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公开(公告)号：CN104762314A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510049764.4
申请日：2015-01-30
申请人： 西南大学
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及可删除筛选标记基因的植物表达载体及其用途。本发明要解决的技术问题是获得无选择标记转基因柑橘的周期长、工作量大。本发明提供了可删除筛选标记基因的植物表达载体，该载体包括目标基因表达元件和Cre/Loxp系统；所述Cre/Loxp系统为在2个loxP位点间构建ipt基因表达原件和Cre重组酶表达原件。本发明还提供了快速获得无选择标记转基因柑橘的方法，包括遗传转化和嫁接2个步骤。本发明植物表达载体可用于转基因植物的获得，并能快速有效的删除筛选标记基因。本发明方法可用于多年生木本植物，快速获得无筛选标记的转基因植株。
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公开(公告)号：CN104694537A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201510023235.7
申请日：2015-01-16
申请人： 西南大学
摘要： 本发明属于柑桔品质改良技术领域，具体涉及诱导表达抗菌肽的植物表达载体及其用途。本发明要解决的技术问题是为改良柑桔溃疡病抗性提供一种新选择。本发明的技术方案是诱导表达抗菌肽的表达框架，其特征在于：采用柑桔溃疡病病原菌高效诱导表达启动子调控天蚕素抗菌肽的表达。本发明还提供了还有所述表达框架的植物表达载体以及含有所述植物表达载体的宿主细胞。本发明还提供了增强柑桔溃疡病抗性的方法。本发明通过将溃疡病高效启动子调控下的抗菌肽基因mAATCB整合到柑桔基因组中,实现了抗菌肽基因在柑桔受溃疡病病原菌入侵时迅速高水平表达；从而增强了柑桔溃疡病抗性。
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公开(公告)号：CN118638854A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410928543.3
申请日：2024-07-11
申请人： 西部(重庆)科学城种质创制大科学中心 , 西南大学
摘要： 本发明公开了柑橘CsNAC21/22基因在提高柑橘溃疡病抗性中的应用，属于基因工程技术领域，CsNAC21/22基因的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，提高CsNAC21/22基因的表达量柑橘溃疡病抗性增强。过表达CsNAC21/22基因的植株与WT植株相比，能显著减轻溃疡病的发病程度，减小病斑面积，最大降低为WT的60.6％，病情指数为WT的60.7％；柑橘CsNAC21/22基因转录水平的升高不会对植株的外观表型和长势产生明显影响；本发明提供的柑橘CsNAC21/22基因可以独立用作研究橘溃疡病抗性的候选基因，也可以与其他的抗病或感病基因一起进行柑橘抗溃疡病分子育种，具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN116355955B
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202310450920.2
申请日：2023-04-25
申请人： 西南大学
IPC分类号： C12N15/84 , C12N15/113 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/78 , C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及分子生物学领域，具体涉及一种利用CsEXPA8基因表达提高柑橘对溃疡病抗性的方法；所述方法为降低柑橘属植物中CsEXPA8基因的转录水平，其中降低柑橘属植物中CsEXPA8基因的转录水平是通过RNA干扰（RNAi）实现的。通过这种方法获得的转基因柑橘的叶片接种溃疡细菌部位的病菌细胞的数量降低至现有野生型对照柑橘的16.9%，显著抑制了转基因柑橘中溃疡细菌入侵部位溃疡病菌的生长，提高了柑橘对溃疡病的抗性。
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公开(公告)号：CN115820686B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202211007298.X
申请日：2022-08-22
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种柑橘CsGSTU18基因及其应用，所述柑橘CsGSTU18基因是柑橘溃疡病的感病基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示或者在SEQ ID NO：1所示核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且具有编码同等活性蛋白的核苷酸序列；应用方法具体包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsGSTU18基因的VIGS片段；(2)构建VIGS的表达载体；(3)VIGS表达载体转化柑橘，得到柑橘CsGSTU18基因被沉默的VIGS植株。本发明首次克隆获得柑橘CsGSTU18基因，并利用VIGS沉默降低柑橘CsGSTU18的转录水平，验证了CsGSTU18在柑橘溃疡病抗感性中的功能；获得的VIGS沉默植株的H2O2含量明显升高，对柑橘溃疡病抗性大大增强，溃疡病的发病程度显著降低，在柑橘抗溃疡病育种中具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN115820685A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211004475.9
