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公开(公告)号：CN110564659A
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201910878309.3
申请日：2019-09-17
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了耐乙酸钠、氯化钠和异丁醇的大肠杆菌及其构建方法，包括如下步骤：将筛选的含有大肠杆菌全局调控因子CRP的第142位氨基酸G被I置换的突变位点的基因，引入野生型大肠杆菌中，得到耐乙酸钠、氯化钠和异丁醇的大肠杆菌CRP-G142I；本发明从大肠杆菌全局调控因子出发，理性设计饱和突变，除了有效节约成本以及避免盲目性之外，充分利用了原核生物调控网络成等级性的特点，实现了微小扰动基因改变操作下完成了宿主菌基因组大范围网络的表达水平的扰动，从而协调不同的生理代谢活动，以使菌体对外界环境的变化做出应答，从而也使得规避了很多基因型表型之间复杂性的麻烦，也解决了因为实验限制而无法获得最优表型的问题。
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公开(公告)号：CN106399447B
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201610957390.0
申请日：2016-10-27
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了一种利用混菌发酵提高乙偶姻产量的方法，包括如下步骤：将高产核黄素大肠杆菌工程菌株EC‑Rib 02种子按生物量为0.05‑0.8的接种密度接入发酵培养基中，在32～42℃、搅拌转速100～300rpm条件下发酵3～5h，接入保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX‑518，继续发酵；所述高产核黄素大肠杆菌工程菌株EC‑Rib 02和保藏编号为CGMCC NO.7096的多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CJX‑518的生物量比为1‑4：1；本发明的方法能使乙偶姻产量提高。
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公开(公告)号：CN110229828A
公开(公告)日：2019-09-13
申请号：CN201910466998.7
申请日：2019-05-31
申请人： 天津大学
IPC分类号： C12N15/31 , C12N1/21 , C07K14/245 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了大肠杆菌全局调控因子的突变基因soxR及应用，大肠杆菌全局调控因子的突变基因soxR的核苷酸序列是SEQ ID No.1所示。大肠杆菌全局调控因子的突变基因soxR所编码的蛋白质的氨基酸序列用SEQ ID No.2所示。本发明所构建的包含大肠杆菌全局调控因子的突变基因soxR(G121P)的工程菌生物安全，遗传背景清晰，包含的大肠杆菌全局调控因子的突变基因soxR(G121P)在细菌耐药性遗传机制研究方面具有重要应用。
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公开(公告)号：CN108611311A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810444091.6
申请日：2018-05-10
申请人： 天津大学
CPC分类号： C12P7/18 , C12N9/0004 , C12N9/0006 , C12N9/1022 , C12N9/88 , C12Y101/01004 , C12Y101/01076 , C12Y202/01006 , C12Y401/01005
摘要： 本发明公开了一种高产手性D-(-)-2,3-丁二醇的谷氨酸棒杆菌菌株及构建方法及应用，方法为：(1)在谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032中敲除副产物乳酸生成途径ldh基因、副产物乙酸生成途径pta-ack基因操纵子、副产物甘油生成途径nagD基因和副产品meso-2,3-丁二醇生成途径的butA基因；在染色体上的乙酸生成pta-ack位点，插入Ptuf强启动子过表达的合成支路alsSD操纵子；敲除副产品琥珀酸生成途径ppc基因；(2)将pECXK99E-AUSD质粒导入到步骤(1)获得的谷氨酸棒杆菌中。本发明菌株安全无害，利用葡萄糖在有氧条件下生产，工艺简单，产品手性纯度在99％以上。
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公开(公告)号：CN106047916A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610408674.4
申请日：2016-06-03
申请人： 天津大学
CPC分类号： C12N15/77 , C12N9/0006 , C12N9/0008 , C12N9/88 , C12P13/00 , C12Y101/01027 , C12Y101/01028 , C12Y401/01032
