一种快速添加或替换目的基因的蛋白标签的方法

    公开(公告)号:CN111850022A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010628191.1

    申请日:2020-07-02

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种快速添加或替换目的基因的蛋白标签的方法,包括引物设计、目的基因和蛋白标签片段的扩增、表达载体双酶切及重组酶处理、转化、阳性转化子检测及测序比对。本发明在目的基因和蛋白标签的序列片段上,分别设计两对引物F1、R1和F2、R2,其中F1与R2要分别和表达载体插入位置要有至少15bp的同源臂,R1与F2之间也要有至少15bp的同源臂。目的基因片段、蛋白标签和载体片段在重组酶反应后,利用大肠杆菌转化体系就可以得到同时含有目的基因和添加蛋白标签的环状质粒,该方法适用于构建各种多标签表达载体,具有简单、快速和高效等特点。

    一种防控梨叶片异常脱落的方法

    公开(公告)号:CN111699897A

    公开(公告)日:2020-09-25

    申请号:CN202010417147.6

    申请日:2020-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种防控梨叶片异常脱落的方法,即对梨树喷施外源赤霉素溶液就可有效防控梨叶片异常脱落。本发明研究发现,发生异常落叶树的叶柄离区中,有生理活性的GA3和GA4,以及赤霉素合成关键中间产物GA12含量均显著下降;喷施0.5~1.0mg/L赤霉素均可提高叶片保留率,而喷施1.0mg/L赤霉素后叶片保留的时间更长。喷施赤霉素30-40d时,梨树叶片的保留率增加最为显著,在两年的重复实验中分别增加1023.08%和65.56%。适宜浓度的赤霉素处理可以提高抗氧化酶活性,降低活性氧含量,延缓落叶的发生,能够有效防控梨异常落叶。

    一种减轻梨幼果冻害的方法

    公开(公告)号:CN108450205A

    公开(公告)日:2018-08-28

    申请号:CN201810039388.4

    申请日:2018-01-16

    Abstract: 本发明公开了一种减轻梨幼果冻害的方法,在霜冻前喷施防冻剂水溶液,所述的防冻剂为6-苄氨基腺嘌呤和水杨酸中的任意一种或其组合。本发明筛选出的抗冻剂由6-苄氨基腺嘌呤和水杨酸配制而成,水溶液中6-苄氨基腺嘌呤浓度为0.30~0.70mg/L,水杨酸浓度为为3.0~4.2mmol/L。霜冻前2天喷施该抗冻剂可显著减轻梨幼果冻害。本发明筛选出的抗冻剂可为预防梨幼果晚霜冻害提供理论依据和现实指导,减少因梨花期前后经常发生的霜冻给果农带来的意外经济损失。

    一种高效快速的梨叶片再生出不定芽的方法

    公开(公告)号:CN105794642A

    公开(公告)日:2016-07-27

    申请号:CN201610204117.0

    申请日:2016-04-01

    CPC classification number: A01H4/008 A01H4/001

    Abstract: 本发明公开了一种高效快速的梨叶片再生出不定芽的方法,包括:获取无菌组培苗、叶片诱导产生不定芽、不定芽的初代培养和继代培养,诱导培养基使用基础培养基NN69、生长素IBA和细胞分裂素TDZ相组合,叶龄20?50d左右,暗培养21d,雪花梨叶片再生效果显著,再生率可达到70.83%,平均每叶再生芽数为2.06个,愈伤发生率达到100%,褐化率极低甚至为0,足以满足梨品种种质保存的需要和作为遗传转化材料的再生率要求。对叶片要求不高,丰富了材料来源,并解决了木本植物组织再生过程中褐化率高的难题。有效解决了东方梨品种再生率普遍较低的问题,有望为东方梨品种的遗传转化提供一个有效材料,实现梨遗传转化的突破。

    一种梨果实果梗长度主效QTL位点的SNP分子标记方法及其应用

    公开(公告)号:CN103740828A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201410014478.X

    申请日:2014-01-14

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/13 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明提供了一种与梨果实果梗长度主效QTL位点的SNP标记方法及其应用,属于植物分子育种领域。梨果梗长度主效QTL位点的SNP标记为Pyb07_095(LOD值=9.19),位于scaffold278.0的第502462个碱基处。利用Pyb07_095开发基于高分辨率溶解曲线鉴定梨果实果梗长度的特异标记,该特异引物可对果梗长度进行良好分型,即检测QTL位点Pyb07_095上的多态性表达果梗长度大小的差异。本发明提供的梨果实果梗长度主效QTL分子标记可用于梨果实果梗长度性状的分子标记辅助选择育种,对于加快梨品种的遗传改良进程,提高育种选择效率具有重要的理论和实践指导意义。

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