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公开(公告)号：CN114480525B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202210011841.7
申请日：2022-01-06
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司 , 浙江新银象生物工程有限公司
IPC分类号： C12P17/18 , C12N1/21 , C07D495/04 , C12R1/38
摘要： 本发明涉及一种提高D‑生物素产量的生产方法，属于生物技术领域。本发明公开了一种提高D‑生物素产量的生产方法，该方法是采用易变假单胞菌(Pseudomonas mutabilis)基因工程菌，以葡萄糖和甘油为复合碳源，并采用两阶段或三阶段控温策略，结合乙醇补料工艺进行D‑生物素的快速发酵生产，较原始工艺产量提高了21％‑170％，周期缩短了13％‑28％。本发明提供了一种简便、安全、高效的D‑生物素发酵生产方法，改变了已有生产工艺步骤，显著提高了D‑生物素的生产强度，不仅缩短了发酵周期，节约了成本，而且减少了发酵废液和废气的排放，减轻环境污染，另外，工艺简单易放大，易于实现工业化生产。
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公开(公告)号：CN112176010B
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN201910585879.3
申请日：2019-07-01
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种促进生物素合成的方法，促进生物素合成的重组细胞和基因工程菌，该方法通过引入枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)来源的编码庚二酸辅酶A合成酶基因bioW和能够裂解长链脂肪酰基‑ACP的P450氧化酶基因bioI来强化生物素前体庚二酸硫酯的供应，促进下游生物素合成基因bioAFDB对生物素的合成。通过本发明，获得的工程菌生物素合成能力得到了极大的提升，在添加少量庚二酸的情况下，上罐分批发酵产生了80mg/L生物素，其产量是野生型易变假单胞菌的8000倍。
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公开(公告)号：CN110938020B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201911022257.6
申请日：2019-10-25
申请人： 浙江圣达生物研究院有限公司 , 浙江圣达生物药业股份有限公司
IPC分类号： C07C277/08 , C07C279/14
摘要： 本发明提供一种月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐的制备工艺，步骤如下：（1）L‑精氨酸盐酸盐溶于乙醇，制备精氨酸乙酯盐酸盐；（2）月桂酸溶于乙酸乙酯中，加入羰基二咪唑进行反应；（3）加入三乙胺和精氨酸乙酯盐酸盐，酰胺化得到目标溶液；（4）水洗处理后，降温结晶析出产品。本发明采用羰基二咪唑缩合剂来进行第二步酰胺化反应，避免了月桂酰氯的使用，并且条件温和，操作简单，绿色环保。该制备工艺收率达到91%及以上和产品纯度达到98%及以上。
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公开(公告)号：CN112175983A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201910591872.2
申请日：2019-07-01
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种促进生物素合成的方法、促进生物素合成的重组细胞和基因工程菌，该方法将枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)生物素合成操纵子bioWAFDBI中各个生物素合成基因bioW、bioA、bioF、bioD、bioB和bioI单独克隆并重新进行排列组合，其中，基因bioF、bioA、bioD和bioB可以来自其他含有相应基因的微生物。通过强启动子过表达上述重排的生物素合成基因簇，包含这些顺序的载体能够转化到其他微生物中，尤其是易变假单胞菌。通过本发明，获得的工程菌生物素合成能力得到了极大的提升，在添加庚二酸的情况下，上罐补料分批发酵产生了272mg/L生物素，其产量是野生型易变假单胞菌的27200倍。
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公开(公告)号：CN109627254B
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201811527070.7
申请日：2018-12-13
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
IPC分类号： C07D495/04
摘要： 本发明属于有机合成领域，具体涉及一种d‑生物素的制备方法，所述方法包括如下步骤：将双苄基生物素与三卤化硼的有机溶液，在无水有机溶剂的环境中，在惰性气体的保护下，经过一步反应脱去双苄基，得到d‑生物素。本发明提供了一条简便、安全、高收率、高纯度的一锅煮d‑生物素的制备方法，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN109627244A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811527050.X
