表达SARS-CoV-2纤突蛋白或其变异体SΔ21的假型化VSV病毒构建和应用

    公开(公告)号:CN113817753B

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202111044750.5

    申请日:2021-09-07

    发明人: 孙涛 张宝红 柯勇

    摘要: 本发明提供一种表达SARS‑CoV‑2纤突蛋白或其变异体SΔ21的假型化VSV病毒构建和应用;所述构建包括:敲除VSV负责识别宿主细胞受体的G蛋白基因,通过SARS‑CoV‑2的S蛋白或其变异体SΔ21蛋白构建假型化VSV病毒;SΔ21为胞内区缺失21个氨基酸的S蛋白变异体。本发明构建的重组VSV病毒是针对SARS‑CoV‑2病毒的S蛋白以及S蛋白羧基末端进行相应缺失后获得的S蛋白变异体,因此不涉及其活病毒,将不会产生生物安全问题;在本发明中,除了构建野生型M蛋白为骨架的VSV,还提出了全新的思路,即利用M蛋白构建的重组VSV病毒可用于疫苗的研制以及人、动物体内SARS‑CoV‑2病毒特异性中和抗体的检测。

    利用重组水泡性口炎病毒构建预防猪流行性腹泻病毒疫苗

    公开(公告)号:CN108743934B

    公开(公告)日:2021-10-15

    申请号:CN201810412129.1

    申请日:2018-05-02

    发明人: 孙涛 方心葵 柯勇

    摘要: 本发明公开了利用重组水泡性口炎病毒(VSV)构建预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗;包括:借助基质蛋白(Matrix,M)三个不同氨基酸位点发生突变的高度弱化的VSV(VSVMT)表达PEDV2012年上海株保护性抗原S蛋白来制备得到的预防PEDV的新型疫苗。该重组病毒体外复制滴度可接近109TCID50/ml;在猪体内,该新型疫苗可高效诱导中和保护性抗体,同时,鉴于以VSV为平台构建的重组疫苗具备快速激活动物机体免疫保护力的特点,表达PEDV保护性抗原的VSV疫苗可成为有效预防猪流行性腹泻病毒的应急免疫疫苗。

    感染VSV的动物体内M蛋白抗体的ELISA检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN103091489B

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201310009365.6

    申请日:2013-01-10

    IPC分类号: G01N33/569 G01N21/31

    摘要: 本发明提供了一种感染VSV动物体内M蛋白抗体的ELISA检测试剂盒及其检测方法,所述试剂盒包括重组蛋白抗原、多孔酶联板、包被缓冲液、封闭缓冲液、洗涤缓冲液、样品稀释液、酶标二抗、终止液、TMB底物溶液、阴性对照血清和阳性对照血清;所述检测方法包括以下步骤:包被重组蛋白;将待测血清倍比稀释后孵育;加入酶标二抗;显色;加入终止液终止反应;检测OD值,以P/N值>2.1作为阳性标准,以出现阳性反应的最高稀释度作为样品的抗体滴度。本发明可对大量样品同时进行检测,操作方便,能够快速稳定检测感染VSV的动物体内M蛋白抗体,适用于感染VSV动物的快速诊断,有利于及时监测入境动物的VSV感染情况。

    感染VSV的动物体内M蛋白抗体的ELISA检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN103091489A

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201310009365.6

    申请日:2013-01-10

    IPC分类号: G01N33/569 G01N21/31

    摘要: 本发明提供了一种感染VSV动物体内M蛋白抗体的ELISA检测试剂盒及其检测方法,所述试剂盒包括重组蛋白抗原、多孔酶联板、包被缓冲液、封闭缓冲液、洗涤缓冲液、样品稀释液、酶标二抗、终止液、TMB底物溶液、阴性对照血清和阳性对照血清;所述检测方法包括以下步骤:包被重组蛋白;将待测血清倍比稀释后孵育;加入酶标二抗;显色;加入终止液终止反应;检测OD值,以P/N值>2.1作为阳性标准,以出现阳性反应的最高稀释度作为样品的抗体滴度。本发明可对大量样品同时进行检测,操作方便,能够快速稳定检测感染VSV的动物体内M蛋白抗体,适用于感染VSV动物的快速诊断,有利于及时监测入境动物的VSV感染情况。

