一种基于适配体修饰纳米金比色检测玉米赤霉烯酮的方法

    公开(公告)号:CN107389665B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201710487619.3

    申请日:2017-06-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于适配体修饰纳米金比色检测玉米赤霉烯酮的方法,将巯基化玉米赤霉烯酮适配体DNA1和巯基化适配体的互补链DNA2分别与13±2nm纳米金连接形成适配体‑纳米金探针和互补链‑纳米金探针,通过竞争法进行玉米赤霉烯酮的可视化检测。当待测物中含有靶标时,靶标与适配体结合,使适配体‑纳米金探针和互补链‑纳米金探针呈游离状态,在高盐浓度下,纳米金容易发生聚集,颜色由红色变成蓝色;当待测物中不含靶标时,适配体与其互补链碱基互补配对结合,使适配体‑纳米金探针和互补链‑纳米金探针呈稳定的网络结构,在高盐浓度下,纳米金不发生聚集,颜色仍为红色。随着靶标浓度的增大,纳米金颜色由红色逐渐变为蓝色,通过测定溶液在200~800nm的紫外‑可见光谱,即可实现对待测物中玉米赤霉烯酮的定量检测。

    一种特异识别细菌脂多糖的广谱核酸适配体及其定向筛选方法

    公开(公告)号:CN106834295B

    公开(公告)日:2020-04-24

    申请号:CN201710168491.4

    申请日:2017-03-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供一条能识别多种不同革兰氏阴性菌来源的脂多糖广谱性核酸适配体。该核酸适配体是基于免标记靶标分子、固定化核酸文库的capture‑SELEX技术基础上定向筛选获得的。即以鼠伤寒沙门氏菌脂多糖为唯一靶标,利用生物素‑亲和素作用将随机寡核苷酸文库通过生物素化的短互补链固定在亲和素包被的Fe3O4磁性纳米颗粒上,经过孵育、分离、扩增、酶切制备单链、克隆测序等步骤,当文库富集到一定程度后,再加入沙门氏菌和大肠杆菌完整的活性菌作为定向分子进行定向筛选,经过共15轮的反复筛选最终获得一条能识别四种脂多糖的广谱性核酸适配体。该核酸适配体能应用于饮用水、食品或临床医学等方面脂多糖的分析检测、分离富集和毒性中和等。

    一种用于赭曲霉毒素A快速检测的上转换适配体试纸条的制备方法

    公开(公告)号:CN108918863A

    公开(公告)日:2018-11-30

    申请号:CN201810502981.8

    申请日:2018-05-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于赭曲霉毒素A快速检测的上转换适配体试纸条的制备方法。其特征在于:包括,上转换发光纳米材料改性:将含有Yb3+、Y3+、Er3+的无机盐加入油酸、十八烯混合、搅拌并通入惰性气体,加热,形成均一溶液;将氟化铵、氢氧化钠溶于甲醇后加入上述溶液中,加热蒸发除去甲醇,通入惰性气体进行反应,加入冷凝回流装置、升温进行反应;将聚丙烯酸、乙醇混合,将所述上转换发光纳米材料分散于氯仿溶液后加入到聚丙烯酸、乙醇混合溶液中,搅拌反应,得到改性的上转换发光纳米材料;制备上转换适配体探针。本发明提供了一种新的层析试纸条技术,可以有效提高试纸条的灵敏度,降低制作成本,并达到定量检测的目的。

    一种基于纳米材料自组装的土霉素SERS检测方法

    公开(公告)号:CN106052872B

    公开(公告)日:2018-10-16

    申请号:CN201610382439.4

    申请日:2016-06-01

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于纳米材料自组装的土霉素SERS检测方法,用于鱼粉中土霉素(OTC)含量的检测。纳米金颗粒(80nm粒径)通过含OTC适配体的碱基序列与纳米金颗粒(13nm粒径)连接在一起,4‑巯基苯甲酸偶联在纳米金颗粒表面,由此产生拉曼信号。当OTC接触检测体系时,OTC适配体与OTC特异性结合,导致80nm纳米金颗粒和13nm纳米金颗粒距离缩小,热点增强,拉曼信号增大,从而实现检测目的。本检测体系能够定量检测土霉素,线性范围是4.60×10‑2‑4.60×102fg/mL,检出限为4.00×10‑3fg/mL。本发明用于土霉素检测具有灵敏度高、快速简便的优点,应用于鱼粉的检测,结果准确可靠。

