氏菌7种水产动物致病菌均具有较强的拮抗效果。
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公开(公告)号：CN110527661B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN201910842355.8
申请日：2019-09-06
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12N5/071 , C12Q1/6888
摘要： 本发明公开了一种剑尾鱼仔鱼细胞系，其通过原代培养和传代培养构建得到，本发明还提供了剑尾鱼仔鱼细胞系在水产动物病毒分离和在环境污染物监测中的应用。本发明对剑尾鱼仔鱼进行细胞培养，初步确定了细胞的培养条件，进行了染色体分析，检测了细胞对多种水生动物病毒的敏感性，并对抗生素类环境污染物利福平对细胞的诱导效应进行了研究，该细胞系的建立为后期水生动物病毒的研究及细胞系作为体外毒理学细胞模型应用于环境污染物的毒理学相关研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106811550B
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN201710143487.2
申请日：2017-03-11
申请人： 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明的所述基于高分辨率溶解曲线(HRM)的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型疫苗株和野毒株鉴别诊断检测引物，由以下1对引物组成：HRM‑Ⅱ‑F：5'CACCGGAGTTAAACTTCATCGC‑3'(SEQ ID NO：1)；HRM‑Ⅱ‑R：5'CCTGTGGCAGACCGGCAGATAA 3'(SEQ ID NO：2)；根据草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型疫苗株和已知的Ⅱ型野毒株S2基因5’端和3’端保守区域设计而获得，疫苗株和野毒株扩增产物之间存在一个或多个固定的碱基突变位点，这些突变位点为疫苗株所特有，满足HRM对于的GCRVⅡ型疫苗株和野毒株的鉴定分析，同时本发明还根据所述基于高分辨率溶解曲线(HRM)的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型疫苗株和野毒株鉴别诊断检测引物设计出相应的检测试剂和以及检测方法，提高该技术的实用性能。
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