一种显微授精培养皿
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104651221A

    公开(公告)日:2015-05-27

    申请号:CN201310596544.4

    申请日:2013-11-21

    发明人: 吕祁峰

    IPC分类号: C12M1/22

    CPC分类号: C12M21/06 C12M23/10

    摘要: 本发明公开了一种显微授精培养皿,包括皿底、皿池边、皿底缘,所述皿底包括有一定角度的倾斜面。本发明通过设置具有倾斜显微授精培养皿皿底,使得显微注射针前端在成水平角度时仍与皿底间有夹角,这时的针尖若触底,则显微注射针前端后部不会触底而引起针尖上翘脱离处于底部的精子,从而可以顺利对精子进行抓取和压划,实现正常显微授精操作。由于这种显微注射针前端成水平角度操作可行,就使得可以用显微注射针正对卵子做显微授精,避免了传统方法的非正对穿刺而加大了卵子崩解的风险。

    一种灭活的仙台病毒低残留高效促融合方法

    公开(公告)号:CN114075575A

    公开(公告)日:2022-02-22

    申请号:CN202111288816.5

    申请日:2021-11-02

    发明人: 吕祁峰

    IPC分类号: C12N15/873

    摘要: 本发明公开了一种灭活的仙台病毒低残留高效促融合方法,其中包括体外显微操作中将需融合的胞体在含灭活仙台病毒的培养液中的浸泡操作和将胞体与卵子胞膜接触的融合操作,其特征是所述浸泡操作,是用吸管吸住胞体,只吐露出胞体的一部分浸泡在灭活仙台病毒的培养液中,减少浸泡的胞膜面积;所述融合操作,是用吸管吸住胞体,只吐露出胞体的一部分压迫在所需融合的卵子胞膜上,并维持一定时间,待胞体膜与卵膜粘合较牢固后,再松开压迫,吐出胞体,撤走吸管。前一操作降低了灭活仙台病毒在核质置换中的残留,后一操作,既保证了前一操作中浸泡过灭活仙台病毒的胞膜面能精准成为融合面,又促进了胞体融合效率。

    一种胞浆机械脱离用培养液及其使用方法

    公开(公告)号:CN114075542B

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202111287853.4

    申请日:2021-11-02

    发明人: 吕祁峰

    IPC分类号: C12N5/075

    摘要: 本发明公开了一种胞浆机械脱离用培养液及其使用方法,其中培养液包括体外操作培养液基本成分和添加成分等,其特征是所述添加成分包括了用于胞浆机械脱离时柔化细胞膜的物质,这包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、细胞松弛素、蛋白成分(如血清或血清蛋白或其替代物)等适当浓度的添加或组合添加。该培养液有利于在显微操作等情况下,实现机械力作用下的胞浆从胞体上顺利脱离,即使用时,将卵子、细胞或从卵子中取下的部分胞体置于该培养液,则胞膜变得柔软且粘滞,当用机械力作用时,比如用显微管吸住胞体一部分进行摆动或挤压等操作,容易形成受力部分的胞浆脱离原胞体,且保持脱离部分和非脱离部分仍然胞膜完整,不易出现胞膜崩解。(56)对比文件Q Zhou et al..A simplified method forthe reconstruction of fully competentmouse zygotes from adult somatic donornuclei《.Cloning》.2000,第35-44页.

    一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及其用途

    公开(公告)号:CN114457118B

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202210229760.4

    申请日:2022-03-10

    摘要: 本发明公开了一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及用途。所述基因元件包括依次连接的第一编码区、第二编码区和第三编码区;所述第一编码区包括第一荧光蛋白报告基因,所述第二编码区包括第二荧光蛋白报告基因,所述第三编码区包括第三荧光蛋白报告基因;所述第一荧光蛋白报告基因、第二荧光蛋白报告基因和第三荧光蛋白报告基因分别位于不同的阅读框中,以使仅一种荧光蛋白能正确表达。本发明的基因元件通过对目标DNA编辑结果进行实时监控,能确定最佳的编辑时间窗;通过对不同荧光发光细胞数量统计完成对目标DNA编辑结果的预测。此外,还能通过建立人源化细胞模型,进行疾病的基因治疗新技术的评估。