    基于惯性传感器的实时足着地离地事件检测方法及系统

    公开(公告)号:CN115624326A

    公开(公告)日:2023-01-20

    申请号:CN202211105666.4

    申请日:2022-09-08

    IPC分类号: A61B5/11 A61B5/00 G01C21/16

    摘要: 本发明提供了一种基于惯性传感器的实时足着地离地事件检测方法及系统,包括如下步骤:数据获取步骤:将惯性传感器置于脚背,以预定采样频率实时记录足的加速度和角速度数据;状态判断步骤:基于合加速度阈值和合角速度阈值,根据足的加速度和角速度数据判断当前时刻足部是否静止,并确定当前是否处于等待检测状态;事件寻找步骤:在等待检测状态下,从当前采样点出发,在预定个数的采样点内,沿时间顺序正向寻找离地事件,同时沿时间顺序逆向寻找着地事件;事件记录步骤:若着地事件和离地事件寻找成功,则记录着地事件和离地事件,否则跳过该段数据。本发明通过惯性传感器数据分析、特征提取,达到了降低成本的效果。

    表达SARS-CoV-2纤突蛋白或其变异体SΔ21的假型化VSV病毒构建和应用

    公开(公告)号:CN113817753A

    公开(公告)日:2021-12-21

    申请号:CN202111044750.5

    申请日:2021-09-07

    发明人: 孙涛 张宝红 柯勇

    摘要: 本发明提供一种表达SARS‑CoV‑2纤突蛋白或其变异体SΔ21的假型化VSV病毒构建和应用;所述构建包括:敲除VSV负责识别宿主细胞受体的G蛋白基因,通过SARS‑CoV‑2的S蛋白或其变异体SΔ21蛋白构建假型化VSV病毒;SΔ21为胞内区缺失21个氨基酸的S蛋白变异体。本发明构建的重组VSV病毒是针对SARS‑CoV‑2病毒的S蛋白以及S蛋白羧基末端进行相应缺失后获得的S蛋白变异体,因此不涉及其活病毒,将不会产生生物安全问题;在本发明中,除了构建野生型M蛋白为骨架的VSV,还提出了全新的思路,即利用M蛋白构建的重组VSV病毒可用于疫苗的研制以及人、动物体内SARS‑CoV‑2病毒特异性中和抗体的检测。

    长非编码RNA及在作为调控神经干细胞增殖和分化中的应用

    公开(公告)号:CN105238784B

    公开(公告)日:2019-01-25

    申请号:CN201510673123.6

    申请日:2015-10-16

    发明人: 孙涛

    摘要: 本发明属生理和生物医学领域,涉及一种长非编码RNA及在作为调控神经干细胞增殖和分化中的应用;从技术层面上,本申请发现了调控神经干细胞发育的长非编码RNASox2ot,并首次确认了它在神经元生成中的促进作用。这些发现将有助于我们从体内水平直接改变长非编码RNASox2ot的表达,以影响神经干细胞发育;从临床角度上,通过探索非编码RNASox2ot在神经干细胞中的作用,有助于我们进一步开发检测影响大脑早期发育的基因的临床诊断试剂,以预防小脑症发生;进一步地,由于非编码RNA易于在体外合成和干预它的表达水平,我们可以直接利用非编码RNA调控神经干细胞的增殖和分化。这将为临床上开发应用神经干细胞治疗人类神经系统疾病,提供新的疗法和技术手段。

    基质蛋白突变的重组水泡性口炎病毒作为猪用疫苗载体

    公开(公告)号:CN103768592A

    公开(公告)日:2014-05-07

    申请号:CN201410029722.X

    申请日:2014-01-22

    发明人: 孙涛 方心葵

    摘要: 本发明公开了一株基质蛋白突变的重组水泡性口炎病毒作为猪用疫苗载体;所述疫苗载体为重组病毒VSVΔM51。本发明还提供了一种用于检测猪血清中特异性M抗体的试剂盒,该试剂盒使用时包括如下步骤:利用重组表达制备的高纯度的M蛋白,进而建立ELISA方法检测接种VSVΔM51病毒的猪血清中特异性M抗体水平。本发明首次提出利用VSV重要毒力因子基质蛋白第51位精氨酸敲除后的变异毒株(VSVΔM51)作为有应用价值的候选猪用VSV病毒株;并在国内外首次对VSVΔM51在猪上的致病性进行了较为系统的评估,为VSVΔM51作为疫苗载体提供了证据。