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公开(公告)号：CN105727279B
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201610176389.4
申请日：2016-03-25
申请人： 汪和睦
摘要： 基于表达HBsAg和HBcAg的热失活全重组汉逊酵母细胞的乙肝治疗疫苗，以重组汉逊酵母胞内表达的HBsAgVLP和和HBcAgVLP为抗原，重组汉逊酵母表达的HBsAg的氨基酸序列中共含有19个CTL表位。重组汉逊酵母表达的HBcAg的氨基酸序列中共含有19个CTL表位，以热失活全重组汉逊酵母细胞为佐剂。热失活全重组汉逊酵母细胞为最主要专职抗原递呈细胞(DC)Dectin‑1受体的高效激动剂。HBV特异性CTL细胞，靶向感染HBV的肝细胞释放IFN‑γ：第一步非肝细胞损伤地减少其90％以上cccDNA分子池，第二步提高了过程中损伤受HBV感染的肝细胞，并触发HBV免疫逆转。
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公开(公告)号：CN101248998B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200810103155.2
申请日：2008-03-31
申请人： 天津超然生物技术有限公司 , 汪和睦
摘要： 本发明公开了一种真空采血管。该真空采血管包含一真空管，所述的真空管内还含有水蛭素作为通用抗凝剂。该水蛭素可是冻干粉末或喷雾干燥或水溶液剂型；该水蛭素还可为聚乙二醇修饰形式或脂质体包封形式。真空管中水蛭素含量为100-2000ATU/ml血量。该水蛭素的氨基酸序列具体可如序列表中序列1所示。本发明的通用真空采血管可在临床生物化学、临床免疫学、临床血流变学、免疫原型分析、RT-PCR检测及除综合凝血参数外的临床血液学检验等中的应用，实现了实验室检验的通用。
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公开(公告)号：CN101250530B
公开(公告)日：2011-08-24
申请号：CN200810103154.8
申请日：2008-03-31
申请人： 汪和睦
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/81 , C12N1/19 , C07K14/815 , C12R1/78
摘要： 本发明公开了一种重组水蛭素编码基因与应用。该重组水蛭素编码基因的核苷酸序列是序列表中的序列2自5′末端第7-459位所示。本发明还公开了一种重组表达载体，该重组表达载体含所述水蛭素编码基因。将该重组表达载体导入多形汉逊酵母中可获得的重组菌。该重组菌能高水平生产重组水蛭素；所生产的重组水蛭素具有高抗凝比活性。生产的重组水蛭素可制备血液或血浆的通用抗凝剂。
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公开(公告)号：CN101250530A
公开(公告)日：2008-08-27
申请号：CN200810103154.8
申请日：2008-03-31
申请人： 汪和睦
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/81 , C12N1/19 , C07K14/815 , C12R1/78
摘要： 本发明公开了一种重组水蛭素编码基因与应用。该重组水蛭素编码基因的核苷酸序列是序列表中的序列2自5′末端第7－459位所示。本发明还公开了一种重组表达载体，该重组表达载体含所述水蛭素编码基因。将该重组表达载体导入多形汉逊酵母中可获得的重组菌。该重组菌能高水平生产重组水蛭素；所生产的重组水蛭素具有高抗凝比活性。生产的重组水蛭素可制备血液或血浆的通用抗凝剂。
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公开(公告)号：CN105727280B
公开(公告)日：2021-01-19
申请号：CN201610180329.X
申请日：2016-03-25
申请人： 汪和睦
摘要： 基于表达HBsAg的热失活全重组汉逊酵母细胞的乙肝治疗疫苗，所述疫苗为重组汉逊酵母胞内表达的HBsAg，在108细胞中含有6‑10μg HBsAg为抗原；所述疫苗共含有16‑21个HBsAg特异性CTL(细胞毒T淋巴细胞)表位；所述疫苗以优化的热失活全重组汉逊酵母细胞为佐剂，本发明提供的疫苗基于汉逊酵母表达系统平台，通过HBsAg特异性CTL细胞靶向感染HBV的肝细胞释放IFN‑γ：第一步非肝细胞损伤地减少其90％以上HBV cccDNA分子池，第二步提高了过程中损毁受感染的肝细胞，并触发HBV免疫逆转。
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公开(公告)号：CN105797151A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610178526.8