    一种胞浆机械脱离用培养液及其使用方法

    公开(公告)号:CN114075542A

    公开(公告)日:2022-02-22

    申请号:CN202111287853.4

    申请日:2021-11-02

    发明人: 吕祁峰

    IPC分类号: C12N5/075

    摘要: 本发明公开了一种胞浆机械脱离用培养液及其使用方法,其中培养液包括体外操作培养液基本成分和添加成分等,其特征是所述添加成分包括了用于胞浆机械脱离时柔化细胞膜的物质,这包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、细胞松弛素、蛋白成分(如血清或血清蛋白或其替代物)等适当浓度的添加或组合添加。该培养液有利于在显微操作等情况下,实现机械力作用下的胞浆从胞体上顺利脱离,即使用时,将卵子、细胞或从卵子中取下的部分胞体置于该培养液,则胞膜变得柔软且粘滞,当用机械力作用时,比如用显微管吸住胞体一部分进行摆动或挤压等操作,容易形成受力部分的胞浆脱离原胞体,且保持脱离部分和非脱离部分仍然胞膜完整,不易出现胞膜崩解。

    一种二次降低残留线粒体的第二极体或前原核核质置换方法

    公开(公告)号:CN113913467B

    公开(公告)日:2023-12-08

    申请号:CN202111288764.1

    申请日:2021-11-02

    IPC分类号: C12N15/873

    摘要: 本发明公开了一种二次降低残留线粒体的第二极体或前原核核质置换方法,其中包括体外显微操作中:第二极体或前原核取出操作、第二极体或前原核的融入操作等过程,其特征是所述取出操作在第二极体排出后短时间内进行,连同第二极体下一团胞浆一起取出。然后,将相连两胞体置于含有胞膜柔化成分的胞浆机械脱离液中,对其中一块胞体采取胞浆机械脱离操作,以去除该胞体及其中的核物质。植入操作中用显微管将剩下的胞体从原纺锤体蛋白端吸入,将胞体一端浸泡灭活仙台病毒液滴后,压迫在受体卵子胞膜上,并维持一定时间,以促进融合。完全融合数小时后,将凸起的原纺锤体蛋白及其邻近的卵胞浆吸取弃之,实现第二次降残留线粒体。

    特异性识别胎盘特异性蛋白1的核酸适配体及其用途

    公开(公告)号:CN116004633A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202210917487.4

    申请日:2022-08-01

    摘要: 本发明属于生物技术领域,公开了特异性识别胎盘特异性蛋白1的核酸适配体及其用途。所述核酸适配体的核苷酸序列包括SEQ ID No.1‑57所示序列中的任一项。本发明采用X‑aptamer筛选技术,结合高通量测序技术及生物信息学分析,降低筛选的轮次并获得候选核酸适配体,通过进一步分析其亲和性和特异性,得到特异性识别胎盘特异性蛋白1的核酸适配体。本发明的核酸适配体具有亲和性及特异性高、稳定性好、合成方便、易标记功能基团等特点,可用于胎盘特异性蛋白1的检测或结合、胎盘特异性蛋白1相关疾病的诊断、预后等产品的制备。

    一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及其用途

    公开(公告)号:CN114457118A

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202210229760.4

    申请日:2022-03-10

    摘要: 本发明公开了一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及用途。所述基因元件包括依次连接的第一编码区、第二编码区和第三编码区;所述第一编码区包括第一荧光蛋白报告基因,所述第二编码区包括第二荧光蛋白报告基因,所述第三编码区包括第三荧光蛋白报告基因;所述第一荧光蛋白报告基因、第二荧光蛋白报告基因和第三荧光蛋白报告基因分别位于不同的阅读框中,以使仅一种荧光蛋白能正确表达。本发明的基因元件通过对目标DNA编辑结果进行实时监控,能确定最佳的编辑时间窗;通过对不同荧光发光细胞数量统计完成对目标DNA编辑结果的预测。此外,还能通过建立人源化细胞模型,进行疾病的基因治疗新技术的评估。