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公开(公告)号：CN118147221A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410402075.6
申请日：2024-04-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/84 , C12N15/113 , C12N9/22 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料的方法，所述方法根据不结球白菜GGP基因的uORF序列设计sgRNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，使用根癌农杆菌侵染带柄子叶和下胚轴的方法转化不结球白菜单倍体诱导系，然后将含有基因编辑元件的单倍体诱导系与野生型不结球白菜育种材料杂交，后代经过表型和流式细胞仪鉴定和筛选得到不含基因编辑元件的不结球白菜双单倍体，然后对得到双单倍体进行基因编辑位点鉴定和Vc含量测定，快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料。采用本发明的方法可以快速获得纯合的突变体双单倍体材料，提高不结球白菜维生素C的含量，为白菜品质生物育种打下基础。
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公开(公告)号：CN116987701A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202210440534.0
申请日：2022-04-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/84 , C12N15/113 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 不结球白菜BcERF070基因调控不结球白菜Vc含量中的应用，本研究验证了BcERF070基因在不结球白菜Vc合成途径中的重要作用，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体并转化到不结球白菜中，与非转基因植株相比，转基因植株的BcERF070基因序列发生碱基替换，植株Vc含量随之下降，并进而实现了提早不结球白菜开花时间、缩短育种周期、提高蔬菜品质，为创造不结球白菜新种质提供技术支持。
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公开(公告)号：CN116515892A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310679807.1
申请日：2023-06-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了网格轻链蛋白在抑制TuMV侵染不结球白菜中的应用。本发明通过获得BcCLC1、BcCLC2病毒诱导的基因沉默（VIGS）诱导的沉默植株，结果表明VIGS诱导的基因沉默后，不结球白菜中BcCLC1、BcCLC2基因的相对表达水平明显下降，沉默植株接种TuMV后发现植株中病毒RNA的积累量均明显低于对照植株，这说明BcCLC1、BcCLC2基因沉默抑制TuMV的侵染，在不结球白菜抗TuMV育种具有应用前景。
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公开(公告)号：CN112575117B
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202110018658.5
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组用于鉴定不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”的SSR分子标记引物及其应用，属于蔬菜品种鉴定与良种技术领域。所述SSR分子标记引物的序列为：BrcSSR60‑F:5’‑GAGCATCATCACCAAGCTCA‑3’，BrcSSR60‑R:5’‑ATGTAACCGTTTCCTGGCTG‑3’。利用本发明公开的SSR分子标记引物及其检测方法可以将不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”两个品种进行有效区分。该方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，操作简单，检测准确迅速，当出现品种混淆或有争议时可进行有效地监督和仲裁。
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公开(公告)号：CN115747370A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211417240.2
申请日：2022-11-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组不结球白菜的KASP分子标记及其在种质资源鉴定中的应用。所述KASP分子标记基于不结球白菜基因组和重测序KASP技术，开发了一组不结球白菜的KASP引物，根据所开发的SNP位点以及设计的引物可以构建所选群体的DNA指纹图谱、品种鉴定、以及种子纯度鉴定等实验，实现对不结球白菜种质资源和种子纯度的快速、准确、有效地鉴定。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109652455B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN113564201A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110886126.3
申请日：2021-08-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种十字花科作物花粉电击遗传转化方法，以不结球白菜的成熟花粉细胞作为受体材料，把质粒DNA在电场的作用下，导入花粉中，结合常规的人工授粉，得到转基因种子。通过对电转染花粉的培养观察，以及获得的后代植株进行转基因检测，证明电击转化法可以成功的在不结球白菜上应用。本发明首次在不结球白菜上应用电击转化技术作为基因编辑的方法，与目前农杆菌转化，基因枪法等转基因方法相比，操作相对简洁，成本较低，可以进一步研究建立遗传转化体系，为不结球白菜的遗传育种提供更好的工具。
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公开(公告)号：CN111466395B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202010364546.0
申请日：2020-04-30
Applicant: 南京农业大学 , 南京理想农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种天然环保的不结球白菜种子包衣剂及其制备方法。本发明提供的一种天然环保的不结球白菜种子包衣剂，包括成膜剂、引发剂、杀虫杀菌剂、警戒色以及水；成膜剂为2％‑10％的蜡质玉米淀粉，引发剂为50mg/L或80mg/L的抗坏血酸，杀虫杀菌剂为20mg/L—300mg/L的苦参碱，警戒色为1％‑25％的氧化铁黄，使用蜡质玉米淀粉作为成膜剂，该材料安全环保，可食用，成本低廉。杀虫杀菌剂为苦参碱，该材料天然环保，筛选的浓度和抗坏血酸相互作用，能有效的提高不结球白菜种子活力，且具有杀虫杀菌作用更有利于幼苗生长。警戒色为氧化铁黄，属于矿物颜料，其安全环保，不易褪色。本发明的环保无公害，能有效提高不结球白菜种子的发芽力。
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公开(公告)号：CN111543307A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010381924.6
申请日：2020-05-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种白菜或青花菜CRISPR-Cas9基因编辑体系基因编辑效率的鉴定方法。该方法包含以下步骤:(1)利用聚乙烯亚胺修饰的碳纳米管介导的叶片瞬时转化法将CRISPR-Cas9基因编辑载体转化白菜或青花菜叶片；(2)注射后的第三天观察叶片GFP荧光蛋白的表达情况,提取有GFP荧光表达的叶片部位的基因组DNA，扩增编辑位点附近的序列测序验证编辑位点附近是否发生基因编辑,从而鉴定CRISPR-Cas9基因编辑体系的基因编辑效率。本方法解决了白菜和青花菜难以通过农杆菌侵染实现瞬时转化的问题，本发明简单有效地实现了白菜和青花菜的基因编辑，具有实验周期短，转化效率高的优点。
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公开(公告)号：CN111493137A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010366663.0
申请日：2020-04-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种不结球白菜黄玫瑰真空冷冻干燥方法。本发明通过控制不同的预冻时间和干燥时间组合，提供了一种优化不结球白菜的真空冷冻干燥技术，本发明提供的不结球白菜黄玫瑰真空冷冻干燥方法，通过将不结球白菜黄玫瑰叶片的黄叶和绿叶分开，黄绿两种叶片各取相同重量、无伤且大小一致的完整叶片，以及特定重量的去柄叶片，将黄叶和绿叶以及去柄叶片放入托盘中，按照预先设定好的预冻时间和干燥时间进行真空冷冻干燥，显著提高了不结球白菜‘黄玫瑰’的耐储性、运输性，且处理后的冻干产品复水性良好，营养物质以及色素损失小。
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