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公开(公告)号：CN102181504A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110062433.6
申请日：2011-03-15
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
IPC分类号： C12P17/04 , C12P39/00 , C12R1/11 , C12R1/10 , C12R1/085 , C12R1/07 , C12R1/72 , C12R1/865 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及维生素C第二步发酵领域，具体为一种伴生菌活性胞外液制剂在Vc二步发酵中的应用。(1)选Vc二步发酵伴生菌接入牛肉膏蛋白胨培养基等中，33℃震荡培养至生长稳定期，收集发酵醪液，以0.45μm滤膜过滤弃菌体，滤液再用截留分子量3-5万道尔顿的超滤膜超滤浓缩至蛋白含量为10-20mg/ml，制成伴生菌活性胞外液制剂，无菌分装、低温保藏；(2)在Vc二步发酵中，当发酵进入中期和/或后期时，分别向发酵罐注入活性胞外液制剂10-12L/100M3，同时补加山梨糖水溶液至山梨糖终浓度达10-11wt％。本发明可解决现有技术中发酵过程可控性差、发酵水平高低波动过大、生产不稳定、严重影响生产效率等问题。
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公开(公告)号：CN101748167B
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN200810229323.2
申请日：2008-12-05
申请人： 东北制药集团股份有限公司 , 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要： 本发明属于发酵尾气回收利用领域，具体为一种应用发酵尾气提高发酵效率的方法，采用该方法可以循环利用发酵尾气，节能、减排，提高发酵效率。其利用过程为：收集好氧发酵过程中产生的尾气于一缓冲罐中，经鼓风机增压后，导入通向发酵罐的专用辅助压缩管路。待发酵旺盛、需氧量加大时，开通发酵罐阀，尾气经置于发酵罐中部的气体分布器注入发酵罐内，补足发酵罐上部供氧不足，加强发酵罐内的发酵液的翻腾效果，实现高效快速发酵。本发明将发酵废弃尾气予以高效利用，为企业技术进步，步入发展循环经济的模式，辟出一条新路。
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公开(公告)号：CN103074406B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201110329992.9
申请日：2011-10-26
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及维生素C的两步发酵领域，具体为一种古龙酸的高温发酵的方法。生产维生素C前提古龙酸的发酵过程中，发酵底物为浓度为8-9％的山梨糖，种液接种量为5-15％，发酵起始，温度控制在29-31℃，pH6.7-6.9，通风溶氧百分比为20-22％；待发酵菌浓度达1-10×108个/ml，开始逐步升温至42-50℃，同时增加通风至醪液溶氧百分比达25％，待发酵至40小时后调pH为7.2-7.4，并且降低溶氧百比分比至15％，至发酵结束，实现古龙酸的高温发酵。本发明古龙酸的高温发酵，发酵速度加快，发酵周期缩短15-20％，设备利用率提高10-15％。
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公开(公告)号：CN103074406A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201110329992.9
申请日：2011-10-26
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及维生素C的两步发酵领域，具体为一种古龙酸的高温发酵的方法。生产维生素C前提古龙酸的发酵过程中，发酵底物为浓度为8-9％的山梨糖，种液接种量为5-15％，发酵起始，温度控制在29-31℃，pH6.7-6.9，通风溶氧百分比为20-22％；待发酵菌浓度达1-10×108个/ml，开始逐步升温至42-50℃，同时增加通风至醪液溶氧百分比达25％，待发酵至40小时后调pH为7.2-7.4，并且降低溶氧百比分比至15％，至发酵结束，实现古龙酸的高温发酵。本发明古龙酸的高温发酵，发酵速度加快，发酵周期缩短15-20％，设备利用率提高10-15％。
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公开(公告)号：CN101985640A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN201010561138.0
申请日：2010-11-25
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及维生素C第一步发酵技术领域，具体为一种山梨醇的高浓度连续发酵工艺。过程：选二个发酵罐，1#罐应用低山梨醇浓度进行发酵，发酵至生黑醋酸杆菌生长和代谢达高峰值，移出部分作为接种液，接种已备好低山梨醇浓度培养液的2#罐进行低山梨醇浓度发酵；1#罐移出部分发酵液后，本身流加高浓度无菌山梨醇至终山梨醇浓度为38％，加大通风量继续发酵至醇糖转化率达97％以上，结束发酵。1#罐发酵醪液迅速导入糖储罐，罐清空后转入第二轮的发酵运行：先重复2#罐、后重复1#罐的发酵过程。原作低山梨醇浓度发酵的2#罐待生黑醋酸杆菌生长和代谢达高峰值，重复1#罐的发酵过程。1#和2#罐相互依存、作用整合、周而复始地不间断运行，实现山梨醇高浓度连续发酵。
