一种基于PCR的甜瓜杂交种种子遗传纯度快速鉴定方法

    公开(公告)号:CN102732621A

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN201210192805.1

    申请日:2012-06-12

    Abstract: 本发明公开一种基于PCR的甜瓜杂交种种子遗传纯度快速鉴定方法。该鉴定方法为:分别利用所筛选的SRAP引物组合NAUSRem6/NAUSRfc8和/或RAPD引物NAURP401,以‘海蜜2号’甜瓜亲本与F1单株基因组DNA为模板进行PCR扩增,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物;只有同时具有亲本特异条带的单株才为真正的杂交种,缺少任一亲本条带均为假杂交种。本发明的检测方法克服了常规田间纯度检测操作复杂、准确度低等缺点,不仅快速、简便,成本低,稳定可靠,且不受生长阶段与环境影响,可以成为甜瓜种子遗传纯度鉴定的重要检测方法之一。

    一种芦笋超雄株的快速鉴定与繁殖方法

    公开(公告)号:CN117461560B

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202211679868.X

    申请日:2022-12-26

    Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定与繁殖芦笋超雄株的方法,属于蔬菜作物遗传育种技术领域。该方法基于芦笋基因组序列,开发出可以快速鉴定芦笋超雄株的分子标记,设计相应的引物(命名为Asp‑YY01F,Asp‑YY01R)进行PCR扩增,即可准确鉴定出超雄株;进而以嫩茎为外植体,通过愈伤组织诱导(MS+1.0mg/L 6‑BA+0.75 mg/L NAA+30g/L蔗糖)、不定芽(MS+2.0 mg/L 6‑BA+0.05 mg/L NAA+30g/L蔗糖)和不定根分化(1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.02 mg/L KT+0.5 g/L AC+30g/L蔗糖),建立了相应的离体高频再生体系,可实现芦笋超雄株快速繁殖。本发明提供的分子标记能精准辨别超雄株和普通雄株,可用于植株苗期性别鉴定、全雄育种F1代种子纯度检测;超雄株离体再生繁殖系数高,性状稳定,可为芦笋全雄育种工作提供重要种质材料,加快芦笋全雄育种进程。

    一种根癌农杆菌介导的萝卜遗传转化方法及其应用

    公开(公告)号:CN117384946A

    公开(公告)日:2024-01-12

    申请号:CN202211408927.X

    申请日:2022-11-10

    Abstract: 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的萝卜遗传转化方法及其应用,选取4~5d苗龄的萝卜‘NAU‑LHZ’带柄子叶为外植体,预培养3d后,用1/2MS液体培养基重悬农杆菌作为侵染液,将外植体于28℃ 200rpm摇床中振荡培养20min,放滤纸上晾干,在黑暗下共培养3d后转到脱羧培养基上分化培养,直至生根培养获得萝卜再生植株。提取萝卜叶片DNA,使用通用引物鉴定是否导入目的基因。同时采用RT‑qPCR验证目的基因是否过表达。此外,将电泳鉴定的萝卜转基因阳性苗自交,获得T2代株系后提取DNA,采用通用引物扩增鉴定萝卜转基因阳性苗,T2代株系转化效率达46.15%。与前人已报道的浸花法相比,本发明提高了转化和筛选效率,为萝卜高效转化和基因功能验证提供了新方法,也为萝卜等再生顽拗型作物的转基因研究提供了技术支撑。

    萝卜RsCDF3转录因子基因在提高植物耐冷性中的应用

    公开(公告)号:CN117143213A

    公开(公告)日:2023-12-01

    申请号:CN202311125833.6

    申请日:2023-09-01

    Abstract: 本发明公开了一种萝卜DOF转录因子RsCDF3及其调控萝卜低温耐受能力的应用,包括:(1)以萝卜cDNA为模板对RsCDF3进行克隆,其cDNA序列如SEQ ID NO.1所示;(2)表达特性分析表明,RsCDF3基因受低温胁迫处理显著上调表达;(3)利用遗传转化技术对RsCDF3基因功能进行鉴定,发现过表达RsCDF3拟南芥植株低温耐受能力显著提高,冷胁迫下其存活率明显高于野生型株系;(4)利用农杆菌注射法瞬时转化两周苗龄的萝卜子叶,分析冷胁迫处理下过表达与RNAi抑制表达萝卜子叶中H2O2、O2·‑、MDA和脯氨酸含量变化,表明RsCDF3基因可提高萝卜植株的耐冷性。本发明为今后利用基因工程技术培育耐低温萝卜种质提供了理论依据,具有很高的应用价值。

    一种设施芦笋秸秆快速转化利用的方法

    公开(公告)号:CN115735671A

    公开(公告)日:2023-03-07

    申请号:CN202211409011.6

    申请日:2022-11-10

    Abstract: 本发明属于现代农业蔬菜生产领域,公开了一种设施芦笋秸秆快速转化利用的方法,具体涉及一种利用芦笋秸秆作为栽培主料在设施芦笋园内间套作大球盖菇的方法。该方法主要包括以下步骤:芦笋母茎转换与清园、栽培料预处理、整地作畦、大球盖菇菌种播种、菌丝生长期管理、出菇期管理、病虫害防治、大球盖菇与芦笋采收、菌渣还田栽培芦笋。本发明充分利用芦笋秸秆、设施芦笋园冬闲土地与空间,及设施设备资源进行间套作大球盖菇,能够提高大球盖菇中黄酮类化合物、维生素C等抗氧化活性物质的含量、降低设施芦笋栽培过程中化肥施用量,解决资源浪费和秸秆焚烧带来的环境污染问题,有效提高农产品附加值,推动芦笋产业与绿色生态循环农业可持续发展。

    萝卜膜联蛋白RsANN1a及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN113444161A

    公开(公告)日:2021-09-28

    申请号:CN202110730694.4

    申请日:2021-06-29

    Abstract: 本发明公开了一种萝卜膜联蛋白RsANN1a及其编码基因和应用,包括:(1)萝卜膜联蛋白RsANN1a核苷酸与氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;(2)以萝卜cDNA为模板对RsANN1a进行克隆;(3)RsANN1a基因在高温胁迫下表达特性分析,结果显示RsANN1a基因能够响应高温胁迫,并且在高温处理下其表达量显著上升;(4)本发明还对RsANN1a基因的功能进行鉴定,在野生型拟南芥中过表达RsANN1a能够显著提高其耐热能力。本发明为今后利用基因工程技术培育耐高温萝卜提供了理论依据,具有很高的应用价值。

    一种利用褪黑素降低蔬菜Pb累积量的方法

    公开(公告)号:CN107581000A

    公开(公告)日:2018-01-16

    申请号:CN201710804556.X

    申请日:2017-09-08

    Abstract: 本发明公开了一种利用褪黑素降低蔬菜Pb累积量的方法。一种降低蔬菜Pb累积量的方法,包括用褪黑素溶液喷施蔬菜作物叶片。本发明通过对萝卜叶片喷施褪黑素溶液,可有效提高Pb胁迫下植株体内SOD、POD的活性,促进可溶性蛋白含量的增加,进而显著降低萝卜肉质根及叶片中Pb累积量。本发明制备工艺简单方便,无污染与药害,能有效解决萝卜肉质根中Pb过量累积的难题,促进萝卜的绿色安全生产,具有广阔的应用前景。

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