申请日：2018-12-13
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
IPC分类号： C07D475/04 , C12P17/18
CPC分类号： C07D475/04 , C12P17/182
摘要： 本发明属于酶法合成的技术领域，涉及一种酶法制备L‑5‑甲基四氢叶酸钙的方法，所述方法包括如下步骤：(1)以叶酸为原料，使用锌粉将叶酸还原为二氢叶酸；(2)二氢叶酸中加入二氢叶酸还原酶、葡萄糖脱氢酶，反应得到L‑四氢叶酸；(3)L‑四氢叶酸中加入甲醛和硼氢化物反应得到L‑5‑甲基四氢叶酸；(4)L‑5‑甲基四氢叶酸成盐得到L‑5‑甲基四氢叶酸钙。本发明提供了一条行之有效的使用酶法制备L‑5‑甲基四氢叶酸钙的方法，这种制备方法不用拆分，反应温和，收率高，产品纯度高，环境友好，具有很好的产业化前景。
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公开(公告)号：CN109456206A
公开(公告)日：2019-03-12
申请号：CN201811528471.4
申请日：2018-12-13
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
IPC分类号： C07C213/10 , C07C215/36
摘要： 本发明属于属于生物素合成的技术领域，涉及一种生物素原料右胺的回收方法，所述方法包括如下步骤：(1)取内酯水解液，加入有机溶剂萃取内酯，分离出含有右胺盐酸盐的水层；(2)在水层中加入碱调节pH值至5-7，搅拌后析出棕色粘稠物，过滤，得到滤液；(3)在步骤(2)的滤液中加入碱进一步调节pH值至12-13，搅拌后析出右胺粗品，再过滤出上述右胺粗品；(4)将右胺粗品用水淋洗，烘干后得到右胺。本发明提供了一种从内酯水解液中回收右胺的方法，该方法简单、高效、适应性强。
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公开(公告)号：CN106632361A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611072814.1
申请日：2016-11-29
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司 , 武汉凯特立斯科技有限公司
IPC分类号： C07D491/048
CPC分类号： C07D491/048
摘要： 本发明涉及一种催化去对称化还原酸酐I制备光学纯生物素中间体内酯II的方法。所述方法以生物素中间体酸酐I为反应底物，在过渡金属催化下制备光学纯生物素中间体内酯II的方法，相比于传统方法，具有催化剂用量低，转化率高，ee值高，成本较低，且操作简单、绿色环保的特点，适于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN115772172B
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202211573629.6
申请日：2022-12-08
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
IPC分类号： C07D475/04
摘要： 本发明属于有机合成的技术领域，涉及一种叶酸的制备方法，以至少有两个进料口的连续流管式反应器为反应设备，将反应液a和反应液b分别接入连续流管式反应器的两个进料口，反应液在连续流管式反应器中剧烈碰撞，于瞬间完成反应生成叶酸粗品料液，过滤后得到叶酸粗品；所述反应液a为对氨基苯甲酰谷氨酸和1,1,3‑三氯丙酮的混合水溶液，反应液a的pH值为0.5‑1；所述反应液b为6‑羟基‑2,4,5‑三氨基嘧啶硫酸盐和焦亚硫酸钠的混合水溶液，反应液b的pH值为10‑12。本发明提供的叶酸的制备方法，能够加快叶酸合成反应速度，大幅降低耗水量，同时提升叶酸合成粗品质量和收率。
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公开(公告)号：CN117771389A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311833587.X
申请日：2023-12-28
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明属于制药技术的技术领域，涉及L‑5‑甲基四氢叶酸钙‑γ‑环糊精包合物，通过γ‑环糊精对L‑5‑甲基四氢叶酸钙进行包合，使L‑5‑甲基四氢叶酸钙包埋于γ‑环糊精的筒状空腔结构中，成为L‑5‑甲基四氢叶酸钙‑γ‑环糊精包合物；所述γ‑环糊精与L‑5‑甲基四氢叶酸钙的摩尔比为1～3：1；所述L‑5‑甲基四氢叶酸钙‑γ‑环糊精包合物通过以下方法制备：称取所述摩尔比的γ‑环糊精和L‑5‑甲基四氢叶酸钙，加入纯水混合成混悬液或溶液，在60～100℃条件下加热搅拌，反应8～24h，反应液静置冷却至黄色固体充分析出，干燥后得到固体包合物。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸钙‑γ‑环糊精包合物及其制备方法，解决了L‑5‑甲基四氢叶酸钙稳定性差、水溶性低等缺点。
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