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公开(公告)号:CN118910329A
公开(公告)日:2024-11-08
申请号:CN202411075408.5
申请日:2024-08-07
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要: 本申请属于生物领域,公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的体系,体系中包含有分别针对禽腺病毒FAdV‑4的Fiber2基因和Hexon基因设计得到的第一RPA引物对和第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA‑Fiber2、crRNA‑Hexon、ssDNA‑reporter;此外,本申请还公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的试剂盒,包含有上述体系外,还包含有Buffer、RNase‑free H2O、Rnase Inhibitor以及DNA质粒。
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公开(公告)号:CN118356484A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410472407.8
申请日:2024-04-19
申请人: 华南农业大学 , 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号: A61K39/255 , C12N7/00 , C12N5/077 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要: 本申请属于生物制药技术领域,公开了一种MD疫苗的制备方法,该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养,得到鸡胚成纤维细胞;再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞,随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存,其中冻存时使用程序降温仪冻存,所述程序降温仪的程序为:将箱体预冻至4℃,放入安瓿瓶预冷30min,以0.8~1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃;再以8~12℃/min的速率将苗温降至‑100℃,移入液氮保存,本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法,该方法具有制备速度快,疫苗数量大等优点,更加适合MD疫苗的大规模制备,此外,本申请还公开了一种MD疫苗。
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公开(公告)号:CN118048322A
公开(公告)日:2024-05-17
申请号:CN202410256623.9
申请日:2024-03-06
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
摘要: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag,所述鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag是通过先将野生型鸡传染性支气管炎病毒毒株IBV‑p65分段扩增,得到1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、5E片段后,将Flag标签插入5E片段,再将1A片段、2B片段、3C片段、4D片段、插有Flag标签的5E片段体外拼接得到插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA,最后将插有Flag标签的鸡传染性支气管炎重组病毒的全长cDNA经体外转录、电转得到的,此外,本申请还公开了一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的构建方法及一种鸡传染性支气管炎重组病毒rIBV‑Flag的应用。
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公开(公告)号:CN118496325A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410623114.5
申请日:2024-05-20
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC分类号: C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
摘要: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中,抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗,该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点,有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号:CN116286883A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310088909.6
申请日:2023-02-06
申请人: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC分类号: C12N15/40 , C12N7/01 , A61K39/245 , A61K39/12 , A61P31/22 , A61P31/14 , G01N33/569
摘要: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了一种突变鸭坦布苏病毒株及其构建方法、应用。本发明通过特定的引物组合,构建了定点突变E基因的突变质粒EDII+III E89G V312A,进而构建了突变鸭坦布苏病毒株rDTMUV EDII+III E89G V312A。该毒株可为后续抗鸭坦布苏病毒的药物、疫苗的制备提供了良好的平台。
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公开(公告)号:CN118834294A
公开(公告)日:2024-10-25
申请号:CN202411075423.X
申请日:2024-08-07
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
摘要: 本发明属于生物领域,公开了一种鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备方法,将经过优化的DTMUV NS1基因与载体连接构成重组质粒;所述DTMUV NS1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;将重组质粒转化进入BL21(DE3)感受态细胞,并收获DTMUV NS1蛋白;将DTMUV NS1蛋白纯化并免疫小鼠,采集小鼠脾细胞;将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0混合培养,筛选分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞;将杂交瘤细胞注射进入小鼠体内,获得NS1蛋白单克隆抗体。该方法制备得到的NS1蛋白单克隆抗体效价较高,可达1:512,000,并且可以用于病毒诊断,如WB,IFA,具有精准高效的特点,日后可以应用于试剂盒检测,药物制备的方面,为坦布苏病毒的机制研究,疾病诊断及防控奠定基础。同时,本发明还提供了基于该方法制备得到的NS1蛋白单克隆抗体的应用和检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN117925542A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202410082281.3
申请日:2024-01-19
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号: C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒,所述表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒通过引物组对载有S1蛋白基因的质粒Fused pFastBac1‑C‑S1EGFP的扩增,得到携带同源臂的S1蛋白基因,再将携带同源臂的S1蛋白基因插入穿梭质粒,得到载有携带同源臂的S1蛋白基因的重组穿梭质粒,随后将载有携带同源臂的S1蛋白基因的重组穿梭质粒与腺病毒同源重组、转染,得到表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒,此外,本申请还公开了一种表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒的制备方法以及表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒的应用。
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公开(公告)号:CN117683941A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311710638.X
申请日:2023-12-13
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
摘要: 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种IBDV实时荧光定量PCR检测体系,包含引物组和探针,所述引物组包括IBDV‑VP4‑F和IBDV‑VP4‑R,所述探针为Taqman1探针,本申请通过对大量的引物组和探针的不断筛选,最终得到了一种具有高灵敏度、高特异性的引物组和探针,并使用该引物组和探针建立了一种具有高灵敏度、高特异性的IBDV实时荧光定量PCR检测体系,此外,本申请还公开了一种IBDV实时荧光定量PCR检测体系的构建方法。
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公开(公告)号:CN117487962A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311225243.0
申请日:2023-09-21
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要: 本发明涉及病毒检测技术生产技术领域,公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAd V‑11三重荧光定量PCR检测的引物组和探针,本申请通过软件Primer Premier5设计得到多组针对FAdV‑4、FAdV‑8b、FAdV‑11的引物和探针,并且通过反复多次的筛选,得到了三组兼具良好的特异性、灵敏度且又不产生相互干扰的引物及探针,并且根据矩阵法,确定FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的最佳反应体系和反应条件,得到了一种具有良好特异性、灵敏度的FAdV‑4/FAd V‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR检测试剂盒,同时,该试剂盒由于各引物和探针之间不会相互干扰,极大程度地降低了错检、漏检等现象的发生,此外,本申请还公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的构建方法。
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公开(公告)号:CN117430675A
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202311271956.0
申请日:2023-09-27
申请人: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC分类号: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
摘要: 本发明公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒的抗原及其制备方法、试剂盒,涉及生物工程技术领域。本发明利用能够稳定表达重组鸡传染性支气管炎病毒核蛋白(N蛋白)的重组菌,在特定条件下诱导表达重组N蛋白并经亲和层析纯化。用纯化出的重组蛋白作为包被抗原,建立了一种简便、特异的间接ELISA方法。本发明还为检测鸡传染性支气管炎病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒。
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