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公开(公告)号：CN116410988B
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202310477920.1
申请日：2023-04-28
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了利用柑橘RUB2调控柑橘泛素化途径改良柑橘黄龙病抗性的方法，涉及植物基因工程技术领域，利用柑橘RUB2调控柑橘泛素化途径，影响植物防御相关基因的表达，从而增强柑橘对黄龙病的抗性；所述柑橘RUB2的核苷酸序列如SEQ ID No.1。通过构建柑橘RUB2植物超量表达载体，利用根癌农杆菌介导法转化柑橘上胚轴，同时利用发根农杆菌介导法转化柑橘茎段，获得超量表达柑橘RUB2转基因植株和柑橘RUB2(56)对比文件Chao Yang等.Activation of ethylenesignaling pathways enhances diseaseresistance by regulating ROS andphytoalexin production in rice《.The PlantJournal 》.2017,第89卷(第2期),第338–353页.龙俊宏等《.柑橘中黄龙病菌效应子SDE70的表达特征及寄主互作蛋白解析》《.园艺学报》.2020,第47卷(第8期),第1451-1462页.龙俊宏.黄龙病菌SDE70和SDE695效应子在病原菌与柑橘互作中的功能研究《.中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》.2022,第D046-219页.
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公开(公告)号：CN108796049B
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN201810693224.3
申请日：2018-06-29
申请人： 西南大学
IPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q1/6895
摘要： 本发明公开了一种柑橘胼胝质合成酶基因家族的荧光定量PCR检测试剂盒，包括12对荧光定量PCR检测引物，所述引物的序列如SEQ ID NO:3～26所示。还公开了一种柑橘胼胝质合成酶基因家族的荧光定量PCR检测方法，提取待测样品的总RNA，采用前述的试剂盒进行荧光定量PCR检测。本申请提供的12对引物能够通过荧光定量PCR方法快速、准确检测出柑橘胼胝质合成酶基因家族中的柑橘胼胝质合成酶基因，检测灵敏度高，检测结果准确、可靠，为防治柑橘黄龙病等的进一步研究打下基础。
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公开(公告)号：CN104762314A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510049764.4
申请日：2015-01-30
申请人： 西南大学
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及可删除筛选标记基因的植物表达载体及其用途。本发明要解决的技术问题是获得无选择标记转基因柑橘的周期长、工作量大。本发明提供了可删除筛选标记基因的植物表达载体，该载体包括目标基因表达元件和Cre/Loxp系统；所述Cre/Loxp系统为在2个loxP位点间构建ipt基因表达原件和Cre重组酶表达原件。本发明还提供了快速获得无选择标记转基因柑橘的方法，包括遗传转化和嫁接2个步骤。本发明植物表达载体可用于转基因植物的获得，并能快速有效的删除筛选标记基因。本发明方法可用于多年生木本植物，快速获得无筛选标记的转基因植株。
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公开(公告)号：CN104694537A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201510023235.7
申请日：2015-01-16
申请人： 西南大学
摘要： 本发明属于柑桔品质改良技术领域，具体涉及诱导表达抗菌肽的植物表达载体及其用途。本发明要解决的技术问题是为改良柑桔溃疡病抗性提供一种新选择。本发明的技术方案是诱导表达抗菌肽的表达框架，其特征在于：采用柑桔溃疡病病原菌高效诱导表达启动子调控天蚕素抗菌肽的表达。本发明还提供了还有所述表达框架的植物表达载体以及含有所述植物表达载体的宿主细胞。本发明还提供了增强柑桔溃疡病抗性的方法。本发明通过将溃疡病高效启动子调控下的抗菌肽基因mAATCB整合到柑桔基因组中,实现了抗菌肽基因在柑桔受溃疡病病原菌入侵时迅速高水平表达；从而增强了柑桔溃疡病抗性。
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公开(公告)号：CN113215190A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110617137.1
申请日：2021-06-03
申请人： 西南大学
IPC分类号： C12N15/82 , C12N15/113 , A01H5/00 , A01H6/78
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种基于CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术获得柑橘纯合突变体的方法。所述方法包括以下步骤：将柑橘上胚轴茎段与农杆菌共培养，随即对上胚轴茎段进行热处理，然后将上胚轴茎段转入添加1 mg/L BA、0.5 mg/L IAA和40 mg/L Km的MS培养基中进行诱导。该方法能够提高纯合突变体的基因编辑效率。
