公开(公告)号：CN117802049A

公开(公告)日：2024-04-02

申请号：CN202311859508.2

申请日：2023-12-30

申请人： 北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 李瑞 ,  周莹 ,  陈小威 ,  杨玉翠 ,  杨敏 ,  张换红 ,  张紫瑞

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N5/0797 ,  C12N15/62 ,  C12N15/86 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，包括以下步骤：(1)构建含有目的基因的重组病毒载体，得到含永生化融合基因的病毒；所述目的基因为c‑Myc基因、linker和ESR1羧基端截短体突变体基因的融合基因；所述ESR1羧基端截短体突变体为G521R单点突变体或G400V/M543A/L544A三点突变体；(2)利用病毒转导和筛选构建可逆永生化人神经干细胞系，通过添加或去除雌激素受体调节剂来诱导细胞永生化与去永生化。本发明所获得的永生化神经干细胞在体外培养中能自我更新和无限扩增，治疗基因易在细胞内稳定表达，并仍然具有多潜能特征。本发明对神经干细胞的研究具有重要意义。

公开(公告)号：CN117757736A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311746092.3

申请日：2023-12-19

申请人： 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 温丁可 ,  马贺然 ,  谭毅 ,  张亚丽 ,  王玉森

IPC分类号： C12N5/0775 ,  C12N5/071 ,  A61K35/28 ,  A61P9/00

摘要： 本发明属于组织工程技术领域，提供了一种提高CD146+间充质干细胞促血管生成的方法：采用提高CD146+间充质干细胞促血管生成的培养基培养CD146+间充质干细胞。所述培养基包括：IGF 500‑800pg/mL，TGF‑β1 100‑200pg/mL，PDGF‑AA 10‑50ng/mL，EGF 10‑50pg/mL，FGF2 50‑200pg/mL。本发明提供的提高CD146+间充质干细胞促血管生成的培养基，可高效地用于体内、外成血管，方便、快捷且高效，有助于提升间充质干细胞在血管生成组织工程中的应用。

公开(公告)号：CN117683720A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202311533312.4

申请日：2023-11-17

申请人： 北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 杨敏 ,  陈小威 ,  朱紫薇 ,  刘浩然 ,  张紫瑞 ,  张换红 ,  郭红玉

IPC分类号： C12N5/0793 ,  C12N5/0797 ,  C12N5/02

摘要： 本发明公开了一种将神经干细胞球诱导成神经元的方法：取神经干细胞球的单细胞悬液，用神经元培养基重悬，接种至预先包被处理的细胞培养板，于37℃、5％CO2条件下诱导培养10天，即得神经元。所述神经干细胞球的单细胞悬液是通过以下方法得到的：收集人源悬浮培养的细胞球，离心，弃掉上清，加入Accutase酶，37℃恒温震荡孵育10～30min，用移液枪吹打成单细胞悬液。本发明的方法由人神经干细胞球直接诱导神经元，不用通过转染技术获取神经元，也不用其他细胞诱导成神经干细胞，再诱导成神经元。本发明的方法的诱导时间短，诱导效率高，解决了诱导时间长、神经元诱导效率低的问题。

公开(公告)号：CN117660530A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311662426.9

申请日：2023-12-06

申请人： 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 车丽娜 ,  马贺然 ,  谭毅 ,  韩娟娟 ,  苏桂虎

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  A61K35/28 ,  A61P19/02

摘要： 本发明涉及再生医学领域，尤其涉及一种脐带间充质干细胞球制备方法及其所得产品、应用。本发明通过注射FIH‑1基因敲低表达的间充质干细胞球，相对于注射离散的MSC而言，延长了MSC在膝关节腔和软骨组织损伤部位的存留时间与活力，显著增强MSC对多种有害刺激的抵御能力、低氧和炎症微环境的耐受性，从而有望提高MSC的移植效率和对软骨组织损伤的疗效。此外，低氧培养条件下间充质干细胞球能有效维持其细胞干性和多向分化潜能，进而发挥治疗效果。本发明为MSC在临床应用中提供了一种新的使用途径和研究方法。

公开(公告)号：CN117551611A

公开(公告)日：2024-02-13

申请号：CN202311579276.5

申请日：2023-11-24

申请人： 北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 杨敏 ,  陈小威 ,  朱紫薇 ,  刘浩然 ,  张紫瑞 ,  张换红 ,  郭红玉

IPC分类号： C12N5/079 ,  C12N5/0797 ,  C12N5/02

摘要： 本发明公开了一种将神经干细胞球诱导成星形胶质细胞的方法：取神经干细胞球的单细胞悬液，用诱导星形培养基重悬，接种至预先包被处理的细胞培养板，于37℃、5％CO2条件下诱导培养7天，即得星形胶质细胞。本发明还公开了一种诱导星形培养基，由以下组分组成：DMEM/F12培养基，N2添加剂，B27添加剂和胎牛血清，其中，N2添加剂占1％～2％，B27添加剂占1％～2％，胎牛血清占1％～10％。所述诱导星形培养基在诱导神经干细胞球分化为星形胶质细胞中的应用。本发明的方法诱导时间短，诱导效率高，解决了诱导时间长的问题。本发明的诱导星形培养基配方简单，不添加生长因子，可显著提高星形胶质细胞分化率。

