一种化学修饰的反义寡核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN118638171A

    公开(公告)日:2024-09-13

    申请号:CN202410672076.2

    申请日:2024-05-28

    Abstract: 本发明提供了一种化学修饰的反义寡核苷酸及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种特殊的核苷修饰2‑氧甲基‑2,6二氨基嘌呤,修饰位置在序列的3端、5端或序列中间位置;该反义寡核苷酸合成适用常规固相亚磷酸酰胺化学合成方法,合成快速简单;配合双液相色谱系统Dual‑HPLC纯化,产品纯度高达98%。本发明提供的2‑氧甲基‑2,6二氨基嘌呤核苷酸修饰经过细胞水平的测试,mRNA的敲降效率得到了进一步的提升,为小核酸药物研究提供了一种新型的研究原料,具有极大的市场前景。

    一种大片段DNA的酵母高效组装方法及其应用

    公开(公告)号:CN117587057A

    公开(公告)日:2024-02-23

    申请号:CN202311589727.3

    申请日:2023-11-27

    Abstract: 本发明提供了一种大片段DNA的酵母高效组装方法及其应用,涉及分子生物学与合成生物学技术领域。本发明通过在酵母载体上插入α‑半乳糖苷酶的MEL1基因表达盒,使转入表达盒质粒的酿酒酵母在X‑α‑Gal的平板上可以呈现出肉眼可见的蓝色菌落,便于区分重组过程中的正确阳性克隆和假阳性克隆,有效降低筛选工作量,缩短周期,且筛选成功率高达92.7%。本发明肉眼可见的蓝色、白色菌落可作为自动化设备的挑斑条件,可提升自动化筛选的效率和通量,极大增加了酵母TAR技术应用于自动化流程的可行性。

    一种大肠杆菌益生菌T7表达系统及其应用

    公开(公告)号:CN116769814B

    公开(公告)日:2024-02-02

    申请号:CN202310717222.4

    申请日:2023-06-16

    Abstract: 景,具有极大的市场前景。本发明提供了一种大肠杆菌益生菌T7表达系统及其应用,以大肠杆菌益生菌Nissle1917(EcN)为原始菌株,通过基因编辑技术将噬菌体T7RNA聚合酶编码基因整合到EcN基因组中,获得EcN‑T7表达菌株,使之能够“无缝适配”目前最广泛应用的大肠杆菌表达载体;并且在EcN‑T7基础上对内毒素合成路径相关基因进行敲除,进一步降低改造菌株的内毒素水平。本发明构建的大肠杆菌益生菌T7表达系统能够高效表达外源基因,并且极大的降低了内毒素水平,不会引起细胞的(56)对比文件Comalada."MODULATION OF THE IMMUNERESPONSE WITH THE PROBIOTIC ESCHERICHIACOLI NISSLE 1917 IN LPS-INDUCED SEPTICSHOCK IN MICE"《.METHODS AND FINDINGS INEXPERIMENTAL AND CLINICAL PHARMACOLOGY》.2008,第30卷130-130.Gorzelak 等."Molecular Basis ofEssentiality of Early Critical Steps inthe Lipopolysaccharide Biogenesis inEscherichia coli K-12: Requirement ofMsbA, Cardiolipin, LpxL, LpxM and GcvB".《INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULARSCIENCES》.2021,第22卷(第10期),5099.Cheng 等."Integration of MultiplePhage Attachment Sites System to Createthe Chromosomal T7 System for ProteinProduction in Escherichia coli Nissle1917"《.JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOODCHEMISTRY》.2022,第70卷(第33期),10239-10247.王东宁 等.“东方鲎C因子的分段克隆及表达”《.生物化学与生物物理学报》.2002,(第1期),77-82.李晓妹.“构建双功能菌株合成肝素前体多糖和磺基转移酶的研究”《.中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》.2022,(第2期),摘要第2段,第19页图2.2,第20页第1段,第21页第1段、图2.5.王凯航.“一种内毒素合成途径抑制的整合表达型大肠杆菌菌株的构建及应用”《.中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》.2021,(第8期),E059-5.

    一种大肠杆菌益生菌T7表达系统及其应用

    公开(公告)号:CN116769814A

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202310717222.4

    申请日:2023-06-16

    Abstract: 本发明提供了一种大肠杆菌益生菌T7表达系统及其应用,以大肠杆菌益生菌Nissle1917(EcN)为原始菌株,通过基因编辑技术将噬菌体T7RNA聚合酶编码基因整合到EcN基因组中,获得EcN‑T7表达菌株,使之能够“无缝适配”目前最广泛应用的大肠杆菌表达载体;并且在EcN‑T7基础上对内毒素合成路径相关基因进行敲除,进一步降低改造菌株的内毒素水平。本发明构建的大肠杆菌益生菌T7表达系统能够高效表达外源基因,并且极大的降低了内毒素水平,不会引起细胞的免疫反应,简化了下游应用的操作,降低了生产成本,且能够拓展大肠杆菌活菌制剂的应用场景,具有极大的市场前景。

    一种通用型酵母细胞表面展示质粒载体及其应用

    公开(公告)号:CN115786387A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211134871.3

    申请日:2022-09-19

    Abstract: 本发明提供了一种通用型酵母细胞表面展示质粒载体及其应用,涉及蛋白质工程技术领域。本发明提供了一种通用型酵母细胞表面展示质粒载体,包括由酵母启动子‑酵母Aga1基因‑酵母转录终止子组成的表达模块一和由酵母启动子‑展示基因‑Aga2p基因‑酵母转录终止子组成的表达模块二;所述质粒载体将锚定蛋白和展示蛋白同时构建在同一个质粒载体上,使其在酵母细胞内同时实现高效表达,从而使展示蛋白可以高效地在大多数类型的酵母细胞表面进行展示,极大的提高酵母表面展示技术的使用方便性和广泛性。

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