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公开(公告)号：CN101768581B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010112337.3
申请日：2010-02-20
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/00
Abstract: 具有高产D-塔格糖能力的L-阿拉伯糖异构酶的突变体酶L20A及其突变方法，属于生物工程、基因工程和酶工程技术领域。本发明通过基因突变，将来源于解纤维热酸菌(Acidothermus cellulolytics)ATCC 43068的L-阿拉伯糖异构酶(简称L-AI酶)的20位氨基酸Leu替换为Ala，获得单突变体酶L20A，它的D-塔格糖的生产能力较野生型L-AI酶有显著提高。
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公开(公告)号：CN100577793C
公开(公告)日：2010-01-06
申请号：CN200710191380.1
申请日：2007-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 微生物转化D-果糖制备D-阿洛酮糖的菌种和方法，属于食品生物技术领域。本发明涉及一株从鱼塘底泥中筛选获得的球形红杆菌(Rhodobactersphaeroides)SK011，保藏编号CCTCC NO：M 207185，及对其培养发酵，并用于转化D-果糖制备D-阿洛酮糖的方法。本发明以SK011作为菌种，采用碳源、氮源、诱导物和无机盐组成的发酵培养基，培养所得菌体进一步处理得到细胞生物催化剂，以D-果糖为底物，生物转化制备D-阿洛酮糖。在优化条件下发酵培养，发酵液或游离细胞或透性化细胞或冻干菌粉或其固定化细胞用于D-果糖转化0.5-48h，转化液中含D-阿洛酮糖2-50g/L。
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公开(公告)号：CN101333547A
公开(公告)日：2008-12-31
申请号：CN200810021498.4
申请日：2008-08-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种控制pH和补料发酵生产苯乳酸的方法，属于食品生物技术领域。本发明用乳酸菌作为菌种，接种于发酵罐中，装液量为1～10L，搅拌转速为50～150rpm，6～12h后流加6～10mol/L的氢氧化钠，控制pH在5.5～6.5；在发酵过程的12～54h分批向发酵罐中补加葡萄糖和底物苯丙酮酸，培养至70～90h后，即得含苯乳酸的发酵液。本发明的优点是：通过控制发酵环境的pH，并补加碳源和底物，既解除了高浓度的底物抑制，又补充了营养物质，使得菌体能够在适宜的环境下生长，发酵结束后，苯乳酸的含量达到6～20g/L，工艺简单、环境污染小、操作方便、苯乳酸的产量高。
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公开(公告)号：CN101215554A
公开(公告)日：2008-07-09
申请号：CN200810019109.4
申请日：2008-01-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种耐高温L－阿拉伯糖异构酶及其基因序列，属于生物工程技术领域。本发明提出一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐高温L－阿拉伯糖异构酶，其基因核苷酸序列为SEQ ID NO：1，其氨基酸组成为SEQ ID NO：2。本发明还公开了耐高温L－阿拉伯糖异构酶基因工程菌株的构建及耐高温L－阿拉伯糖异构酶的高效表达和纯化的方法。本发明提供的耐高温L－阿拉伯糖异构酶在较高温条件下具有较高的活性和稳定性，具有广泛的应用前景和经济意义。
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公开(公告)号：CN120060103A
公开(公告)日：2025-05-30
申请号：CN202510222455.6
申请日：2025-02-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/38 , C12N9/12 , C12N9/90 , C12N9/78 , C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/56 , C12N15/61 , C12N15/31 , C12N15/113 , C07K14/245 , C12P19/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种提高乳酰‑N‑四糖产量的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明利用转录组技术筛选的3个基因tauB、nikD和livM被证明能够促进LNT和LNTri II的产生。以工程菌株MG‑LNT‑09为出发菌株，通过单独质粒过表达来源于大肠杆菌K‑12衍生菌MG1655的内源性转运基因tauB、nikD、livM，LNT和LNTri II的生物合成效率显著提高，摇瓶培养中LNT的产量高达7.77g/L，LNTri II的产量高达3.03g/L。不使用任何抗生素或质粒，将tauB基因整合到hlyE位点的优化菌株MG3WB在5L生物反应器中获得了最大LNT滴度40.35g/L，具有良好的产业化前景，为进一步工业化生产与合成其他复杂母乳寡糖奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119552791A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411774464.8