    一种生物传感器及其检测副溶血性弧菌的方法

    公开(公告)号:CN108120703A

    公开(公告)日:2018-06-05

    申请号:CN201711269486.9

    申请日:2017-12-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于适配体识别量子点标记分子马达生物传感检测副溶血性弧菌的方法。通过将pH敏感型量子点荧光纳米材料标记在载色体表面作为为信号探针,特异性识别副溶血性弧菌的适配体为识别探针。利用“ε亚基抗体-生物素-亲和素-5’端生物素化的副溶血性弧菌适配体”系统将识别探针与F0F1-ATPase分子马达连接构建F0F1-ATPase分子马达适配体传感系统。该方法对于副溶血性弧菌的最低检测限可达到7cfu/mL,且可应用于虾肉样品中副溶血性弧菌的检测,结果准确可靠。

    一种基于双色时间分辨荧光标记‑磁分离适配体识别同时检测两种致病菌的方法

    公开(公告)号:CN105675877B

    公开(公告)日:2017-08-22

    申请号:CN201610115237.3

    申请日:2016-03-01

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种基于双色时间分辨荧光标记‑磁分离适配体识别同时检测两种致病菌的方法,用于牛奶及乳制品中鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的检测。通过将该两种菌适配体分别与NaYF4:Ce/Tb和NaGdF4:Eu时间荧光分辨纳米材料偶联形成信号探针,同时该两种适配体与Fe3O4磁性纳米材料偶联形成捕获探针,当存在目标物质时,由于适配体对目标物质的特异性识别,最终形成“三明治”夹心复合物。通过监控544nm和615nm处荧光信号强度,能够定量检测鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌,两者的线性范围分别为102‑105cfu ml‑1和102‑105cfu ml‑1最低检测限分别为15cfu ml‑1和20cfu ml‑1。本发明用于同时检测两种致病菌具有灵敏度高、快速简便的优点。并应用于牛奶及乳制品的检测,结果准确可靠。

    一种基于ABEI修饰的花状纳米金同时检测土霉素,四环素和卡那霉素的方法

    公开(公告)号:CN106053439A

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201610381689.6

    申请日:2016-06-01

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种基于ABEI修饰的花状纳米金同时检测土霉素,四环素和卡那霉素的方法。其特征在于:基于微孔板所构建的N‑(4‑氨丁基)‑N‑乙基异鲁米诺(ABEI)‑H2O2‑对碘苯酚(PIP)稳态化学发光系统可以将化学发光时间有效延长。巯基化互补链连接ABEI修饰的花状纳米金被用于信号探针。固定在微孔板上的适配体被用作分子识别元件,将三种抗生素的适配体分别固定在微孔板的三个区域为靶标的同时检测提供了空间上的分辨。所构建的适配体传感器可以实现对土霉素、四环素和卡那霉素的同时检测,在一定的浓度范围内,其化学发光强度与靶标的量呈负对数相关。此外,也将该传感器用于实际样品检测,证明传感器的优良性能。

    一种基于纳米材料自组装的土霉素SERS检测方法

    公开(公告)号:CN106052872A

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201610382439.4

    申请日:2016-06-01

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: G01J3/44 G01N1/28 G01N1/44

    Abstract: 本发明提供了一种基于纳米材料自组装的土霉素SERS检测方法,用于鱼粉等水产品中土霉素(OTC)含量的检测。纳米金颗粒(80nm粒径)通过含OTC适配体的碱基序列与纳米金颗粒(15nm粒径)连接在一起,4‑巯基苯甲酸孵育在纳米金颗粒表面,由此产生拉曼信号。当OTC接触检测体系时,OTC适配体与OTC特异性结合,导致80nm纳米金颗粒和15nm纳米金颗粒距离缩小,热点增强,拉曼信号增大,从而实现检测目的。本检测体系能够定量检测土霉素,线性范围是0.046‑460fg/mL,检出限为0.004fg/mL。本发明用于土霉素检测具有灵敏度高、快速简便的优点,应用于鱼粉等样品的检测,结果准确可靠。

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