公开(公告)号：CN105154584A

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN201510412700.6

申请日：2015-07-14

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 张建峰 ,  刘志成 ,  嘎利兵嘎 ,  陈琴苓 ,  徐志宏 ,  张春红 ,  康桦华 ,  郭鹏举

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

CPC分类号： C12Q1/701 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/70 ,  C12Q2527/107 ,  C12Q2563/107

摘要： 本发明公开了一种快速区分PRRSV经典和变异毒株HRM非标记探针方法及其引物和探针，操作简单：只需PCR反应之前加UN-Probe和荧光饱和染料即可；检测速度快且高通量：全部操作过程只需3小时，极大缩短了分型所需时间；费用低，不需要特异性荧光标记探针，每个样品的饱和染料成本为1.6RMB；准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。

公开(公告)号：CN103757041B

公开(公告)日：2015-08-12

申请号：CN201310750013.6

申请日：2013-12-31

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 郭鹏举 ,  沈海燕 ,  张春红 ,  张建峰 ,  周恒 ,  朱余军 ,  刘志成 ,  孙俊颖

IPC分类号： C12N15/70 ,  C07K14/57 ,  A61K38/21 ,  A61P31/14

摘要： 本发明公开了一种制备猪源干扰素-λ3（IFN-λ3）蛋白的方法和应用，属于基因工程产品制备领域。包括编码猪源干扰素-λ3基因的克隆，含不包括信号肽序列的猪源干扰素-λ3基因的原核表达载体的构建，用所述含猪源干扰素-λ3基因的重组原核表达载体转化大肠杆菌和诱导表达，最佳诱导温度、时间和IPTG浓度分别为诱导温度20℃，时间16h，IPTG浓度0.4mM。通过本方法制备的产品为研究猪源干扰素-λ3生物活性及其作用机理提供了基础，也可在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中应用。

公开(公告)号：CN104195265A

公开(公告)日：2014-12-10

申请号：CN201410419410.X

申请日：2014-08-22

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 张建峰 ,  嘎利兵嘎 ,  张春红 ,  刘志成 ,  郭鹏举 ,  沈海燕 ,  朱余军

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

CPC分类号： C12Q1/701 ,  C12Q2600/156

摘要： 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒野毒株与疫苗株的PCR-HRM引物和方法。该方法为先从样品中提取病毒DNA作为模板，利用所设计的2对特异性引物和荧光饱和染料进行PCR扩增，并分别以野毒株和疫苗株标准品作为对照对检测样品进行HRM分析，确定犬细小病毒的类型。本发明操作简单，只需PCR反应前加荧光饱和染料即可；检测速度快且高通量，全部操作过程只需3小时，不需要病毒的细胞培养，极大缩短了区分检测所需时间；费用低，不需要特异性探针，荧光饱和染料廉价易得；准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。

公开(公告)号：CN103074447B

公开(公告)日：2014-09-03

申请号：CN201310012045.6

申请日：2013-01-11

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 郭鹏举 ,  张建峰 ,  张春红 ,  嘎利兵嘎

IPC分类号： C12Q1/70

摘要： 本发明公开了一种快速鉴别诊断不同血清型禽白血病病毒PCR-HRM分析方法的建立。本发明的通用引物，简并性好，对禽白血病病毒A、B、C、D和E亚型均有很好地的扩增性，有助于提高PCR的效率，减少病毒鉴别分型的时间；本发明的特异性引物，特异性好，可以特异性扩增出J亚型。对使用本发明引物得到的扩增产物进行HRM分析，与已知亚型的标准HRM曲线进行比对，就可以准确、快速、高通量地进行禽白血病病毒分型，特别是可以快速、准确地区分内源型和外源型禽白血病病毒。

公开(公告)号：CN104004857A

公开(公告)日：2014-08-27

申请号：CN201410229142.5

申请日：2014-05-27

申请人： 广州博至生物科技有限公司 ,  广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 郭鹏举 ,  嘎利兵嘎 ,  张建峰 ,  刘志成 ,  朱余军 ,  陈琴苓

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2527/107 ,  C12Q2563/107

摘要： 本发明公开了一种快速区分不同基因型犬细小病毒的PCR-HRM引物和方法，该方法为先从样品中提取病毒DNA；以病毒DNA为模板，利用所设计的特异性引物对和荧光饱和染料进行扩增反应获得扩增产物；最后对扩增产物进行HRM分析，确定犬细小病毒的基因型。本发明操作简单，只需PCR反应之前加荧光饱和染料即可；检测速度快且高通量：全部操作过程只需3小时，不需要病毒的细胞培养，极大缩短了分型所需时间；费用低，不需要特异性探针，每个样品的饱和染料成本为1.6RMB；准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。

