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公开(公告)号：CN102264904B
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN200980152465.6
申请日：2009-12-22
申请人： 中化帝斯曼制药有限公司荷兰公司
发明人： 简·米特斯卡·拉恩·范德 , 哈罗德·莫洛·穆迪 , 理查德·克尔曼 , 托马斯·杜斯·范德
摘要： 本发明涉及源自野生型青霉素G酰基转移酶的突变体原核青霉素G酰基转移酶，其特征在于所述突变体在选自下组的一个或多个氨基酸位置上具有氨基酸取代，所述组由根据具有SEQ ID No：1中所示氨基酸序列的Escherichia coli青霉素G酰基转移酶的氨基酸编号的氨基酸位置A3、A77、A90、A144、A192、B24、B109、B148、B313、B460和B488组成。
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公开(公告)号：CN101970654B
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN200880125518.0
申请日：2008-11-14
申请人： 酵素生物技术有限公司
发明人： 阿努帕玛·达特拉 , W·R·维亚萨蕊亚妮 , 崔普提·克里斯纳肯特·爱莎 , 克斯利柯·帕维尔 , 贝克·斯塔尼拉夫
CPC分类号： C12N11/04 , C12N9/84 , C12N9/96 , C12N11/06 , C12P35/02 , C12P37/04 , C12P37/06 , Y02P20/588
摘要： 本发明公开了一种稳定实用、高效且作用稳定的生物催化剂及其固化方法。所述的固化方法的原理是沉淀部分纯化酶，同时使用如戊二醛等交联剂进行团聚，并包埋到如凝胶等天然聚合物和如聚乙烯醇等合成聚合物的混合物中，然后在温和的温度和pH中进行有效的凝胶化，获得一种稳定的生物催化剂。用这种方法固化的酶包括rE.coliREIII(pKA18)分泌的青霉素酰化酶，rE.coli BL21CCM7394(pKIPl)和rE.coli RE III(pKXIPl)表达的无色杆菌属分泌的新青霉素酰化酶。
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公开(公告)号：CN118516345A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410734875.8
申请日：2024-06-07
申请人： 兰州理工大学
摘要： 本发明提供一种高活性固定化青霉素酰化酶的制备方法，S1采用反相微乳液法合成Fe3O4纳米粒子Fe3O4NPs；S2，在碱性条件下包覆β‑CD制备Fe3O4@β‑CD NPs；S3，在S2中加入具有金属离子的无机化合物，在包覆β‑CD的同时与Fe3O4NPs、β‑CD共同反应，获得同时具有金属离子和β‑CD组合的载体，所述载体包覆在所述Fe3O4NPs外侧，获得具有金属离子的新载体；S4，利用γ‑缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷(KH560)对S3中的产物进行硅烷化，得到含有金属离子的Fe3O4@β‑CD‑g‑KH560NPs；S5，利用其环氧基团对青霉素酰化酶实现固定化；S6，对比探究，结果讨论。本发明提升固定化PGA酶活回收率。
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公开(公告)号：CN117737045A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311728239.6
申请日：2018-05-23
申请人： 科德克希思公司
发明人： 拉玛·沃兰德里 , 克里斯多佛·迈克尔·米克李斯奇 , 奥斯卡·阿尔维左 , 约瓦娜·纳佐尔 , 段达 , 朱迪·维多利亚·安东尼奥·维杜雅 , 斯蒂芬·詹纳 , 安驰慧 , 基思·艾伦·卡纳达 , 保罗·N·迪瓦恩 , 伊曼·法拉萨特 , 安娜·弗里斯科瓦斯卡 , 卡特里娜·W·莱克萨 , 罗伯特·凯文·奥尔
摘要： 本申请涉及工程化青霉素G酰化酶。本发明提供了工程化青霉素G酰化酶(PGA)、编码该酶的多核苷酸、包含该酶的组合物以及使用该工程化PGA酶的方法。
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公开(公告)号：CN113584008B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202110868353.3
申请日：2021-07-30
申请人： 湖南福来格生物技术有限公司
摘要： 本发明属于酶工程技术领域，涉及一种青霉素G酰化酶突变体及其应用。所述的青霉素G酰化酶突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中突变多个氨基酸位点。利用本发明的青霉素G酰化酶突变体，催化水解7‑苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸(G‑7‑ADCA)制备7‑氨基‑3‑脱乙酰氧基头孢烷酸(7‑ADCA)，与突变之前的酶相比，具有更高比活力，更高的转化效率，更低的底物残留和更好的有机溶剂耐受性，更适用于工业规模化生产应用。
