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公开(公告)号：CN106282389A
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201610915417.X
申请日：2016-10-20
申请人： 中华人民共和国湛江出入境检验检疫局 , 中国检验检疫科学研究院
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q2600/16 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143 , C12Q2549/113 , C12Q2549/119 , C12Q2545/101
摘要： 本发明公开一种针对转基因大豆DAS44406的内外源基因的双重巢式荧光定量PCR检测的引物和探针组合。本发明将双重PCR、巢式PCR和荧光定量PCR结合起来，对引物和探针的设计进行了严格的控制，并对检测流程进行了改进，建立了一套双重巢式荧光定量PCR检测体系，该体系能够定性和定量检测转基因大豆DAS44406品系特异性序列和大豆内源基因Lectin，该方法灵敏度相比普通荧光定量PCR提高了1个数量级。本发明的方法具有模板需要量少，灵敏度高，通量高，特异性强等优点；能应用于转基因的快速定量检测，为快速、准确、高通量、定量检测转基因提供新方法。
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公开(公告)号：CN105063238B
公开(公告)日：2018-04-24
申请号：CN201510551474.X
申请日：2015-09-01
申请人： 中国检验检疫科学研究院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要： 本发明公开了一种检测葡萄卷叶伴随病毒2号的RPA引物及试剂盒。本发明的RPA引物由SEQ ID No.1所示的单链DNA分子和SEQ ID No.2所示的单链DNA分子组成。通过试验证明：本发明的RPA引物特异性好、灵敏度高、检测时间短、不需要特殊的仪器和适用范围广，且基于该引物建立了葡萄卷叶伴随病毒2号的RPA检测方法灵敏、准确、简便和快速，对进出口相关货物及产品检验检疫具有指导意义。
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公开(公告)号：CN105112538A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510587903.9
申请日：2015-09-15
申请人： 中国检验检疫科学研究院
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143 , C12Q2537/16 , C12Q2545/101
摘要： 本发明提供一种针对转基因玉米MIR162的双重数字PCR荧光定量检测方法，本方法可以直接对待检测样品的基因组中的转基因玉米MIR162进行定量检测，从而省去了常规PCR方法定量检测中标准曲线绘制步骤以及现有数字PCR检测中的样品前处理步骤，另外，在本方法中，由于转基因成分是通过外源基因拷贝数与内参基因拷贝数的比例计算得到的，因此在同一个反应体系进行双重检测可以提高转基因成分定量检测的稳定性。利用本方法可实现对转基因玉米MIR162的绝对定量检测，定量检测限可达到0.5％，灵敏度可达到0.1％，能够满足所有转基因成分实际检测的需要。此外，本方法操作简单，灵活性强，是一种转基因绝对定量检测的有效方法。
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公开(公告)号：CN115838784A
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202211318163.5
申请日：2022-10-26
申请人： 中国检验检疫科学研究院
IPC分类号： C12Q1/6827 , C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种检测基因编辑水稻wx突变基因的方法，所述方法包括将待测核酸与Cas12a蛋白、gRNA和单链DNA报告子接触，检测由Cas12a蛋白切割单链DNA报告子产生的可检测信号，所述gRNA包括与Cas12a蛋白结合的区域和与靶核酸杂交的导向序列，从而检测所述基因编辑水稻wx突变基因，所述单链DNA报告子不与所述gRNA杂交；所述gRNA的序列如SEQ ID No.10或SEQ ID No.11所示。
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公开(公告)号：CN105779611A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610237272.2
申请日：2016-04-15
申请人： 中国检验检疫科学研究院
摘要： 本发明涉及分子生物学，具体公开了一种检测转基因作物的方法，针对转基因作物的内源基因、外源基因和转基因品系旁临序列设计内、外引物，先将所有内、外引物混合，进行第一轮循环数较少(15cycles)的高通量多重富集PCR，再运用内引物进行第二轮荧光定量PCR，结果根据扩增曲线和熔融曲线分析，显著增加了所述方法的成功率和稳定性，可实现高通量检测转基因作物的目的。本发明所述方法的灵敏度高于普通荧光定量PCR约1个数量级；拥有和普通荧光定量PCR相同的定量能力；特异性强，为转基因作物的检测提供了更有效的方法。
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公开(公告)号：CN105112536A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510587834.1