公开(公告)号：CN103320535A

公开(公告)日：2013-09-25

申请号：CN201310265390.0

申请日：2013-06-27

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 郭鹏举 ,  张建峰 ,  张春红 ,  饶丹 ,  嘎利兵嘎 ,  沈海燕 ,  周恒 ,  朱余军 ,  郭翠丽

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的方法。本发明在两者共同的保守区域设计了用于鉴别猪瘟野毒株与疫苗弱毒株的专用引物，其特异性好，能够很好的扩增出野毒株与疫苗弱毒株，结合RT-PCR与HRM技术，能够明显的区分野毒株与疫苗毒株。本发明方法是一种简便、快捷、实用的鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的新型技术。

公开(公告)号：CN118480512B

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410928778.2

申请日：2024-07-11

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所 ,  兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

发明人： 沈海燕 ,  张志杰 ,  张春红 ,  刘志成 ,  杜寿文 ,  聂晶晶 ,  瞿云芝 ,  卢宇 ,  廖明 ,  张建峰

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/867 ,  C12N7/00 ,  C12R1/91

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法，采用慢病毒感染ST细胞株，经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株；所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株；所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现，与ST细胞株（ST‑WT）相比，敲除A3Z2基因的ST细胞株（ST‑A3Z2‑KO），处于G1期的细胞数量明显增多；当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后，该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少；由此可见，PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此，该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖，对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时，本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。

公开(公告)号：CN115786175B

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202211210167.1

申请日：2022-09-30

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 张建峰 ,  张斌 ,  勾红潮 ,  张春红 ,  刘志成 ,  沈海燕 ,  乌日尼乐

IPC分类号： C12N1/20 ,  A61K35/747 ,  A61P1/00 ,  A61P31/14 ,  A23K50/30 ,  A23K10/18 ,  A23K10/20 ,  C12R1/225

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一株粘膜乳杆菌(Limosilactobacillus mucosae)，其特征在于，保藏编号为：GDMCC NO：62541；保藏日期：2022年06月13日，保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。该菌株可以提高猪对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的抵抗效果，该菌株在I型干扰素IFN‑α，IFN‑β等因子的调节方面以及在III型干扰素IFN‑λ1，IFN‑λ3基因的调节方面具有较好的功能，特定浓度的菌株针对抗病毒蛋白基因MX1、MX2、OAS1和ZAP的调节具有差异化和特异性。同时，本发明还提供了该菌的用途。(56)对比文件S Roos, F Karner et al.Lactobacillusmucosae sp. nov., a new species with invitro mucus-binding activity isolatedfrom pig intestine《.Int J Syst EvolMicrobiol》.2000,第251-258页.Repally Ayyanna et al.Anti-inflammatory and Antioxidant Propertiesof Probiotic Bacterium Lactobacillusmucosae AN1 and Lactobacillus fermentumSNR1 in Wistar Albino Rats《.FrontMicrobiol》.2018,第1-13页.姜绍通 等.粘膜乳杆菌发酵乳清生产L-乳酸的研究《.食品科学》.2007,第162-165页.

公开(公告)号：CN113355460B

公开(公告)日：2022-11-15

申请号：CN202110682628.4

申请日：2021-06-18

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 董嘉文 ,  黄允真 ,  张俊勤 ,  孙敏华 ,  李林林 ,  张建峰 ,  廖明

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了用于检测新型鹅呼肠孤病毒的引物、试剂盒及其检测方法与应用，所述新型鹅呼肠孤病毒检测引物对和探针均靶向新型鹅呼肠孤病毒的λC基因。新型鹅呼肠孤病毒检测引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示，探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明中的新型鹅呼肠孤病毒(NGRV)检测引物对和探针特异性强，灵敏度高，最低可检测限为56.6个拷贝，且检测方法操作简单，重复性好，可以快速、准确、高通量地进行定量分析，有利于在临床实践中推广应用。

公开(公告)号：CN107937615B

公开(公告)日：2021-06-25

申请号：CN201711402234.9

申请日：2017-12-20

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 刘志成 ,  张春红 ,  沈海燕 ,  孙俊颖 ,  张建峰

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了用于区分猪乙型脑炎病毒野毒株和疫苗株的方法以及相应的引物和探针。本发明首次建立了一种可快速区分五种不同基因型JEV野毒株(I、II、III、IV、V)与疫苗株SA14‑14‑2的荧光PCR检测方法，该检测方法操作简单，全部操作过程不需3小时，不需要病毒的细胞培养，显著缩短了病毒五种不同基因型野毒株与疫苗株鉴别与检测所需时间，并且准确性高、特异性好，重复性好，可以准确、快速、高通量地进行分析，有利于在临床实践中推广应用。