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公开(公告)号：CN115418331A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202211039610.3
申请日：2022-08-29
申请人： 新发药业有限公司
摘要： 本发明涉及一种产青霉素G酰基转移酶自诱导培养基及其应用。配方为：蛋白胨5～20g/L、酵母粉5～20g/L、硫酸铵2～8g/L、磷酸氢二钠5～15g/L、磷酸二氢钾2～6g/L、硫酸镁0.5～2.5g/L、甘油6～20g/L、葡萄糖2～5g/L、乳糖0～10g/L。本发明还提供了利用该自诱导培养基发酵生产青霉素G酰基转移酶的方法。使用本发明提供的产青霉素G酰基转移酶自诱导培养基诱导培养含有T7启动子和青霉素G酰基转移酶表达基因的大肠杆菌时，乳糖的诱导能力相对较弱，能够避免前体蛋白在细胞质中的过度积累，给翻译后修饰过程以充足的时间，从而减少包涵体的形成，能够明显提高青霉素G酰基转移酶发酵酶活，达到52U/mL。
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公开(公告)号：CN109852660B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN201910012708.1
申请日：2019-01-07
申请人： 宁夏大学
IPC分类号： C12P35/04 , C12N11/14 , C12N11/082 , C12N9/84
摘要： 一种头孢羟氨苄制备方法，包括以下步骤：在水浴恒温的反应器中加入预定体积的离子液体与磷酸盐缓冲溶液组成共溶剂；向共溶剂中加入预定摩尔比的D‑HPGM与7‑ADCA并搅拌其中，D‑HPGM与7‑ADCA的摩尔比为1:1～1:2.0；7‑ADCA浓度为0.1～1.0mol/L；向加入了D‑HPGM与7‑ADCA的共溶剂中加入磁性固定化青霉素G酰化酶，持续搅拌使磁性固定化青霉素G酰化酶与D‑HPGM与7‑ADCA充分接触，直至反应结束；将反应结束的反应体系液体分层静置，使溶解有头孢羟氨苄的上层磷酸盐缓冲溶液与下层离子液体分层，调节分离出的磷酸盐缓冲溶液的pH至4.0～5.5，使头孢羟氨苄结晶析出并干燥。
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公开(公告)号：CN113584008A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110868353.3
申请日：2021-07-30
申请人： 湖南福来格生物技术有限公司
摘要： 本发明属于酶工程技术领域，涉及一种青霉素G酰化酶突变体及其应用。所述的青霉素G酰化酶突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中突变多个氨基酸位点。利用本发明的青霉素G酰化酶突变体，催化水解7‑苯乙酰氨基去乙酰氧基头孢烷酸(G‑7‑ADCA)制备7‑氨基‑3‑脱乙酰氧基头孢烷酸(7‑ADCA)，与突变之前的酶相比，具有更高比活力，更高的转化效率，更低的底物残留和更好的有机溶剂耐受性，更适用于工业规模化生产应用。
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公开(公告)号：CN112111476A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201910543139.3
申请日：2019-06-21
申请人： 联邦制药(内蒙古)有限公司
摘要： 本发明属于生物发酵领域，具体涉及一种青霉素G酰基转移酶高产菌株选育及发酵方法。所述方法包括如下步骤：将青霉素G酰基转移酶产生菌用灭菌水进行梯度稀释，培养基上恒温培养过夜；将符合菌落形态标准的菌落接种于摇瓶培养基中恒温培养；将符合菌丝形态和OD600值标准的摇瓶中的菌丝接种于种子瓶培养基恒温培养，并扩大培养；然后发酵并补入诱导剂。发明方法通过优化选育和发酵工艺，可获得性能优良的菌株，在较优的发酵条件下，大大提高发酵水平。
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公开(公告)号：CN111549022A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010454547.4
申请日：2020-05-26
申请人： 兰州理工大学
摘要： 本发明一种固定化青霉素G酰化酶及其制备方法，属于固定化酶技术领域。所述固定化青霉素G酰化酶为具有纳米囊性结构的Fe3O4@PTA-PGA/PDA，是由Fe3O4 NPs固定化PGA和包覆在所述Fe3O4 NPs固定化PGA表面的PDA涂层制成，所述Fe3O4 NPs的表面负载有PTA。制备方法为：用TA对Fe3O4 NPs进行表面修饰，制备得Fe3O4@PTA NPs；将所述Fe3O4@PTA NPs作为载体对PGA进行固定化，制备得Fe3O4@PTA-PGA NPs；用DA对所述Fe3O4@PTA-PGA NPs进行表面包覆，即得。本发明的固定化青霉素G酰化酶具有良好的pH稳定性和温度耐受性，且操作稳定性和重复利用率较好，具有很高的工业应用价值。
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