一种砀山酥梨遗传转化方法

    公开(公告)号:CN105543278B

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201610076734.7

    申请日:2016-02-02

    Abstract: 本发明一种砀山酥梨遗传转化方法,包括以下步骤:(1)遗传转化受体的建立;(2)农杆菌的培养及侵染液的配置;(3)侵染与共培养;(4)除菌培养与筛选培养;(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体,以NptII为标记基因,以GUS基因为报告基因,通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化,获得阳性愈伤组织,然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗;本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织,进而进行遗传转化的方法,砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低,而且携带病菌量少,接种褐化率和污染率都很低,而且取材方便,愈伤组织诱导率高,能够满足遗传转化的需求。

    一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110101801A

    公开(公告)日:2019-08-09

    申请号:CN201910559923.3

    申请日:2019-06-26

    Abstract: 本发明提供了一种具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物及其制备方法和应用,属于植物提取技术领域。本发明所述制备方法先对铁皮石斛进行杀青,然后将杀青后的铁皮石斛制成石斛粉;再将石斛粉与无水乙醇混合,浸提后固液分离,将浸提液真空浓缩,干燥后得到无水乙醇浸膏;然后将无水乙醇浸膏溶于水中,加入石油醚萃取,收集第一下相;再将第一下相与正丁醇混合,萃取,收集第二下相;最后将第二下相真空冷冻干燥,得到具有抗胃癌作用的铁皮石斛提取物。实验表明,本发明所述方法制备得到的铁皮石斛提取物具有抗胃癌作用,能诱导胃癌细胞凋亡,在含有250μg/mL铁皮石斛提取物的培养基中,胃癌细胞总凋亡率可达80%。

    一种适于高原地区薰衣草的分株繁殖方法

    公开(公告)号:CN109757228A

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201910168028.9

    申请日:2019-03-06

    Abstract: 本发明提供一种适于高原薰衣草的分株繁殖方法,属于薰衣草繁殖技术领域。所述繁殖方法,包括以下步骤:在土壤深厚、平整、无盐碱的地块上施入底肥,翻耕,起垄成畦整地;将健康、无病虫害的薰衣草植株分株定植在畦中,浇水,追肥,修剪,灌水,除草和病害田间管理;待薰衣草进入盛花期,收获薰衣草;在11月中下旬对薰衣草进行越冬前管理。分株繁殖方法通过起垄成畦增加土壤通透性,促进根系生长发育,同时方便排灌,适时追肥和灌溉来保墒增温,通过多次修剪促进来年薰衣草萌发新梢增加开花率,同时高原地区光照时间长和日光强均促进薰衣草健壮生长,提高分株繁殖成活率。且本发明的方法所得成苗见花快,植株生长健壮且花形饱满,产量高。

    一种梨漆酶基因PbLAC1及其载体、宿主细胞和应用

    公开(公告)号:CN109207493A

    公开(公告)日:2019-01-15

    申请号:CN201811170973.4

    申请日:2018-10-09

    Abstract: 本发明涉及植物分子生物学和基因工程技术领域,提供了一种梨漆酶基因PbLAC1,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种植物超量表达载体,所述植物超量表达载体包括PbLAC1构建的pMD-18T-PbLAC1质粒。本发明还提供了一种遗传工程化的宿主细胞,所述宿主细胞包括PbLAC1基因序列。本发明还提供了上述梨漆酶基因PbLAC1在调控植物木质素合成及细胞壁发育中的应用。本发明的梨漆酶基因PbLAC1为完善植物木质素合成途径提供了新的证据,对水果品质改良以及作物其他关键农艺性状的改良也具有重要的理论及实践意义,同时,还为利用基因工程调控梨石细胞含量提供了新的途径。

    一种铁皮石斛总生物碱含量的检测方法

    公开(公告)号:CN108645802A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810469952.6

    申请日:2018-05-16

    Abstract: 本发明提供了一种铁皮石斛总生物碱含量的检测方法,与现有铁皮石斛酸性染料比色法相比,本次发明首次选用血根碱替代石斛碱作为标准品,使待测样品和标准品与酸性染料反应生成络合物的最大吸收波长一致(均为410nm);同时优选溴酚蓝作为酸性染料,减少本底吸收值,从而使新方法具有准确性高、稳定性好、易于重现的优点,为研究铁皮石斛总生物碱累积规律及铁皮石斛总生物碱制备工艺的质量控制提供了更加准确有效的检测方法。

    在8-9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法

    公开(公告)号:CN105766643B

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201610189335.1

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 一种在8‑9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法,该方法是在8‑9月份,选择树龄20年以内的梨树,并选择生长健壮无病虫害一年生的背上枝或徒长枝,在其芽体饱满充实处进行短截,诱发梨植株在剪口下萌发新梢,待新梢生长8㎝~10㎝时,剪下该新梢作为组培外植体;外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本;根据组培计划,需要多少外植体,就提前处理多少枝条。在8‑9月份可以通过本发明方法获得充足的砀山酥梨再生植株,满足利用基因工程进行种质改良研究或砀山酥梨规模化种苗繁殖等;且本发明组培方法成活率达96%以上。

    一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法

    公开(公告)号:CN108344814A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810063847.2

    申请日:2018-01-23

    Abstract: 本发明提供了一种5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的同步检测方法,首先,采用高效液相色谱法测定待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度和5-羟基松柏醇的吸光度,其中,检测波长为243nm;所述高效液相色谱法采用梯度洗脱,所述梯度洗脱中洗脱剂包括甲醇和水;然后根据5-羟基松柏醛的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醛的吸光度,得到所述待测样品中5-羟基松柏醛的浓度;根据5-羟基松柏醇的标准曲线和待测样品中5-羟基松柏醇的吸光度,得到所述待测样品中5-羟基松柏醇的浓度。本发明提供的方法能够有效地分离5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇,而且能够分别检测5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇的浓度。

    在6-7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法

    公开(公告)号:CN105815219B

    公开(公告)日:2018-07-03

    申请号:CN201610189334.7

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种在6‑7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法,首先在6‑7月份,选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心,促使原新稍重新再诱发生长新的新梢,待新的新梢生长至10㎝~15㎝时,剪下该新稍即得组培外植体,然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单,操作容易,不增加其他成本。在6‑7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体,培育出砀山酥梨再生植株,满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等;且本发明组培方法成活率达96%。

    一种基于代谢组学鉴别霍山米斛与霍山铁皮石斛品种的方法

    公开(公告)号:CN105548404B

    公开(公告)日:2017-09-26

    申请号:CN201610029560.9

    申请日:2016-01-15

    Abstract: 本发明公开了一种基于代谢组学鉴别霍山米斛与霍山铁皮石斛品种的方法,具体步骤包括:(1)石斛样品的采集;(2)石斛代谢组学样品的制备;(3)石斛样品代谢产物的检测;(4)代谢组学数据的处理与分析。本发明的优点在于:采用代谢组学方法获得石斛大量的内源性代谢物信息,并从中筛选出鉴别霍山米斛与霍山铁皮石斛的特征性代谢产物,进而从整体上区别这两种石斛品种,技术方法先进、实验结果可靠,为石斛的品种鉴定和质量评价提供了一种优良方法。

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