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公开(公告)号:CN114875039B
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202210502791.2
申请日:2022-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基因CmBZS1在创制托桂花型菊花中的应用,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1,该基因CmBZS1的定向干扰序列amiR‑CmBZS1,其核苷酸序列为SEQ ID NO.16。本发明首次提出基因CmBZS1在改变菊花花型中的应用,尤其是在创制托桂花型菊花中的应用,还公开了一种创制托桂花型菊花的方法。首次设计得到的定向干扰序列amiR‑CmBZS1可以改变菊花花瓣形状,促进菊花的管状花花瓣伸长,形成花瓣为桂瓣型的菊花,在定向培育托桂型菊花中具有重要意义,大幅提高了桂瓣型菊花育种效率、缩短了培育时间,在开发分子标记、改良菊花花型、完善菊花花型转基因育种技术方面有较大的应用价值。
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公开(公告)号:CN114875039A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210502791.2
申请日:2022-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基因CmBZS1在创制托桂花型菊花中的应用,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1,该基因CmBZS1的定向干扰序列amiR‑CmBZS1,其核苷酸序列为SEQ ID NO.16。本发明首次提出基因CmBZS1在改变菊花花型中的应用,尤其是在创制托桂花型菊花中的应用,还公开了一种创制托桂花型菊花的方法。首次设计得到的定向干扰序列amiR‑CmBZS1可以改变菊花花瓣形状,促进菊花的管状花花瓣伸长,形成花瓣为桂瓣型的菊花,在定向培育托桂型菊花中具有重要意义,大幅提高了桂瓣型菊花育种效率、缩短了培育时间,在开发分子标记、改良菊花花型、完善菊花花型转基因育种技术方面有较大的应用价值。
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公开(公告)号:CN112301117B
公开(公告)日:2022-06-03
申请号:CN202011140853.7
申请日:2020-10-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/10 , G16B5/00 , G16B25/20
Abstract: 本发明公开了一种基于高通量测序构建目标蛋白互作网络的方法,该方法将BD‑诱饵与猎物文库共转化Y2H酵母菌株,在YPDplus培养基中30℃培养4h后,弃上清,加入1mL无菌水基悬浮,取100μL悬浮菌液再加入10ml SD/‑Leu/‑Trp/‑His/‑Ade液体培养基中震荡培养24h、72h和80h后分别取样,以这些菌液为模版进行PCR扩增,进行琼脂糖凝胶电泳检测菌液筛选程度,将产物回收之后进行高通量测序、de novo组装后进行基因丰度与差异分析,取差异基因即为该文库中与目的基因互作的蛋白编码基因,从而初步构建目标蛋白的互作网络。该方法同时适用于无参考基因物种目标蛋白互作网络的构建。该方法简化了酵母双杂交筛库的步骤,不受单次筛选克隆数限制,找到单个文库中目标蛋白的所有互作蛋白。
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公开(公告)号:CN113957166A
公开(公告)日:2022-01-21
申请号:CN202010700190.3
申请日:2020-07-20
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6841 , G16B20/20 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA(rDNA)寡核苷酸混合探针套,并公开了一种基于菊花近缘种属植物参考基因组的核糖体DNA(rDNA)寡核苷酸混合探针套的开发方法。具体为:利用已下载的拟南芥rDNA数据,对已有的菊花脑、甘野菊、黄蒿和向日葵进行本地Blast比对,获得5S rDNA和45S rDNA(5.8S、18S和28S)共有序列;再利用该数据在Oligo7软件开发5S rDNA和45S rDNA探针;合成的5S rDNA和45SrDNA寡核苷酸探针套分别包含2条和10条寡核苷酸探针。本发明开发的寡核苷酸探针开发方法和探针套,可有效的用于菊属植物染色体分析核型图谱的构建,通过组配好的寡核苷酸探针套通过FISH分析进行检测,避免克隆重组、标记探针的繁琐程序和异源片段,大大简化了FISH分析的程序,提高了实验效率。
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公开(公告)号:CN108411026B
公开(公告)日:2021-10-01
申请号:CN201810483506.0
申请日:2018-05-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开一种菊花托桂花型分子标记辅助选择方法,所述的分子标记为SRAP分子标记或/和SCAR标记,本发明以托桂型切花小菊品种‘南农雪峰’为母本和非托桂型品种‘QX096’为父本杂交获得的80株F1分离群体为试材。用SRAP分子标记来筛选与控制托桂花型基因相连锁的特异位点。其中SRAP分子标记引物组合M11E1在托桂型菊花材料中扩增得到一条272bp的特异片段,通过设计特异SCAR分子标记引物在托桂材料中扩增出单一的168bp的条带,进一步在‘南农雪峰’בQX096’和‘南农雪峰’ב蒙白’两个群体中验证,准确率分别高达92.5%和84.3%。说明上述标记已成功转化成SCAR分子标记。该发明提高了托桂花型的选择效率,加快托桂花型菊花新品种的选育进程。
