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公开(公告)号：CN103074406B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201110329992.9
申请日：2011-10-26
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及维生素C的两步发酵领域，具体为一种古龙酸的高温发酵的方法。生产维生素C前提古龙酸的发酵过程中，发酵底物为浓度为8-9％的山梨糖，种液接种量为5-15％，发酵起始，温度控制在29-31℃，pH6.7-6.9，通风溶氧百分比为20-22％；待发酵菌浓度达1-10×108个/ml，开始逐步升温至42-50℃，同时增加通风至醪液溶氧百分比达25％，待发酵至40小时后调pH为7.2-7.4，并且降低溶氧百比分比至15％，至发酵结束，实现古龙酸的高温发酵。本发明古龙酸的高温发酵，发酵速度加快，发酵周期缩短15-20％，设备利用率提高10-15％。
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公开(公告)号：CN103074406A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201110329992.9
申请日：2011-10-26
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及维生素C的两步发酵领域，具体为一种古龙酸的高温发酵的方法。生产维生素C前提古龙酸的发酵过程中，发酵底物为浓度为8-9％的山梨糖，种液接种量为5-15％，发酵起始，温度控制在29-31℃，pH6.7-6.9，通风溶氧百分比为20-22％；待发酵菌浓度达1-10×108个/ml，开始逐步升温至42-50℃，同时增加通风至醪液溶氧百分比达25％，待发酵至40小时后调pH为7.2-7.4，并且降低溶氧百比分比至15％，至发酵结束，实现古龙酸的高温发酵。本发明古龙酸的高温发酵，发酵速度加快，发酵周期缩短15-20％，设备利用率提高10-15％。
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公开(公告)号：CN102154430B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201010616042.X
申请日：2010-12-30
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及生物医药和生物技术领域，具体是一种生物催化菌株在把右旋磷霉素转变为左旋磷霉素中的应用，三种细菌菌株可以通过生物催化把右旋磷霉素转变为左旋磷霉素，为解决现有右旋磷霉素严重的资源浪费和环境污染等问题提供了技术基础。右旋磷霉素是左旋磷霉素化学合成工艺中形成的副产物，无药效，被作为废物弃掉，污染环境、浪费资源。本发明验证了三种细菌菌株的混合培养物具有通过生物催化把右旋磷霉素转变为左旋磷霉素的能力。这三种细菌菌株分别是弗氏柠檬酸杆菌、假单胞菌以及梭状芽孢杆菌。本发明提出的三种细菌菌株所具有的催化能力，具有使现在被废弃的右旋磷霉素通过生物催化技术变废为宝、获得再利用的可能性。
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公开(公告)号：CN101153302B
公开(公告)日：2010-07-28
申请号：CN200710012579.3
申请日：2007-08-24
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及生物医药和生物催化领域，具体是一种把右旋磷霉素通过生物催化过程转变为左旋磷霉素的生物催化方法，解决右旋磷霉素转变为左旋磷霉素的问题。将具有催化能力的菌株进行放大培养，离心、收集菌体后，接种于催化培养基中，催化培养基组分为：按重量百分数计，右旋磷霉素0.5-3.0％，(NH4)2SO40.5-1.0％，NaCl0.2％，KCl0.1％，MgSO4·7H2O0.01-0.02％，FeSO4·7H2O0.01-0.03％，KH2PO40.05-0.15％，余量为水，pH7.5。121℃湿热灭菌20min。恒温震荡培养，培养温度28-37℃、摇床转速150-250rpm，培养时间3-7天。发酵液中左旋磷霉素的定性和浓度检测分别由薄层层析和生物鉴定盘方法进行。本发明提出了一种把右旋磷霉素转化为左旋磷霉素的全新生物催化途径，使右旋磷霉素的生物催化成为可能。
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公开(公告)号：CN1974786B
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200610134746.7
申请日：2006-12-13
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及生物医药领域，具体为一种磷霉素产生菌株的筛选方法，将磷霉素生物转化菌株发酵液冷冻浓缩的方法应用于筛选过程中，冷冻浓缩是将预冷却到0～10℃的菌株发酵液放置到-30℃～-10℃的乙醇-冰冷却剂中，于真空度为10～20Pa、冷冻温度为-30℃～-10℃下，冷冻15min～2小时，至干燥形成浓缩液。本发明以右旋磷霉素为底物培养待鉴定菌株，以大肠杆菌作为生物鉴定的指示菌，在把发酵液进行冷冻浓缩后，利用牛津杯在生物鉴定盘(或平板)上鉴定发酵液可否产生抑菌圈，从而达到筛选磷霉素生物转化菌株的目的。本发明具有不使抗生素失活、操作简单、成本低等优点，对于增加单位体积发酵液中磷霉素的浓度和提高磷霉素转化菌株的鉴定灵敏度和效率非常适用。