申请日：2024-12-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种产L‑岩藻糖的工程大肠杆菌及其应用，其通过代谢工程策略，利用基因组整合和质粒表达路径基因相结合的方式，增强了L‑岩藻糖的生产，通过优化双质粒系统，加强前体供应，实现了高效生产L‑岩藻糖。此外，引入hok/sok系统和cysC的营养缺陷系统，成功构建了基于质粒的无抗生素依赖的工程菌株。该菌株在不添加抗生素的情况下，通过摇瓶培养和补料培养，分别产生了7.99g/L和61.91g/L的L‑岩藻糖，提供了迄今为止报道的最高L‑岩藻糖产量，并且发酵过程完全无需抗生素的使用。
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公开(公告)号：CN118064345A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410351278.7
申请日：2024-03-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12N15/31 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12P17/16 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种从头合成靛蓝的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明以大肠杆菌为宿主，针对靛蓝前体色氨酸生产和积累能力问题，敲除了基因组上的色氨酸阻遏蛋白基因trpR，芳香族氨基酸转运蛋白基因yddG和分枝酸变位酶(CM)/预苯酸脱水酶(PD)双功能酶蛋白基因pheA。游离表达色氨酸酶基因tnaA、含黄素单加氧酶基因maFMO、内源性基因trpE/D、脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸合酶基因aroG、磷酸甘油酸脱氢酶基因serA得到实现靛蓝从头合成的工程菌株。又通过优化培养基配方，最终在摇瓶水平下靛蓝的最高产量达到179mg/L，在实现靛蓝的从头合成产量提升中表现出显著的潜力。
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公开(公告)号：CN118028129A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410213996.8
申请日：2024-02-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成乳酰‑N‑新四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物基因工程领域。本发明以工程菌株MGC02为出发菌株，通过引入β‑1,3‑N‑乙酰葡糖胺基转移酶LgtA和β‑1,4‑半乳糖基转移酶CpsIaJ，使用各种启动子优化酶表达水平，提高前体供应，引入lux型群体感应系统并优化QS启动子，最后，LNnT的细胞外滴度为20.33g/L，生产力为0.41g/L/h，具有良好的产业化前景。
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公开(公告)号：CN117965484A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410002878.2
申请日：2024-01-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了高效合成乳酰‑N‑岩藻糖基五糖‑Ⅴ的工程大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物代谢工程技术领域。以高效生产乳酰‑N‑四糖(LNT)的大肠杆菌为起始菌株，引入具有底物特异性的α1,3/4‑岩藻糖基转移酶，实现LNFP V的高效合成。从九个候选酶中选择脆弱拟杆菌α1,3/4‑岩藻糖基转移酶作为体内合成LNFP V的最佳酶，其LNFP V产量最高，副产物积累最低。通过计算机辅助的定点突变，获得了一种有益的突变体K128D，进一步提高了LNFPV的产量，构建得到的重组大肠杆菌通过分批补料培养可以产生25.68g/L的LNFP V，为进一步工业化生产与合成其他复杂母乳低聚糖奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114990037B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210573394.4
申请日：2022-05-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/61 , C12N15/56 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/53 , C12P19/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种高产乳酰‑N‑四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物代谢工程技术领域。本发明以前期研究中获得的高产乳酰‑N‑三糖II的重组大肠杆菌为出发菌株，并在该大肠杆菌基因组上整合有单拷贝的galE，通过质粒组合优化表达lgtA、pF和galE，并通过CRISPR‑Cas9基因编辑系统在大肠杆菌宿主基因组上敲除ugD，以缓解中间产物的代谢分流，同时加强产物合成过程中辅因子的再生与循环，进一步提高乳酰‑N‑四糖的产量，在摇瓶发酵实验过程中，重组大肠杆菌生产乳酰‑N‑四糖的能力为6.16g/L，在5L发酵罐中，乳酰‑N‑四糖的产量达到57.5g/L，为进一步工业化生产乳酰‑N‑四糖奠定了基础。
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