申请日：2022-08-22
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了一种柑橘CsGSTF1基因及其应用，所述柑橘CsGSTF1基因是柑橘溃疡病的感病基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示或者在SEQ ID NO：1所示核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且具有编码同等活性蛋白的核苷酸序列；应用方法具体包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsGSTF1基因的VIGS片段；(2)构建VIGS的表达载体；(3)VIGS表达载体转化柑橘，得到柑橘CsGSTF1基因被沉默的VIGS植株。本发明首次克隆获得柑橘CsGSTF1基因，并利用VIGS沉默降低柑橘CsGSTF1的转录水平，验证了CsGSTF1在柑橘溃疡病抗感性中的功能；获得的VIGS沉默植株的H2O2含量明显升高，对柑橘溃疡病抗性大大增强，溃疡病的发病程度显著降低，在柑橘抗溃疡病育种中具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN106337059A
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201610816705.X
申请日：2016-09-12
申请人： 西南大学
CPC分类号： C12N15/8223 , C07K14/43586 , C07K2319/02 , C07K2319/04 , C12N15/8281
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种改良柑桔黄龙病抗性的方法。本发明要解决的技术问题是为提高柑桔对黄龙病的抗性，提供一种新选择。本发明的技术方案是一种改良柑桔黄龙病抗性的方法，具体如下：将韧皮部特异启动子调控下的抗菌肽基因整合到柑桔基因组中；所述的抗菌肽基因为抗菌肽基因PR1aCB,CB,或PR1aCBer，CB具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，R1aCB具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，PR1aCBer具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。本发明韧皮部特异启动子指导抗菌肽等抗性基因在韧皮部高效表达，进而增强柑桔黄龙病的抗性水平。
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公开(公告)号：CN118599867A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410886720.6
申请日：2024-07-03
申请人： 西部(重庆)科学城种质创制大科学中心 , 西南大学
IPC分类号： C12N15/29 , C12N15/84 , C12N15/64 , A01H5/00 , A01H6/78 , C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了CsDOF5.8基因在提高柑橘溃疡病抗性中的应用和方法，属于农业生物基因工程技术领域，提供CsDOF5.8基因在提高柑橘溃疡病抗性中的应用，所述CsDOF5.8基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。以及利用所述CsDOF5.8基因提高柑橘溃疡病抗性的方法，包括以下步骤：克隆柑橘CsDOF5.8基因，连接于载体上，得过表达载体；将过表达载体采用电击法转化至根癌农杆菌，得农杆菌菌液；将农杆菌菌液注射入柑橘叶片，得CsDOF 5.8基因过表达柑橘叶片。本发明为提高柑橘对溃疡病抗性提供一种新选择，有效提高柑橘对溃疡病的抗性，这对于柑橘抗溃疡病育种具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN112725225A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202011587109.1
申请日：2020-12-29
申请人： 西南大学
摘要： 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种柑橘黄龙病病原菌的试管培养方法。所述培养方法，包括：柑橘黄龙病病原菌培养方法，其特征在于，包括：(1)柑橘黄龙病毒源准备；(2)毒源材料表面消毒处理；(3)试管砧木准备和嫁接接种；(4)增殖培养；所述增殖培养包括以下步骤：MS液体培养基配制，向培养基中添加多菌灵，分装到带滤纸桥的试管中，灭菌；随后采用试管嫁接法接种黄龙病病原菌，切取经消毒处理的毒源材料的腋芽，嫁接于柑橘试管砧木上；然后将嫁接苗放入滤纸桥中；再于24‑28℃暗室培养14～21d，待试管嫁接带菌芽的萌芽长至0.5‑1.0cm时，转入12‑16h的光周期下培养。本发明的方法重现性好；可使柑橘黄龙病病原菌短时间内增殖到高浓度水平。
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