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公开(公告)号：CN102154430A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010616042.X
申请日：2010-12-30
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及生物医药和生物技术领域，具体是一种生物催化菌株在把右旋磷霉素转变为左旋磷霉素中的应用，三种细菌菌株可以通过生物催化把右旋磷霉素转变为左旋磷霉素，为解决现有右旋磷霉素严重的资源浪费和环境污染等问题提供了技术基础。右旋磷霉素是左旋磷霉素化学合成工艺中形成的副产物，无药效，被作为废物弃掉，污染环境、浪费资源。本发明验证了三种细菌菌株的混合培养物具有通过生物催化把右旋磷霉素转变为左旋磷霉素的能力。这三种细菌菌株分别是弗氏柠檬酸杆菌、假单胞菌以及梭状芽孢杆菌。本发明提出的三种细菌菌株所具有的催化能力，具有使现在被废弃的右旋磷霉素通过生物催化技术变废为宝、获得再利用的可能性。
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公开(公告)号：CN102154104A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201010616820.5
申请日：2010-12-30
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及生物医药和生物技术领域，具体为一种催化右旋磷霉素为左旋磷霉素菌株的高灵敏筛选方法。首先，制备左旋磷霉素敏感菌株的菌悬液，使其细菌浓度为108-1010个细菌/ml；然后，将左旋磷霉素敏感菌株的菌悬液加入经0.45μm孔径滤膜过滤除菌的待筛选催化菌株的无菌发酵液中，在培养初始时刻和培养一段时间后，取发酵液于600nm分光光度计中测定其吸光度；选取培养一段时间后吸光度增加幅度最低或较低者，进一步验证其原始待筛选菌株是否具有转化右旋磷霉素为左旋磷霉素能力。该方法既大幅度提高转化右旋磷霉素为左旋磷霉素生物催化菌株筛选方法的灵敏度，也因为检测方法简便易行而大大提高筛选效率。
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公开(公告)号：CN101985640A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN201010561138.0
申请日：2010-11-25
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
摘要： 本发明涉及维生素C第一步发酵技术领域，具体为一种山梨醇的高浓度连续发酵工艺。过程：选二个发酵罐，1#罐应用低山梨醇浓度进行发酵，发酵至生黑醋酸杆菌生长和代谢达高峰值，移出部分作为接种液，接种已备好低山梨醇浓度培养液的2#罐进行低山梨醇浓度发酵；1#罐移出部分发酵液后，本身流加高浓度无菌山梨醇至终山梨醇浓度为38％，加大通风量继续发酵至醇糖转化率达97％以上，结束发酵。1#罐发酵醪液迅速导入糖储罐，罐清空后转入第二轮的发酵运行：先重复2#罐、后重复1#罐的发酵过程。原作低山梨醇浓度发酵的2#罐待生黑醋酸杆菌生长和代谢达高峰值，重复1#罐的发酵过程。1#和2#罐相互依存、作用整合、周而复始地不间断运行，实现山梨醇高浓度连续发酵。
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公开(公告)号：CN101748167A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN200810229323.2
申请日：2008-12-05
申请人： 东北制药集团股份有限公司 , 中国科学院沈阳应用生态研究所
摘要： 本发明属于发酵尾气回收利用领域，具体为一种应用发酵尾气提高发酵效率的方法，采用该方法可以循环利用发酵尾气，节能、减排，提高发酵效率。其利用过程为：收集好氧发酵过程中产生的尾气于一缓冲罐中，经鼓风机增压后，导入通向发酵罐的专用辅助压缩管路。待发酵旺盛、需氧量加大时，开通发酵罐阀，尾气经置于发酵罐中部的气体分布器注入发酵罐内，补足发酵罐上部供氧不足，加强发酵罐内的发酵液的翻腾效果，实现高效快速发酵。本发明将发酵废弃尾气予以高效利用，为企业技术进步，步入发展循环经济的模式，开辟出一条新路。
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公开(公告)号：CN1876830B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN200610046425.1
申请日：2006-04-26
申请人： 中国科学院沈阳应用生态研究所 , 东北制药集团股份有限公司
IPC分类号： C12Q1/04
摘要： 本发明涉及生物转化/生物催化技术、微生物菌株筛选领域，具体为一种以右旋磷霉素为底物的左旋磷霉素生物转化菌株的筛选策略及方法。该筛选策略及具体操作方法在筛选过程中包括了菌株培养和转化产物鉴定两个大步骤。该筛选策略及具体操作方法的要点是实验室菌种的前期富集及采用生物检定与薄层层析(TLC)方法相结合的产物检定策略。由于自然界中能进行右旋至左旋磷霉素的菌种不多，且实验室已有菌种生长缓慢，前期菌种富集很重要。而且采用生物检定与TLC方法相结合的产物检定策略进行产物检测，可以准确确定产物中是否含有左旋磷霉素。
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