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公开(公告)号：CN110819607B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN201911234041.6
申请日：2019-12-05
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了CsLYK基因及其编码蛋白在提高柑橘溃疡病抗性的应用。所述CsLYK基因的编码蛋白为柑橘LysM类受体蛋白磷酸激酶，命名为CsLYK蛋白，CsLYK基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；蛋白序列为SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明还保护一种柑橘抗细菌性溃疡病的育种方法，包括如下步骤：将一个柑橘LysM类受体蛋白磷酸激酶编码基因通过超表达载体整合到柑橘中，有效提高柑橘对细菌性溃疡病的抗性。本发明对于柑橘的抗溃疡病育种具有重大的应用价值，这将为柑橘溃疡病抗病遗传育种奠定基础，大力促进柑橘抗溃疡病基因工程的发展和应用。
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公开(公告)号：CN115820685A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211004475.9
申请日：2022-08-22
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种柑橘CsGSTF1基因及其应用，所述柑橘CsGSTF1基因是柑橘溃疡病的感病基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示或者在SEQ ID NO：1所示核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且具有编码同等活性蛋白的核苷酸序列；应用方法具体包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsGSTF1基因的VIGS片段；(2)构建VIGS的表达载体；(3)VIGS表达载体转化柑橘，得到柑橘CsGSTF1基因被沉默的VIGS植株。本发明首次克隆获得柑橘CsGSTF1基因，并利用VIGS沉默降低柑橘CsGSTF1的转录水平，验证了CsGSTF1在柑橘溃疡病抗感性中的功能；获得的VIGS沉默植株的H2O2含量明显升高，对柑橘溃疡病抗性大大增强，溃疡病的发病程度显著降低，在柑橘抗溃疡病育种中具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN114350837B
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210013779.5
申请日：2022-01-06
申请人： 西南大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了用于检测柑橘APX基因家族的引物对、试剂盒及方法和应用，用于检测柑橘APX基因家族的引物对包括6对引物对，分别为CsAPX01～CsAPX05、CsAPX‑R，序列如SEQIDNO：1～SEQIDNO：12所示，利用引物对对柑橘APX家族的荧光定量PCR检测方法，提取待测样品的总RNA，采用试剂盒进行荧光定量PCR检测；本发明提供的6对引物能够通过荧光定量PCR方法快速、特异、准确检测出柑橘APX家族的表达特性，检测灵敏度高，检测结果准确、可靠，以鉴定抗坏血酸过氧化物酶APX基因家族在胁迫中对柑橘耐性机制的作用。
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公开(公告)号：CN115058449A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210724641.6
申请日：2022-06-24
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种利用CsWRKY43干扰以提高柑橘溃疡病抗性的方法，采用RNA干扰(RNAi)降低柑橘属植物中CsWRKY43的转录水平，其中，CsWRKY43编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；具体包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsWRKY43编码基因的RNAi片段；(2)构建CsWRKY43基因片段的干扰表达载体；(3)干扰表达载体转化柑橘，得到转基因植株。本发明通过克隆柑橘CsWRKY43编码基因的RNAi片段，构建干扰载体，然后转化柑橘，得到的转基因植株溃疡病病斑面积可最大降低至现有柑橘的64％，病情指数可最大降低至现有柑橘的61％，能够显著的减轻溃疡病的发病程度。
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公开(公告)号：CN110283824B
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN201910676561.6
申请日：2019-07-25
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种利用CsXTH04基因沉默以提高柑橘对溃疡病抗性的方法，属于分子生物学领域，包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsXTH04基因片段，然后进行干扰表达载体构建；(2)干扰表达载体转化柑橘，得到转基因植株。该方法能够显著提高柑橘对溃疡病的抗性。
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公开(公告)号：CN114395570A
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202111646354.X
申请日：2021-12-29
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种利用CsNCED3基因沉默以提高柑橘对溃疡病抗性的方法，包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsNCED3基因片段；(2)构建CsNCED3基因片段的干扰表达载体；(3)干扰表达载体转化柑橘，得到转基因植株。本发明利用CsNCED3基因沉默，通过克隆柑橘CsNCED3基因片段，进行干扰表达载体构建，然后转化柑橘，得到的转基因植株CsNCED3的表达量显著下调至现有柑橘的29％，溃疡病发病程度可降低至现有柑橘的47％，因而该方法可一定程度上提高植株对溃疡病的抗性。
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公开(公告)号：CN113215190A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110617137.1
申请日：2021-06-03
申请人： 西南大学
IPC分类号： C12N15/82 , C12N15/113 , A01H5/00 , A01H6/78
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种基于CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术获得柑橘纯合突变体的方法。所述方法包括以下步骤：将柑橘上胚轴茎段与农杆菌共培养，随即对上胚轴茎段进行热处理，然后将上胚轴茎段转入添加1 mg/L BA、0.5 mg/L IAA和40 mg/L Km的MS培养基中进行诱导。该方法能够提高纯合突变体的基因编辑效率。
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公开(公告)号：CN110295185A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910683121.3
申请日：2019-07-26
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种基于CsWAKL08超量表达提高柑橘对溃疡病抗性的方法，包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsWAKL08基因编码序列，然后进行超量表达载体构建；(2)超量表达载体转化柑橘，得到转基因植株。该方法通过将一个与编码细胞壁关联的类受体激酶的基因过表达载体整合到柑橘中，有效提高柑橘对溃疡病的抗性。
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公开(公告)号：CN106337059A
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201610816705.X
申请日：2016-09-12
申请人： 西南大学
CPC分类号： C12N15/8223 , C07K14/43586 , C07K2319/02 , C07K2319/04 , C12N15/8281
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种改良柑桔黄龙病抗性的方法。本发明要解决的技术问题是为提高柑桔对黄龙病的抗性，提供一种新选择。本发明的技术方案是一种改良柑桔黄龙病抗性的方法，具体如下：将韧皮部特异启动子调控下的抗菌肽基因整合到柑桔基因组中；所述的抗菌肽基因为抗菌肽基因PR1aCB,CB,或PR1aCBer，CB具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，R1aCB具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，PR1aCBer具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。本发明韧皮部特异启动子指导抗菌肽等抗性基因在韧皮部高效表达，进而增强柑桔黄龙病的抗性水平。
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