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公开(公告)号：CN113402593A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110646232.4
申请日：2021-06-09
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种L‑苏氨酸转运蛋白及其编码基因与应用，属于生物工程技术领域。本发明在研究氨基酸转运蛋白基础上，提供了谷氨酸棒杆菌中NCgl0580序列具有转运L‑苏氨酸功能。本发明提供一种新型L‑苏氨酸转运蛋白NCgl0580，它具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，全长903个核苷酸，编码300个氨基酸。通过基因工程手段，将NCgl0580在产L‑苏氨酸的谷氨酸棒杆菌33a实现过表达，能够将L‑苏氨酸的产量提高至2.3g/L。这为代谢工程改造菌株提高L‑苏氨酸产量提供了新思路。
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公开(公告)号：CN112175982A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN202011047620.2
申请日：2020-09-29
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N15/77 , C12N1/21 , C12N15/52 , C12P13/02 , A23L29/269 , A61K8/88 , A61K47/34 , A61Q19/00 , C12R1/15
摘要： 本发明公开了一种γ‑PGA聚合酶基因重组菌株及其构建方法与应用，是一种从糖质原料一步法发酵合成γ–聚谷氨酸的生产工艺，属于合成生物学和发酵工程领域。本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同强度的RBS调控元件调控合成酶基因簇各基因的表达水平获得的重组菌株Cg 1/10BCA、Cg B1/10CA和Cg BC1/10A所生产的γ‑PGA分子量为295.47～28018kDa。本发明成功地构建了聚谷氨酸的外源合成途径，实现理性控制γ‑PGA分子量的目的，节省了原料和过程控制成本，提高了经济效益，拓展了聚谷氨酸的应用范围，具有很好的工业应用价值和前景。
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公开(公告)号：CN110590920B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910940240.2
申请日：2019-09-30
申请人： 江南大学
IPC分类号： C07K14/34 , C12N15/31 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12P13/06 , A23L33/175 , A61K31/198 , A61K8/64 , C12R1/15
摘要： 本发明公开了一种L‑丝氨酸转运蛋白及其应用，属于生物工程技术领域。本发明在研究氨基酸转运蛋白基础上，发现了一种来源于谷氨酸棒杆菌的NCgl2054蛋白，其具有转运L‑丝氨酸功能。通过基因工程手段，将NCgl2054蛋白在产L‑丝氨酸的谷氨酸棒杆菌ΔSSA实现过表达，能够将L‑丝氨酸的产量提高至29.9g/L。这为代谢工程改造菌株提高L‑丝氨酸产量提供了新思路。
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公开(公告)号：CN111321162A
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN202010142834.1
申请日：2020-03-04
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种全面表征大肠杆菌终止子强度的质粒系统及方法。根据终止子终止转录和保护上游基因mRNA的功能，设置了特征参数转录终止程度(α)、上游基因mRNA保护能力(β)和表观终止效率(η)。本发明还公开了表征上述终止子特征参数所用的探针质粒的构建方法及其应用。本发明中构建的终止子探针质粒为pTK、pTK-dR和pTK-sR，分别对应特征参数为α、β和η，为全面表征大肠杆菌终止子强度提供了有效工具，进而为合成生物学提供了精准的元件模块。
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公开(公告)号：CN110590920A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910940240.2
申请日：2019-09-30
申请人： 江南大学
IPC分类号： C07K14/34 , C12N15/31 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12P13/06 , A23L33/175 , A61K31/198 , A61K8/64 , C12R1/15
摘要： 本发明公开了一种L-丝氨酸转运蛋白及其应用，属于生物工程技术领域。本发明在研究氨基酸转运蛋白基础上，发现了一种来源于谷氨酸棒杆菌的NCgl2054蛋白，其具有转运L-丝氨酸功能。通过基因工程手段，将NCgl2054蛋白在产L-丝氨酸的谷氨酸棒杆菌ΔSSA实现过表达，能够将L-丝氨酸的产量提高至29.9g/L。这为代谢工程改造菌株提高L-丝氨酸产量提供了新思路。
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公开(公告)号：CN109486845A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811549261.3
申请日：2018-12-18
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法，属于合成生物技术领域。本发明标准化的最简启动子与RBS文库，使针对目标基因表达量的调控的改造工作大幅缩短，省去了内源启动子或RBS的筛选和强度表征环节，平均一个目标基因的改造周期可以由之前的30-40天缩短为10天以内。所述调控方法的强度跨度较单一元件高一百倍以上，由此可实现对代谢途径的大幅度调控及生物系统的功能优化。较以往的粗线条的上调或下调基因表达量的方法，本发明中的利用标准元件组合调控的方法可以更加精准、定量的调控目的基因。使代谢途径得到进行更加精准的调控，尤其是分支点处的流量调节，可提高目标产物产量，同时防止某些基因过度表达给细胞带来的代谢负担。
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公开(公告)号：CN107621555A
公开(公告)日：2018-01-23
申请号：CN201710696236.7
申请日：2017-08-15
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种在体外基于原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)分析启动子与RNA聚合酶间交互作用的方法。首先将抛光的单晶硅片进行羟基化处理，硅烷化处理，再经戊二醛将RNA聚合酶固定。在AFM金镀层探针上以自组装单分子层(Self-assembled monolayers，SAMs)的形式获得启动子修饰的AFM探针；通过AFM力谱技术，控制AFM探针与基底表面靠近，停留并且最终分开，从而记录能够反映启动子与RNA聚合酶会特异性结合的力-距离曲线，进而获得RNA聚合酶与启动子的结合-解离过程中的生物物理学参数。
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公开(公告)号：CN104450816A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410190809.5
申请日：2014-05-08
申请人： 江南大学
摘要： 本发明提供一种以酵母粉代替钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)发酵培养基中玉米浆组分进行发酵提高L-精氨酸产量的方法，属于生物技术领域。分别考察不同浓度酵母粉及玉米浆对钝齿棒杆菌生长及积累L-精氨酸的影响，玉米浆的最适添加浓度为25 g/L，酵母粉的最适添加浓度为10 g/L，发酵96 h后，酵母粉较玉米浆的添加发酵，L-精氨酸产量提高29.5%，生物量降低8.5%，单位菌体L-精氨酸产量提高40.8%，用酵母粉代替玉米浆有利于L-精氨酸的积累。同时，由于酵母粉成分相对稳定，不同批次发酵，L-精氨酸产量差异小。所以，用酵母粉代替玉米浆进行发酵，对于L-精氨酸生产菌株的发酵特性研究及L-精氨酸工业化生产具有重要意义。
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