申请日：2016-03-25
申请人： 汪和睦
摘要： 一种基于重组汉逊酵母的高剂量乙型肝炎疫苗，其特征在于用于生产所述乙型肝炎疫苗的重组汉逊酵母发酵液的HBsAg纯品(原液)产率为300mg/L?400mg/L；所述乙型肝炎疫苗中乙肝表面抗原成人剂量为40μg/针、儿童剂量为20μg/针的第三代产品。提供了一种高免疫原性、高剂量的重组乙肝疫苗，解决了现有技术中囿于乙肝疫苗抗原产量低造成的无法提高剂量问题，同等发酵规模下本发明的两种剂量疫苗年产量各1亿人份，可满足我国所有人群乙肝疫苗免疫全覆盖的需求。
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公开(公告)号：CN100347287C
公开(公告)日：2007-11-07
申请号：CN200410080517.2
申请日：2004-09-30
申请人： 汪和睦
摘要： 本发明公开了一种重组多形汉逊酵母菌及其构建方法与应用，其目的是提供一种遗传较稳定的重组多形汉逊酵母菌及其构建方法与其在生产外源蛋白中的应用。本发明所提供的重组多形汉逊酵母菌，是乳清酸苷-5-磷酸脱羧酶基因被阻断的多形汉逊酵母菌(Hansenula polymorpha) HU-11 CGMCC No.1218。其构建方法包括以下步骤：1)构建乳清酸苷-5-磷酸脱羧酶基因被筛选标记基因灭活的重组载体；2)将步骤1)中的重组载体导入野生型多形汉逊酵母菌中，筛选得到乳清酸苷-5-磷酸脱羧酶基因被阻断的多形汉逊酵母菌。本发明的重组多形汉逊酵母菌将在外源蛋白的生产中发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN105727280A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201610180329.X
申请日：2016-03-25
申请人： 汪和睦
摘要： 基于表达HBsAg的热失活全重组汉逊酵母细胞的乙肝治疗疫苗，所述疫苗为重组汉逊酵母胞内表达的HBsAg，在108细胞中含有6?10μg HBsAg为抗原；所述疫苗共含有16?21个HBsAg特异性CTL(细胞毒T淋巴细胞)表位；所述疫苗以优化的热失活全重组汉逊酵母细胞为佐剂，本发明提供的疫苗基于汉逊酵母表达系统平台，通过HBsAg特异性CTL细胞靶向感染HBV的肝细胞释放IFN?γ：第一步非肝细胞损伤地减少其90％以上HBV cccDNA分子池，第二步提高了过程中损毁受感染的肝细胞，并触发HBV免疫逆转。
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公开(公告)号：CN105727279A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201610176389.4
申请日：2016-03-25
申请人： 汪和睦
CPC分类号： A61K39/29 , A61K39/39 , C12R1/78 , A61K39/12 , A61K2039/521 , A61K2039/5258 , A61K2039/55588 , C07K14/02 , C12N9/88 , C12N2730/10134 , C12Y401/01023
摘要： 基于表达HBsAg和HBcAg的热失活全重组汉逊酵母细胞的乙肝治疗疫苗，以重组汉逊酵母胞内表达的HBsAgVLP和和HBcAgVLP为抗原，重组汉逊酵母表达的HBsAg的氨基酸序列中共含有19个CTL表位。重组汉逊酵母表达的HBcAg的氨基酸序列中共含有19个CTL表位，以热失活全重组汉逊酵母细胞为佐剂。热失活全重组汉逊酵母细胞为最主要专职抗原递呈细胞(DC)Dectin?1受体的高效激动剂。HBV特异性CTL细胞，靶向感染HBV的肝细胞释放IFN?γ：第一步非肝细胞损伤地减少其90％以上cccDNA分子池，第二步提高了过程中损伤受HBV感染的肝细胞，并触发HBV免疫逆转。
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公开(公告)号：CN101248998A
公开(公告)日：2008-08-27
申请号：CN200810103155.2
申请日：2008-03-31
申请人： 天津超然生物技术有限公司 , 汪和睦
摘要： 本发明公开了一种真空采血管。该真空采血管包含一真空管，所述的真空管内还含有水蛭素作为通用抗凝剂。该水蛭素可是冻干粉末或喷雾干燥或水溶液剂型；该水蛭素还可为聚乙二醇修饰形式或脂质体包封形式。真空管中水蛭素含量为100－2000ATU/ml血量。该水蛭素的氨基酸序列具体可如序列表中序列1所示。本发明的通用真空采血管可在临床生物化学、临床免疫学、临床血流变学、免疫原型分析、RT－PCR检测及除综合凝血参数外的临床血液学检验等中的应用，实现了实验室检验的通用。
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