一种根癌农杆菌介导的平菇菌丝遗传转化方法

    公开(公告)号:CN108004262A

    公开(公告)日:2018-05-08

    申请号:CN201810036306.0

    申请日:2018-01-15

    IPC分类号: C12N15/80

    CPC分类号: C12N15/80

    摘要: 本发明提供了一种利用根癌农杆菌介导的平菇菌丝遗传转化方法,属于基因的遗传转化技术领域,包括以下步骤:1)质粒载体改造;2)改造后的质粒载体转化农杆菌,获得阳性菌;3)阳性菌侵染平菇菌丝,共培养得新长出的菌丝;4)将所述新长出的菌丝接种到含有潮霉素和头孢霉素的PDA培养基上选择培养5~7d,分离得到有抗生素抗性的平菇转化菌株;5)对所述平菇转化菌株进行转基因鉴定。本发明方法适用于平菇基因功能的验证及遗传改良育种等研究,具有操作简单、稳定性强、转化率高、成本低廉等优点。

    一种糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数优化方法

    公开(公告)号:CN108419607A

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201810186277.6

    申请日:2018-03-07

    IPC分类号: A01G18/20 A01G18/50 A01G18/00

    CPC分类号: A01G18/20 A01G18/00 A01G18/50

    摘要: 本发明公开了一种糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数优化方法。该种糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数优化方法包括制备PDA培养基;培养糙皮侧耳菌种;设置培养温度、料液比、秸秆粒度、表面活性剂剂量为实验因素,为每一个实验因素设置若干个水平;制备不同棉秸秆固体培养基,灭菌、接种、培养,测定棉秸秆固体培养基中木质素的含量,记录实验结果;依据上步实验结果,细化实验因素的水平,设计多组实验条件进行降解实验,测定各实验条件下剩余培养基的木质素含量,记录实验结果;根据分析结果,选择最佳水平组合,确定最佳的糙皮侧耳降解棉秸秆的工艺参数。该种方法,合理设置实验条件,从而完成对木质素降解工艺参数的整体考量。

    一种筛选高效降解棉秸秆木质素的糙皮侧耳菌株的方法

    公开(公告)号:CN102870598A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210371132.6

    申请日:2012-09-28

    IPC分类号: A01G1/04

    摘要: 本发明公开了一种筛选高效降解棉秸秆木质素的糙皮侧耳菌株的方法。不同的糙皮侧耳菌株从保藏状态下取出,经活化培养后接种到经过改良的PDA-Bavendamm平板培养基和经过改良的PDA-RB平板培养基上进行初步筛选出变色反应强且反应时间快的菌株,然后其接种到棉花秸秆固体培养基上再进行筛选。依据木质素降解率和选择性指数的大小,复筛出高效降解棉秸秆木质素的糙皮侧耳菌株。本发明建立了一套科学的筛选方法体系,初筛操作简便,通过向普通变色培养基中添加适量的棉秸秆粉末,使筛选更具针对性,保证了筛选结果的准确性;棉秸秆固体培养基碳源单一,使得降解棉秸秆木质素的糙皮侧耳菌株对碳源的选择具有唯一性,保证复筛结果的精确性。