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公开(公告)号:CN109856330B
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN201910085871.0
申请日:2019-01-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明公开了一种通过人工调控提高菊花根尖有丝分裂相的方法。利用人工调控的方法,即通过实验验证的合适的暗处理和光照(强)时间来对菊花组培苗进行处理,不仅获得了较为干净的染色体制片,还有效提高细胞有丝分裂中期分裂相数量(见图1、图2)。本发明利用的原材料易得,简单易行,成本低廉,可操作性强,实用性突出;通过暗处理和光照处理,提高在菊花染色体制片观察时其有丝分裂中期相的数量,且获得干净的根尖有丝分裂中期染色体图像,可用于菊花有丝分裂染色体的鉴定,同时也有助于获得用于核型分析、FISH分析等细胞学研究。而这种获得清晰的菊花根尖有丝分裂中期的染色体图像的方法可推广至菊属其他植物的细胞学研究中。
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公开(公告)号:CN111635902A
公开(公告)日:2020-09-08
申请号:CN202010482826.1
申请日:2020-05-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/14 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物基因工程育种领域,涉及一种通过人工干扰提高菊花黑斑病抗性的方法,包括以下步骤:构建pMDC32-amiCmKIC植物表达载体;采用农杆菌介导法将其转入菊花中,进行培养获得抗性植株。对转化植株进行PCR、定量RT-PCR检测证实amiRNA在转录水平上影响靶基因CmKIC的表达。对转基因植株进行抗病性检测,发现与野生型植株相比,转基因植株抗病性有很大提高。本发明通过人工干扰CmKIC基因提高菊花的黑斑病抗性,为利用基因工程技术选育菊花抗病品种提供新颖而实用的方法,将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号:CN109856330A
公开(公告)日:2019-06-07
申请号:CN201910085871.0
申请日:2019-01-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明公开了一种通过人工调控提高菊花根尖有丝分裂相的方法。利用人工调控的方法,即通过实验验证的合适的暗处理和光照(强)时间来对菊花组培苗进行处理,不仅获得了较为干净的染色体制片,还有效提高细胞有丝分裂中期分裂相数量(见图1、图2)。本发明利用的原材料易得,简单易行,成本低廉,可操作性强,实用性突出;通过暗处理和光照处理,提高在菊花染色体制片观察时其有丝分裂中期相的数量,且获得干净的根尖有丝分裂中期染色体图像,可用于菊花有丝分裂染色体的鉴定,同时也有助于获得用于核型分析、FISH分析等细胞学研究。而这种获得清晰的菊花根尖有丝分裂中期的染色体图像的方法可推广至菊属其他植物的细胞学研究中。
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公开(公告)号:CN106258936B
公开(公告)日:2018-08-28
申请号:CN201610659849.9
申请日:2016-08-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于杂交育种领域,涉及一种早花、高产型茶、药兼用菊花品种的杂交选育方法。本发明以早花茶用菊品种‘七月白’为母本,分别以高产的‘杭白菊’和高药效成分的‘滁菊’为父本,配置两个杂交组合,进行人工杂交育种,当年收种,第二年春季播种并分苗定植,开花后以花型、花径、花期等为依据,初步筛选优良单株,第三年再扩繁形成株系后,进一步筛选比较花径、花期、单株与单位面积鲜花、干花产量等,筛选优良株系。通过感官品质鉴定,化学成分测定,再采用模糊综合评价法进行分析评价,以筛选早花、高产型茶、药兼用菊花新品系,本发明能够改善茶用菊花期较晚的现状,提高茶用菊产量,满足市场需求,这将对茶用菊的市场开发具有重要意义。
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公开(公告)号:CN104195249B
公开(公告)日:2018-08-28
申请号:CN201410452747.0
申请日:2014-09-05
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供一种快速筛选多倍体植物目的基因克隆产物的引物、方法及二者在菊花上的应用以及该引物在试剂盒上的应用。快速筛选目的基因克隆产物的方法包括:(1)引物设计(2)基因克隆扩增(3)检测引物筛选基因克隆产物,确定克隆产物对应的基因是否为目的基因。本发明解决了现有技术中,筛选菊花等多倍体植物目的基因克隆产物过程复杂、效率低下的问题。通过本发明提供的检测引物,每增加1bp长度,筛选目的基因的准确性即提高4倍。例如检测引物长度为18bp,则在原基础上筛选度提高了418倍。检测引物为复杂基因组基因的分子克隆提供思路,大大提高了基因克隆的效率。
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