摘要： 本发明公开了生产5‑氨基乙酰丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株及构建及应用，构建方法为：(1)在谷氨酸棒杆菌中敲除乳酸脱氢酶编码基因ldhA和乙酸生成基因pta‑ackA、pqo和cat，得到的菌株命名为CB4；在CB4菌株中的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因ppc前面插入强的sod启动子，得到菌株CB5；在CB5菌株中敲除基因pck，得到菌株CB6；(2)将质粒pXA和质粒pEP2tuf‑rhtA转入到CB6菌株中。本发明构建的菌株在以10g/L葡萄糖为碳源的培养基中能够生产2.78g/L 5‑氨基乙酰丙酸，这为后续发酵罐连续补料提高5‑氨基乙酰丙酸的产量和产率奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104195158A
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201410310295.2
申请日：2014-09-19
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了一株产聚3-羟基丁酸酯的重组大肠杆菌及构建方法及用途，方法为：将E.coli JM109的sdaA基因的启动子和核糖体结合位点序列置换为组成型启动子trc及RBS5；将设计的核糖体结合位点分别与基因pgk、serA、serB、serC连接成片段，与含启动子的转录调控序列Trc-162组成操纵子PSer，整合到基因组serC基因58bp位点；进而在编码丙酮酸脱氢酶复合体aceEF操纵子基因上游48bp插入转录调控序列Trc-162，构建工程菌株SD06。本发明所构建的菌遗传背景清晰，更有效获取乙酰辅酶A，在基本盐培养基中以葡萄糖为底物时聚三羟基丁酸酯的产量提高到野生菌的2.66倍。
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公开(公告)号：CN103627663A
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201310664891.6
申请日：2013-12-09
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了利用木糖生长的重组枯草芽孢杆菌，所述杆菌的araR基因第184位A碱基被G碱基替换，碱基替换后的araR基因序列如SEQ ID NO.14所示。本发明采用进化工程与全基因组测序结合的方法，发现了有利于枯草芽孢杆菌利用木糖生长的基因突变，通过基因工程技术将点突变引入野生菌株，获得了能够利用木糖快速生长的重组枯草芽孢杆菌。
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公开(公告)号：CN103361296A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201310346580.5
申请日：2013-08-09
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了一种生产高纯度手性D-(-)-2，3-丁二醇的枯草芽孢杆菌菌株及构建方法及应用，构建方法为：在枯草芽孢杆菌中敲除2，3-丁二醇的直接底物乙偶姻的降解途径中acoA基因、敲除乙偶姻还原酶编码基因bdhA、敲除副产物乙酸生成途径pta基因和敲除副产物乳酸生成途径ldh基因，使用P43强启动子过表达合成支路alsSD操纵子、使用P43强启动子过表达D-(-)-2，3-丁二醇脱氢酶编码基因bdhA和使用P43强启动子过表达还原力平衡过程转氢酶编码基因udhA。本发明所构建的菌安全无害，可以利用葡萄糖为底物生产手性纯度大于99％的D-(-)-2，3-丁二醇。
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公开(公告)号：CN101596522B
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN200910069434.6
申请日：2009-06-25
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及一种惯性压电激振装置和实现方法，该装置包括压电陶瓷叠堆、惯性质量、底座、压电力传感器、预紧弹簧、预紧螺帽、螺栓、绝缘套管等；压电陶瓷叠堆位于惯性质量和底座之间，预紧螺栓和预紧弹簧对各结合面压紧，压电陶瓷叠堆的正负电极引出线分别接外部驱动电路的正负输出，预紧螺栓与压电陶瓷叠堆的内壁之间装有绝缘套管，底座与压电力传感器通过螺栓紧密连接。本发明采用固定螺栓直接固定于被激励结构的方式，通过压电陶瓷叠堆的伸缩运动对结构产生激振力，通过压电力传感器对输出力进行测量与监控，提供的激振力频率上限可超过20KHz。具有体积小巧、结构简单、安装方便、频率上限高等优点，可以工作于正弦、正弦扫频激励和冲击激励方式。
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公开(公告)号：CN101596522A
公开(公告)日：2009-12-09
申请号：CN200910069434.6
申请日：2009-06-25
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及一种惯性压电激振装置和实现方法，该装置包括压电陶瓷叠堆、惯性质量、底座、压电力传感器、预紧弹簧、预紧螺帽、螺栓、绝缘套管等；压电陶瓷叠堆位于惯性质量和底座之间，预紧螺栓和预紧弹簧对各结合面压紧，压电陶瓷叠堆的正负电极引出线分别接外部驱动电路的正负输出，预紧螺栓与压电陶瓷叠堆的内壁之间装有绝缘套管，底座与压电力传感器通过螺栓紧密连接。本发明采用固定螺栓直接固定于被激励结构的方式，通过压电陶瓷叠堆的伸缩运动对结构产生激振力，通过压电力传感器对输出力进行测量与监控，提供的激振力频率上限可超过20KHz。具有体积小巧、结构简单、安装方便、频率上限高等优点，可以工作于正弦、正弦扫频激励和冲击激励方式。
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