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公开(公告)号：CN101748167A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN200810229323.2
申请日：2008-12-05
申请人： 东北制药集团股份有限公司 , 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要： 本发明属于发酵尾气回收利用领域，具体为一种应用发酵尾气提高发酵效率的方法，采用该方法可以循环利用发酵尾气，节能、减排，提高发酵效率。其利用过程为：收集好氧发酵过程中产生的尾气于一缓冲罐中，经鼓风机增压后，导入通向发酵罐的专用辅助压缩管路。待发酵旺盛、需氧量加大时，开通发酵罐阀，尾气经置于发酵罐中部的气体分布器注入发酵罐内，补足发酵罐上部供氧不足，加强发酵罐内的发酵液的翻腾效果，实现高效快速发酵。本发明将发酵废弃尾气予以高效利用，为企业技术进步，步入发展循环经济的模式，开辟出一条新路。
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公开(公告)号：CN102978273A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210453539.3
申请日：2012-11-13
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要： 本发明属于维生素C生物发酵技术领域，具体的说是Vc第二步生物发酵中一种利用混合菌生物发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸的方法。Vc二步发酵生产工艺的种子液逐级扩大，发酵培养时将A菌系和B菌系的种子液，以体积百分比15-20％的总接种量接入发酵罐中发酵培养至发酵终点（即至发酵液中残余山梨糖浓度≤1mg/ml），实现利用混合菌发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸;其中A菌系由伴生菌蜡样芽孢杆菌/伴生菌巨大芽孢杆菌与产酸菌生酮基古龙酸菌组成；B菌系由伴生菌苏云金芽孢杆菌和产酸菌生酮基古龙酸菌组成；采用本发明的三菌混合发酵新方法，发挥了两种伴生菌的各自优势，可缩短发酵周期6-8小时，降低能耗10-15％，提高发酵转化率2-4％。
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公开(公告)号：CN102978273B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210453539.3
申请日：2012-11-13
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要： 本发明属于维生素C生物发酵技术领域，具体的说是Vc第二步生物发酵中一种利用混合菌生物发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸的方法。Vc二步发酵生产工艺的种子液逐级扩大，发酵培养时将A菌系和B菌系的种子液，以体积百分比15-20％的总接种量接入发酵罐中发酵培养至发酵终点（即至发酵液中残余山梨糖浓度≤1mg/ml），实现利用混合菌发酵转化山梨糖为2-酮基-L-古龙酸;其中A菌系由伴生菌蜡样芽孢杆菌/伴生菌巨大芽孢杆菌与产酸菌生酮基古龙酸菌组成；B菌系由伴生菌苏云金芽孢杆菌和产酸菌生酮基古龙酸菌组成；采用本发明的三菌混合发酵新方法，发挥了两种伴生菌的各自优势，可缩短发酵周期6-8小时，降低能耗10-15％，提高发酵转化率2-4％。
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公开(公告)号：CN102978131A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210453520.9
申请日：2012-11-13
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要： 本发明涉及菌株筛选方法，具体的说是一种Vc二步发酵菌株的筛选方法。将Vc二步发酵中的转化菌和伴生菌混合培养于Vc二步发酵的种子液中，发酵液经离心后，上清液为转化菌溶液A；另将Vc二步发酵中的伴生菌接种于培养基中培养20-28小时，培养后无菌滤膜过滤滤液为发酵液B；将转化菌溶液A与发酵液B混匀后进行稀释，取稀释液涂布于分离培养基上，在29-37℃培养4-8天后，形成转化菌的菌落；再在形成转化菌的菌落的分离培养基上加入0.1％浓度的无菌溴百里香酚兰指示液，于常温下静置0.5～2小时，根据菌落周围的黄色圈大小判断转化效率高低，从而快速筛选出具高效转化能力的转化菌株。本发明筛选方法既避免了伴生菌的存在对转化作用的影响，又保证了伴生液对转化菌生长和产酸的激活作用，而指示剂颜色的变化又能准确指示转化菌的转化能力，同时极大地提高了筛选效率。
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