一种RNA和DNA二代测序文库的构建方法及二代测序盒

    公开(公告)号:CN113684249B

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202110983590.4

    申请日:2021-08-25

    摘要: 本发明属于生物技术领域,其公开了一种RNA和DNA二代测序文库的构建方法及二代测序盒,该二代测序文库的构建方法包括步骤:对RNA核酸和DNA核酸进行一链合成,得到一链cDNA;对述一链cDNA进行二链合成,得到二链cDNA;对二链cDNA片段化、末端修复、磷酸化及加A处理后得到加A产物;将加A产物进行接头连接和第一次纯化处理,得到目标RNA片段和DNA片段并回收;对目标RNA片段和DNA片段进行PCR扩增反应,以构建并得到所述RNA和DNA二代测序文库。该方法构建二代测序文库,采用整体建库流程,工艺步骤简化,极大缩减了操作流程和实验时间,可最大程度减少核酸样本的损耗,同时,无需构建两种文库,可大大节约人力、试剂、时间等成本。

    一种基于高通量测序检测目标基因甲基化程度的引物组合物及其应用

    公开(公告)号:CN117778578B

    公开(公告)日:2024-10-15

    申请号:CN202311862466.8

    申请日:2023-12-29

    摘要: 本发明公开了一种基于高通量测序检测目标基因甲基化程度的引物组合物,并基于该引物组合物构建了检测体系,利用该检测体系针对待测样本的DNA模板能够进行一步法扩增建库,缩短了建库时间;并且通过一步法扩增得到的待测样本目标基因区域的基因文库具有优异的特异性,目标产物单一。利用该检测体系对待测样本的MGMT甲基化程度或TWIST1甲基化程度进行检测时,扩增得到的基因文库在凝胶电泳检测时除MGMT基因条带或TWIST1基因条带外不会出现其他条带,同时利用扩增得到的基因文库结合靶向二代测序和生物信息学进行甲基化程度分析时,检测准确性达到了100%。

    维持拷贝数的RNA分析方法
    74.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118755718A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202411005069.3

    申请日:2015-03-20

    发明人: P·默尔

    摘要: 本发明提供由产生模板RNA分子的扩增的核酸部分的方法,包含在获得模板RNA后,使第一寡核苷酸引物在模板RNA的预先选定的3'末端核酸区域退火,以模板特异性方式延伸第一寡核苷酸引物,由此获得第一延伸链,去除RNA模板,使一或多个另外的寡核苷酸引物与所述第一延伸链退火,以模板特异性方式延伸所述一或多个另外的寡核苷酸引物而不链置换与所述第一延伸链退火的多核苷酸,或使用破坏被置换的链的聚合酶,由此产生另外的延伸产物,分离和/或扩增所述另外的延伸产物的延伸产物,其包含与所述第一寡核苷酸引物互补的延伸的核酸部分;本发明还提供进行该方法的试剂盒。

    一种RNA直接测序的建库方法

    公开(公告)号:CN117210535B

    公开(公告)日:2024-10-08

    申请号:CN202310986099.6

    申请日:2023-08-07

    摘要: 本发明提供了一种RNA直接测序的建库方法,包括以下步骤:S0制备杂合双链:以待测序RNA序列为模板,通过反转录形成RNA/DNA杂合双链;S1制备接头复合物‑转座酶复合体:将非RNA多核苷酸、解旋酶和转座酶共同孵育,得到接头复合物‑转座酶复合体;S2制备测序文库:利用接头复合物‑转座酶复合体对RNA/DNA杂合双链进行随机剪切得到片段化杂合双链;之后转座酶脱落,得到接头复合物,接头复合物和片段化杂合双链连接,得到测序文库;S3:对步骤S2中的测序文库进行纳米孔测序。本发明实现对目标RNA多核苷酸的碱基序列进行测量的新方法,提高了RNA建库的连接效率,简化了RNA测序建库的流程。