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公开(公告)号：CN111424027A
公开(公告)日：2020-07-17
申请号：CN202010245176.9
申请日：2020-03-31
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种定点突变改造的褐藻胶裂解酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明的褐藻胶裂解酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的褐藻胶裂解酶的第212位谷氨酸替换为组氨酸和/或第222位精氨酸替换为赖氨酸。本发明通过分子对接模拟确定褐藻胶裂解酶活性中心氨基酸并进行定点饱和突变改变蛋白质分子活性位点附近氨基酸残基，提高褐藻胶裂解酶催化效率，进一步提高褐藻胶裂解酶产量。本发明构建的褐藻胶裂解酶分泌能力增强的重组大肠杆菌可将褐藻胶裂解酶酶活较出发菌株提高2.83倍。改造后的基因工程菌产酶能力显著提高，摇瓶发酵生产褐藻胶裂解酶酶活达到15000U/mL，更适合工业应用，可降低生产成本，提高生产效率。
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公开(公告)号：CN111394331A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010372970.X
申请日：2020-05-06
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种谷氨酰胺转氨酶及其编码基因、表达载体及重组菌，属于基因工程技术领域。本发明通过密码子优化技术进行基因改造，以毕赤酵母为宿主，选择分泌型表达载体，转入改造后与枯草芽孢杆菌来源基因同源性为70.6％的谷氨酰胺转氨酶基因，直接分泌表达目的蛋白，得到高拷贝数的重组工程菌，该重组工程菌最适pH偏好性向酸性发生偏移，由pH7变为6，在50℃下水浴30min后相对酶活由71.4％增加为89.7％，这促进了谷氨酰胺转氨酶未来的工业化生产和在各领域的广泛应用。
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公开(公告)号：CN111304374A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010305096.8
申请日：2020-04-17
申请人： 清华大学无锡应用技术研究院 , 江南大学
摘要： 本发明提供一种医药级氨基葡萄糖的的制备方法及其过程质量分析控制系统，其基于QbD理念，在氨基葡萄糖生产全程开展上游综合除杂、过程优化减副、下游强化分离的杂质控制系统，大幅度提升工艺操控弹性，增强产品质量的过程可控性。本发明通过提供医药级氨基葡萄糖的制备方法并在生产流程中的关键点设置了PAT检测系统，根据在线检测结果，对生产工艺如甲壳素的水解时间、水解温度、酸的浓度、酸用量以及后续的精制脱色时间、结晶浓度等参数进行全程控制，从原料处理、过程减副、终端强化杂质的脱除等多个环节入手，形成综合的、系统的质控体系，实现过程的实时和优化控制，持续改进、全面提升氨基葡萄糖生产的技术水平。
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公开(公告)号：CN108753642A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810441314.3
申请日：2018-05-10
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一株产褐藻胶裂解酶的约氏黄杆菌，属于生物技术领域。本发明从土壤及河水样品中分离出约氏黄杆菌(Flavobacterium johnsoniae)WX‑11，即约氏黄杆菌CGMCC No.14444，该菌株营养要求简单，发酵时间短，应用于褐藻胶裂解酶生产中可显著缩短生产周期，降低生产成本。本发明还公开了利用此菌种制备褐藻胶裂解酶及对含有褐藻酸盐的高粘原料的降粘处理。本发明提供的约氏黄杆菌WX‑11所产的褐藻胶裂解酶可降解海藻酸钠，生成具有生物活性的褐藻寡糖，可广泛应用于农业、食品、饲料添加、医药及海藻加工等领域。
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公开(公告)号：CN107365726A
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201710666935.7
申请日：2017-09-28
申请人： 江南大学
摘要： 本发明的目的是提供一种结合ARTP诱变和OPC-TCA微量酶反应法高通量筛选腈类底物耐受性提升的产腈水解酶恶臭假单胞菌突变体的方法，属于工业生物技术领域。经OPC-TCA微量酶反应初筛、摇瓶复筛及传代最终获得一株突变体mut-D3，在较高底物终浓度为125mM情况下，该菌株的底物耐受性显著提高，同时突变体的腈水解酶酶活是野生菌的1.51倍，经20次传代后酶活仍保持稳定。该突变株能高效转化3-氰基吡啶合成烟酸，烟酸累积产量相比野生菌明显提高。本发明完全符合工业化腈水解酶产生菌株的诱变和筛选需要，并可应用于烟酸的生物合成，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN106086103A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610542267.2
申请日：2016-07-11
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12P17/12 , C12N11/00 , A23K20/174 , C07D213/80 , C07D213/803 , C12R1/125
CPC分类号： Y02P20/588 , C12P17/12 , C07D213/80 , C07D213/803 , C12N11/00
摘要： 本发明公开了一种利用多级膜分离法和喷雾干燥技术从生物转化液中分离提取饲料级烟酸的方法，包括以固定化细胞为催化剂，以3‑氰基吡啶为底物，进行生物转化获得含烟酸的反应液，采用100nm‑10μm的微滤膜、截留分子量为1000‑3000Da的超滤膜、200‑300Da的纳滤膜等多级膜分离技术去除转化液中颗粒物、可溶性杂蛋白、色素等杂质，同时使转化液浓缩，在喷雾干燥机进行干燥，进口温度为210‑240℃，出口温度为60‑100℃，经过喷雾干燥即获得烟酸产品，烟酸提取总收率可达到85％以上。该方法操作简便、成本低廉、产品收率高、污染废水排量少，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105177089A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510482649.6
申请日：2015-08-10
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种利用木霉属菌种二次发酵提升菌丝体废渣中几丁质含量的方法。采用生长旺盛、代谢能力强、产纤维素酶能力突出的木霉菌种，以工业柠檬酸发酵中废弃玉米菌丝体废渣为基本培养基，并在其中添加适量硫酸铵等氮源，进行二次固态发酵，提升菌丝体废渣中的几丁质含量，本发明技术方案不仅为大宗发酵产品柠檬酸发酵菌丝体废渣的资源化利用提供了一条新途径，而且为重要工业原料几丁质的生物法生产提供了新的思路。该方法所得几丁质产品生产成本低、产量高、环境友好，而且使柠檬酸发酵废弃残渣得以有效利用，提高了资源综合利用价值，减少了环境污染，有利于环境保护。
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公开(公告)号：CN102936590B
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201210433096.1
申请日：2012-11-05
申请人： 江南大学 , 江西省德兴市百勤异VC钠有限公司
摘要： 本发明涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）XY4（编号CGMCC 3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQIDNO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQIDNO:2。本发明还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coli Rosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102936590A
公开(公告)日：2013-02-20
申请号：CN201210433096.1
申请日：2012-11-05
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）XY4（编号CGMCC No.3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQ ID NO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQ ID NO:2。本发明还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coliRosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN118581053A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410635546.8
申请日：2024-05-22
申请人： 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明公开了一种酶活性提高的谷胱甘肽双功能合成酶突变体及应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体将136位亮氨酸突变为赖氨酸，并将498位缬氨酸突变为半胱氨酸，得到了酶活提高的突变体L136K/V498C，其比酶活较亲本提高了86.80％，在37℃半衰期为134min，其相对热稳定性较亲本提高了40.95％，说明该突变体的酶活和热稳定性得到大大提升；所述突变体L136K/V498C全细胞催化合成谷胱甘肽产量为24.17mM。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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