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公开(公告)号：CN106337059A
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201610816705.X
申请日：2016-09-12
申请人： 西南大学
CPC分类号： C12N15/8223 , C07K14/43586 , C07K2319/02 , C07K2319/04 , C12N15/8281
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种改良柑桔黄龙病抗性的方法。本发明要解决的技术问题是为提高柑桔对黄龙病的抗性，提供一种新选择。本发明的技术方案是一种改良柑桔黄龙病抗性的方法，具体如下：将韧皮部特异启动子调控下的抗菌肽基因整合到柑桔基因组中；所述的抗菌肽基因为抗菌肽基因PR1aCB,CB,或PR1aCBer，CB具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，R1aCB具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，PR1aCBer具有如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。本发明韧皮部特异启动子指导抗菌肽等抗性基因在韧皮部高效表达，进而增强柑桔黄龙病的抗性水平。
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公开(公告)号：CN116410988A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202310477920.1
申请日：2023-04-28
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了利用柑橘RUB2调控柑橘泛素化途径改良柑橘黄龙病抗性的方法，涉及植物基因工程技术领域，利用柑橘RUB2调控柑橘泛素化途径，影响植物防御相关基因的表达，从而增强柑橘对黄龙病的抗性；所述柑橘RUB2的核苷酸序列如SEQ ID No.1。通过构建柑橘RUB2植物超量表达载体，利用根癌农杆菌介导法转化柑橘上胚轴，同时利用发根农杆菌介导法转化柑橘茎段，获得超量表达柑橘RUB2转基因植株和柑橘RUB2转基因毛状根，实现了利用柑橘RUB2调控柑橘泛素化途径增强柑橘黄龙病抗性的效果。
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公开(公告)号：CN112725225B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202011587109.1
申请日：2020-12-29
申请人： 西南大学
摘要： 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种柑橘黄龙病病原菌的试管培养方法。所述培养方法，包括：柑橘黄龙病病原菌培养方法，其特征在于，包括：(1)柑橘黄龙病毒源准备；(2)毒源材料表面消毒处理；(3)试管砧木准备和嫁接接种；(4)增殖培养；所述增殖培养包括以下步骤：MS液体培养基配制，向培养基中添加多菌灵，分装到带滤纸桥的试管中，灭菌；随后采用试管嫁接法接种黄龙病病原菌，切取经消毒处理的毒源材料的腋芽，嫁接于柑橘试管砧木上；然后将嫁接苗放入滤纸桥中；再于24‑28℃暗室培养14～21d，待试管嫁接带菌芽的萌芽长至0.5‑1.0cm时，转入12‑16h的光周期下培养。本发明的方法重现性好；可使柑橘黄龙病病原菌短时间内增殖到高浓度水平。
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公开(公告)号：CN118901719A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202410950239.9
申请日：2024-07-16
申请人： 西南大学
摘要： 本发明公开了免疫诱导剂在防治柑橘溃疡病中的应用及施药方法，所述免疫诱导剂为非蛋白类氨基酸免疫诱导剂NHP，用于施药柑橘属植物从而提高柑橘属植物全身免疫抗性水平，提高柑橘属植物对溃疡病的广谱抗性。本发明通过喷施以及灌淋根部的方式向柑橘外源提供1～1.5mM NHP能显著引起系统性SAR反应，提高柑橘属植物的基础抗性，从而降低柑橘植株中Xcc的滴度，对溃疡病的多个地区生理小种有显著的广谱抗性，对植株和环境无害，对于防治柑橘溃疡病具有重大应用价值，大力促进免疫诱导剂在柑橘溃疡病中的应用与发展，并为柑橘溃疡病的相关抗病遗传育种奠定基础。
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公开(公告)号：CN113215190B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202110617137.1
申请日：2021-06-03
申请人： 西南大学
IPC分类号： C12N15/82 , C12N15/113 , A01H5/00 , A01H6/78
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种基于CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术获得柑橘纯合突变体的方法。所述方法包括以下步骤：将柑橘上胚轴茎段与农杆菌共培养，随即对上胚轴茎段进行热处理，然后将上胚轴茎段转入添加1 mg/L BA、0.5 mg/L IAA和40 mg/L Km的MS培养基中进行诱导。该方法能够提高纯合突变体的基因编辑效率。
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