利用地高辛标记EDC交联桥连法检测miRNAs方法

    公开(公告)号:CN103293318A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310190051.0

    申请日:2013-05-22

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开一种利用地高辛标记EDC交联桥连法检测miRNAs的方法,应用地高辛标记系统,灵敏度比传统地高辛标记Northern blots检测系统至少高50倍,与放射性同位素标记Northern blots检测系统相当;对环境不会造成污染,非常安全,同时无需杂交步骤,能在9-10h之内完成,方便快速,检测成本较低。解决了当前检测方法安全性不高、程序复杂、价格昂贵、灵敏度低等问题。

    一种牛结核杆菌抗体免疫胶体金检测试纸条及其制备方法

    公开(公告)号:CN101846677B

    公开(公告)日:2013-06-26

    申请号:CN200910218156.6

    申请日:2009-12-30

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开一种结核杆菌抗体免疫检测胶体金试纸条及其制备方法。用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫。CFP10和MPT64蛋白是致病性结核杆菌高特异性、免疫原性蛋白。从结核杆菌基因组中克隆出CFP10和MPT64基因,把它连接到pET-28a上,构建成两个原核表达重组质粒,把这两个质粒转化到大肠杆菌中,表达出CFP10和MPT64蛋白,蛋白纯化后,以混合蛋白为抗原包被硝酸纤维膜作为检测线,同金胶垫一起装备成本发明的免疫胶体金试纸条。本发明试纸条能区分人与动物是接种BCG还是野毒感染。可用于检测动物血清中的结核杆菌抗体,具有特异性强,灵敏度高、稳定性好、方便、快捷的特点,对结核杆菌的监测、诊断、净化和控制具有重要意义和实际应用价值。

    旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法

    公开(公告)号:CN103114095A

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201310080980.6

    申请日:2013-03-14

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法,提供了旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B基因,并提供了该基因抗体的制备方法,分别制备旋毛虫和H7402肝癌细胞的抗血清,利用间接ELISA方法确定H7402肝癌细胞抗原与旋毛虫阳性血清、旋毛虫抗原与H7402肝癌细胞阳性血清间存在相关抗原;利用多克隆抗体从旋毛虫cDNA文库中免疫筛选获得与H7402肝癌相关的抗原蛋白基因。克隆并原核表达相关蛋白,纯化复性其原核表达蛋白作为免疫原免疫小鼠,获得相关抗原基因蛋白的抗体。旋毛虫AN1重组蛋白抗原的抗体能对H7402肝癌产生强的抑制作用,且获得的旋毛虫AN1重组蛋白抗原的抗体易于制备和工业化生产。

    微小隐孢子虫双价蛋白疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101658667B

    公开(公告)日:2012-04-25

    申请号:CN200910066479.8

    申请日:2009-01-16

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/489

    Abstract: 本发明提供一种微小隐孢子虫双价蛋白疫苗,其特征在于:以原核表达载体pET28a为载体,将两个微小隐孢子虫保护性抗原基因串联插入到pET28a原核表达载体的多克隆位点区,获得了微小隐孢子虫双价蛋白疫苗。本发明疫苗选用了两个优势保护性抗原,两者优势组合,能够引起机体更强的细胞免疫和体液免疫作用,从而可以达到更好的预防动物微小隐孢子虫病的目的。

    弓形虫重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102198267A

    公开(公告)日:2011-09-28

    申请号:CN201110068082.X

    申请日:2011-03-22

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供一种弓形虫重组卡介苗及制备方法,首先将获得刚地弓形虫保护性抗原基因,进行TA克隆,测序鉴定正确后酶切回收目的片段,再分别与同样进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361相连,重组质粒转化到BCG,经抗性和PCR筛选得到阳性刚地弓形虫重组卡介苗。本发明疫苗热稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验,免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

    用于隐孢子虫种属与蓝氏贾第虫检测的多重悬浮芯片及其制备方法

    公开(公告)号:CN101440396A

    公开(公告)日:2009-05-27

    申请号:CN200810051728.1

    申请日:2008-12-31

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明提供了一种用于隐孢子虫种属与蓝氏贾第虫检测的多重悬浮芯片,包括诊断引物和与微球耦联的特异性寡聚核苷酸探针,其中,寡聚核苷酸探针序列为隐孢子虫种或属特异或贾第虫种特异性的基因中的序列。结合了多重PCR技术与液相杂交技术,能有效的消除假阳性,在保证精准特异性的同时,其敏感性比普通的PCR技术提高10-1000倍。可以同时对隐孢子虫属、微小隐孢子虫及蓝氏贾第虫等水源性的两种原虫进行鉴定和检测,具有高特异性、高灵敏度、快速、低成本易于推广等特点。

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