一种用于培育抗TGEV感染的猪品种的成套系统及其应用

    公开(公告)号:CN116445454A

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202310584888.7

    申请日:2023-05-23

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明公开了一种用于培育抗猪传染性胃肠炎病毒感染的猪品种的成套系统及其应用。所述系统包括基因编辑蛋白、pAPN‑sgRNA‑1、pAPN‑sgRNA‑2和供体DNA,基因编辑蛋白可对pAPN基因的两个靶位点进行有效酶切,通过将位于两个靶位点之间的待定点修饰片段替换为供体DNA,可实现将编码猪pAPN蛋白第737位色基酸的密码子突变为编码丙氨酸的密码子,进而实现将猪pAPN蛋白第737位氨基酸由色氨酸到丙氨酸的精准突变。本发明系统能够避免破坏或改变pAPN蛋白其余氨基酸的正常表达,因此在抵抗TGEV感染的基础上,最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能,并且具有适用范围广、基因编辑效率高等优点。

    pAPN突变体和用于pAPN基因定点修饰的系统及应用

    公开(公告)号:CN116948979B

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202311010685.3

    申请日:2023-08-11

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明公开了pAPN突变体和用于pAPN基因定点修饰的系统及应用。本发明提供了使pAPN蛋白第727位氨基酸残基发生突变的物质在如下任一中的应用:1)构建非疾病和诊断治疗目的的pAPN基因定点修饰的细胞系;2)制备抗猪传染性胃肠炎病毒的细胞等;本发明提供的用于pAPN基因定点修饰的系统能够对pAPN基因的两个靶位点进行有效酶切,实现pAPN第727位氨基酸的精准突变。在精确修饰pAPN基因的同时,能够避免破坏或改变pAPN的其余氨基酸的正常表达,因此在抵抗TGEV感染的基础上,最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能,并且具有适用范围广、基因编辑效率高等优点。

    pAPN突变体和用于pAPN基因定点修饰的系统及应用

    公开(公告)号:CN116948979A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202311010685.3

    申请日:2023-08-11

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明公开了pAPN突变体和用于pAPN基因定点修饰的系统及应用。本发明提供了使pAPN蛋白第727位氨基酸残基发生突变的物质在如下任一中的应用:1)构建非疾病和诊断治疗目的的pAPN基因定点修饰的细胞系;2)制备抗猪传染性胃肠炎病毒的细胞等;本发明提供的用于pAPN基因定点修饰的系统能够对pAPN基因的两个靶位点进行有效酶切,实现pAPN第727位氨基酸的精准突变。在精确修饰pAPN基因的同时,能够避免破坏或改变pAPN的其余氨基酸的正常表达,因此在抵抗TGEV感染的基础上,最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能,并且具有适用范围广、基因编辑效率高等优点。

    一种同时敲除CD163、pAPN、MSTN基因抗病和品质改良猪培育方法

    公开(公告)号:CN116855539B

    公开(公告)日:2024-06-04

    申请号:CN202310881137.1

    申请日:2023-07-18

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明提供了一种同时敲除CD163、pAPN、MSTN基因抗病和品质改良猪培育方法,属于动物育种技术领域。本发明通过基因编辑技术对猪CD163、pAPN和MSTN基因定点敲除,鉴于MSTN基因编辑后的引进商业猪种后代易出现后肢无力的畸形表型,将MSTN基因编辑引进商业猪种和MSTN基因编辑地方猪进行杂交,获得的MSTN基因编辑二元杂交猪突出廋肉型商品猪种和脂肪型地方猪种的品种特性,并保留MSTN基因编辑对猪种廋肉率和肉质改良的优势表型,将其与CD163和pAPN双基因编辑猪杂交,实现3个基因位点快速聚集。本发明成功育成抗蓝耳病、传染性胃肠炎、猪德尔塔冠状病毒病,并且瘦肉率高的优质猪新品系。

    一种用于培育抗TGEV感染的猪品种的成套系统及其应用

    公开(公告)号:CN116445454B

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN202310584888.7

    申请日:2023-05-23

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明公开了一种用于培育抗猪传染性胃肠炎病毒感染的猪品种的成套系统及其应用。所述系统包括基因编辑蛋白、pAPN‑sgRNA‑1、pAPN‑sgRNA‑2和供体DNA,基因编辑蛋白可对pAPN基因的两个靶位点进行有效酶切,通过将位于两个靶位点之间的待定点修饰片段替换为供体DNA,可实现将编码猪pAPN蛋白第737位色基酸的密码子突变为编码丙氨酸的密码子,进而实现将猪pAPN蛋白第737位氨基酸由色氨酸到丙氨酸的精准突变。本发明系统能够避免破坏或改变pAPN蛋白其余氨基酸的正常表达,因此在抵抗TGEV感染的基础上,最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能,并且具有适用范围广、基因编辑效率高等优点。

    一种同时敲除CD163、pAPN、MSTN基因抗病和品质改良猪培育方法

    公开(公告)号:CN116855539A

    公开(公告)日:2023-10-10

    申请号:CN202310881137.1

    申请日:2023-07-18

    发明人: 李奎 牟玉莲 黄雷

    摘要: 本发明提供了一种同时敲除CD163、pAPN、MSTN基因抗病和品质改良猪培育方法,属于动物育种技术领域。本发明通过基因编辑技术对猪CD163、pAPN和MSTN基因定点敲除,鉴于MSTN基因编辑后的引进商业猪种后代易出现后肢无力的畸形表型,将MSTN基因编辑引进商业猪种和MSTN基因编辑地方猪进行杂交,获得的MSTN基因编辑二元杂交猪突出廋肉型商品猪种和脂肪型地方猪种的品种特性,并保留MSTN基因编辑对猪种廋肉率和肉质改良的优势表型,将其与CD163和pAPN双基因编辑猪杂交,实现3个基因位点快速聚集。本发明成功育成抗蓝耳病、传染性胃肠炎、猪德尔塔冠状病毒病,并且瘦肉率高的优质猪新品系。