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公开(公告)号：CN119220506A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411243968.7
申请日：2024-09-05
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/50 , A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/295 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种表达IBV S蛋白的基因VII型NDV重组病毒及其制备方法和应用，该方法包括：在pBR322‑DHN3mF病毒基因组的P基因和M基因之间插入经修饰的S基因，得到重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2、rDHN3mF‑H120‑S6P、rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS中的任一种。本发明通过将适应细胞株的IBV‑P65的S2区域与QX型IBV MH20的S2区域进行替换，拯救出重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2；通过将H120‑S蛋白上的第692位、第768位、第772位、第815位、第862位、第863位疏水性氨基酸均突变为脯氨酸拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P；在突变6个疏水性氨基酸为脯氨酸的基础上，将第533位‑第537位的氨基酸依次突变为甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、丝氨酸后拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS。将拯救出的三株重组病毒分别感染BHK‑21细胞，经WB验证能检测到S蛋白以及NDV全蛋白的高效表达。
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公开(公告)号：CN118496325A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410623114.5
申请日：2024-05-20
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号：CN111074000B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN201911127987.2
申请日：2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360‑505R基因缺失株的三重荧光定量PCR检测材料及试剂盒，检测材料包括引物和探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～9所示。本发明利用三组引物探针进行三重荧光定量PCR扩增非洲猪瘟病毒P72、CD2V和360‑505R基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；可以辨别毒株是否存在基因的缺失，且具有良好的特异性及灵敏度。对于传统qPCR，每次仅扩增一个基因来说，本发明每次PCR反应同时扩增3个基因，成本降低了约2/3。
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公开(公告)号：CN116286883A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310088909.6
申请日：2023-02-06
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C12N7/01 , A61K39/245 , A61K39/12 , A61P31/22 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种突变鸭坦布苏病毒株及其构建方法、应用。本发明通过特定的引物组合，构建了定点突变E基因的突变质粒EDII+III E89G V312A，进而构建了突变鸭坦布苏病毒株rDTMUV EDII+III E89G V312A。该毒株可为后续抗鸭坦布苏病毒的药物、疫苗的制备提供了良好的平台。
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公开(公告)号：CN111019966B
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN201911367696.0
申请日：2019-12-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有较髙棒状杆菌复制能力的表达质粒，所述表达质粒的第1786位点的核苷酸为A或G，其余位点与质粒pXMJ19相同；所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:14所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得2株比pXMJ19质粒拷贝能力高6～8.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786A和pXMJ19C1786G质粒，pXMJ19C1786A拷贝数约为115，pXMJ19C1786G质粒的拷贝数约为170。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114807061A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202111582307.3
申请日：2021-12-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株的构建方法，其包括：(1)获取IBV‑Beaudette病毒基因组全长cDNA重组质粒；(2)构建A21963G沉默突变和G22170C沉默突变的IBV‑Beaudette病毒全长cDNA重组质粒；(3)转染细胞，拯救获得的病毒即为鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株。相应的，本发明还公开了一种鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株及疫苗。实施本发明，可得到具有Vero细胞适应性的A21963G和G22170C双位点沉默点突变的基因标记毒株，为IBV基因标记疫苗的研制提供参考。
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公开(公告)号：CN114276420A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111261717.8
申请日：2021-10-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种可溶性VP2抗原，所述VP2抗原通过将VP2基因克隆到pColldⅢ载体上构成表达质粒pColldⅢ‑VP2，转化进入BL21(DE3)感受态细胞(pTf16分子伴侣)，得到基因工程菌种Escherichia coli pTf16/BL21/pColldⅢ‑VP2，提取得到可溶性VP2抗原；所述VP2基因的核苷酸序列如核苷酸序列NO.1所示。该抗原具有优异的免疫保护率，该效果和蛋白本身的可溶性以及空间结构密切相关；同时，本发明还提供了一种疫苗、抗原的制备方法。
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公开(公告)号：CN113817764A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111261808.1
申请日：2021-10-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N15/34 , C07K14/075 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白的制备及应用。所述制备方法包括：以FAdV‑4毒株DNA为模板，设计引物扩增出fiber2序列，测序正确后，将fiber2序列进行密码子优化，然后将其构建到pMal‑c2X载体上，得到重组质粒pMal‑c2X‑FAV4‑fiber2；最后转化大肠杆菌BL21进行诱导表达，得到I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白。本发明方法只需要在37℃诱导3h即可，时间短，操作简单，其表达的目的蛋白是有利于纯化的可溶性蛋白，只需要一步镍柱层析，便可获得大量目的蛋白，而且成本低，易放大。
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公开(公告)号：CN108531462B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201810359474.3
申请日：2018-04-20
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种禽腺病毒精纯化的方法，包括步骤如下：1.取在细胞瓶中培养的鸡胚细胞，进行病毒接种，并加入DMEM培养基，将细胞瓶置于37℃转瓶培养箱中继续培养，接毒后，收获瓶内所有的病毒细胞培养液，经离心后收集上清液；2.使用超滤膜包对步骤1所获得的上清液进行10‑40倍浓缩；3.通过G200分子筛层析填料对步骤2所得液体进行分子筛层析；4.使用超滤膜包对步骤3回收的病毒液进行3‑10倍浓缩；5.使用阴离子交换层柱对步骤4所得病毒液进行层析纯化；6.使用超滤膜包对步骤5回收的病毒液进行4‑10倍浓缩，得到纯化后的禽腺病毒。本发明的纯化方法可在保持病毒具有良好活性的前提下对病毒液中的杂蛋白进行高效纯化，方便病毒的后续生物学应用。
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公开(公告)号：CN110885905A
公开(公告)日：2020-03-17
申请号：CN201911101455.1
申请日：2019-11-12
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株LAMP检测引物及其试剂盒，所述LAMP检测引物包含两套引物，分别针对非洲猪瘟病毒野毒株保守的衣壳蛋白基因P72(B646L)序列和非洲猪瘟MGF360-505R基因缺失株第27942-35500位缺失区两侧，能特异性的检测出该非洲猪瘟MGF360-505R基因缺失株。本方法采用恒温反应的检测手段，仅需加热即可实现整个反应，检测结果可以直接目测，适合现场检测；所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快，可以作为有效鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的基层检测手段。
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