公开(公告)号：CN117531023A

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202311531377.5

申请日：2023-11-17

申请人： 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 张程鹏 ,  杨双双 ,  谭毅 ,  韩晶 ,  陈四玉 ,  袁振玮

IPC分类号： A61K47/69 ,  A61K47/62 ,  A61P19/00 ,  A61P25/00 ,  C12N5/0775

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，提供了一种提高外泌体骨髓靶向性的方法，采用无铜点击化学的方法使外泌体负载DSS6。上述修饰外泌体可提高骨靶向并用于骨髓损伤。本发明提高了外泌体在骨髓修复中的临床应用性，有广阔的发展前景。

公开(公告)号：CN117511874A

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN202311686505.3

申请日：2023-12-11

申请人： 银丰生物工程集团有限公司 ,  山东银丰生命科学研究院

发明人： 张癸荣 ,  李明月 ,  王天 ,  张策 ,  贾雪 ,  郑钦品

IPC分类号： C12N5/0797 ,  C12N5/0775

摘要： 本发明公开了一种诱导脐血干细胞向神经干细胞分化的方法，包括以下步骤：(1)取脐血干细胞，加入培养基，均匀铺于培养皿，培养18～30h；(2)弃掉原培养基，加入维甲酸及培养基诱导分化，隔天更换维甲酸及培养基1次，培养3天，激光共聚焦显微镜观察，即可见有神经干细胞；维甲酸的浓度为0.5～2.0μM。本发明的诱导脐血干细胞向神经干细胞分化的方法，采用维甲酸诱导脐血干细胞向神经干细胞分化，未使用常规原代细胞培养所涉及的基质胶，避免因使用基质胶导致内毒素、支原体、细菌、真菌污染。本发明对体外诱导分化获得神经干细胞的研究具有重要意义和应用潜力。

公开(公告)号：CN117089518A

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202311110009.3

申请日：2023-08-31

申请人： 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 王秋红 ,  王欣 ,  谭毅 ,  赵小惠 ,  梁晨 ,  郭慧贞

IPC分类号： C12N5/0775 ,  C12N13/00 ,  A61K35/28 ,  A61P37/02 ,  A61P29/00 ,  A61P19/02 ,  A61P11/06 ,  A61P3/10 ,  A61P37/06 ,  A61P13/12 ,  A61P1/00 ,  A61P7/06 ,  A61P1/16 ,  A61P25/16 ,  A61P31/00 ,  A61P17/02 ,  A61P17/00 ,  A61P21/00

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，提供了一种外泌体的制备方法：将分泌外泌体的母细胞以620nm‑1000nm辐照后培养；然后由上述培养液分离纯化获得外泌体。本发明采用特定波段的弱激光辐照间充质干细胞，能够刺激间充质干细胞在短时间内产生和释放大量外泌体的效应，且弱激光辐射安全可控性强，操作简单，耗时短，对细胞影响极其小，不会干扰细胞正常的功能，获得的外泌体的免疫抑制功能更强；提高了外泌体在治疗自身免疫性疾病方面的疗效，为减轻炎症、肿瘤、心血管等治疗领域开辟了新的途径，具有广阔的临床应用前景。

公开(公告)号：CN114946830B

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202210442823.4

申请日：2022-04-26

申请人： 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 杨双双 ,  陈四玉 ,  谭毅 ,  罗焕 ,  郭慧贞 ,  赵小惠

IPC分类号： A01N1/02

摘要： 本发明属于生物医药领域，提供了一种优化的外泌体储存液，包括pH为7.4的APOP缓冲液、海藻糖浓度为0.055 g/mL、甘露醇浓度为0.05 g/mL、HSA浓度为9.5 g/L。本发明的外泌体储存液不存在与外泌体粒径接近的颗粒物质，能够长期保持外泌体在低温下结构与功能的稳定性。

公开(公告)号：CN116426460A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310281962.8

申请日：2023-03-22

申请人： 山东银丰生命科学研究院 ,  银丰生物工程集团有限公司

发明人： 李琼琼 ,  马成瑶 ,  崔玉芹 ,  温泉 ,  张文华 ,  张智慧

IPC分类号： C12N5/071

摘要： 本发明公开了一种诱导鼻黏膜基底层上皮干细胞分化成自主翻转的类器官的方法，包括以下步骤：(1)Matrigel铺板：取40％的solution，加入培养孔板中，置于细胞培养箱中孵育；(2)细胞准备：将HNEpCs细胞进行消化处理；(3)细胞种板：用5％solution将上述细胞重悬，放入预先孵育的40％solution中，放入细胞培养箱进行培养；(4)3天换一次液，在培养的第6天向培养基中添加DAPT，持续培养21天；得到自主翻转的类器官。本发明为研究气道上皮细胞形态学和功能学提供了良好的基础。