申请日：2015-09-15
申请人： 中国检验检疫科学研究院
CPC分类号： C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12Q2600/16 , C12Q2600/166 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143 , C12Q2537/16 , C12Q2545/101
摘要： 本发明提供一种针对转基因玉米NK603的双重数字PCR荧光定量检测方法，本方法可以直接对待检测样品的基因组中的转基因玉米NK603进行定量检测，从而省去了常规PCR方法定量检测中标准曲线绘制步骤以及现有数字PCR检测中的样品前处理步骤，另外，在本方法中，由于转基因成分是通过外源基因拷贝数与内参基因拷贝数的比例计算得到的，因此在同一个反应体系进行双重检测可以提高转基因成分定量检测的稳定性。利用本方法可实现对转基因玉米NK603的绝对定量检测，定量检测限可达到0.5％，灵敏度可达到0.1％，能够满足所有转基因成分实际检测的需要。此外，本方法操作简单，灵活性强，是一种转基因绝对定量检测的有效方法。
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公开(公告)号：CN105112535A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510587482.X
申请日：2015-09-15
申请人： 中国检验检疫科学研究院
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q2600/16 , C12Q2600/166 , C12Q2537/143 , C12Q2545/101
摘要： 本发明提供一种针对转基因玉米MON863的双重数字PCR荧光定量检测方法，本方法可以直接对待检测样品的基因组中的转基因玉米MON863进行定量检测，从而省去了常规PCR方法定量检测中标准曲线绘制步骤以及现有数字PCR检测中的样品前处理步骤，另外，在本方法中，由于转基因成分是通过外源基因拷贝数与内参基因拷贝数的比例计算得到的，因此在同一个反应体系进行双重检测可以提高转基因成分定量检测的稳定性。利用本方法可实现对转基因玉米MON863的绝对定量检测，定量检测限可达到0.5％，灵敏度可达到0.1％，能够满足所有转基因成分实际检测的需要。此外，本方法操作简单，灵活性强，是一种转基因绝对定量检测的有效方法。
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公开(公告)号：CN105543238B
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201610009212.5
申请日：2016-01-07
申请人： 中国检验检疫科学研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明提供转基因玉米事件IE034插入位点的外源插入片段的3'端旁侧序列及其应用。本发明还提供了用于检测该旁侧序列的引物、探针和试剂盒。本发明所提供的旁侧序列和引物适用于快速检测样品是否含有转基因玉米品系IE034，为转基因安全提供保障。
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公开(公告)号：CN107254556A
公开(公告)日：2017-10-17
申请号：CN201710681324.X
申请日：2017-08-10
申请人： 中国检验检疫科学研究院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2545/101
摘要： 本发明提供了一种引物对和内标扩增序列，所述引物对包含SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，所述内标扩增序列包含SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。本发明还提供了所述的引物对及内标扩增序列在制备筛查或辅助筛查南方菜豆花叶病毒的产品中的应用；以及基于RPA‑IAC技术的筛查南方菜豆花叶病毒的方法。经实验证明，本发明的基于RPA‑IAC引物并配合内标扩增序列建立的南方菜豆花叶病毒RPA‑IAC筛查方法特异性好、灵敏度高、筛查时间短、质控效果佳、不需要特殊的仪器且适用范围广，对进出口相关植物及产品筛查具有指导意义。
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公开(公告)号：CN107236734A
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201710682425.9
申请日：2017-08-10
申请人： 中国检验检疫科学研究院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2600/166 , C12Q2531/119 , C12Q2545/101
摘要： 本发明提供了一种引物对和内标扩增序列，所述引物对包含SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，所述内标扩增序列包含SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。本发明还提供了所述的引物对及内标扩增序列在制备筛查或辅助筛查大豆花叶病毒的产品中的应用；以及基于RPA‑IAC技术的筛查大豆花叶病毒的方法。经实验证明，本发明的基于RPA‑IAC引物并配合内标扩增序列建立的大豆花叶病毒RPA‑IAC筛查方法特异性好、灵敏度高、筛查时间短、质控效果佳、不需要特殊的仪器且适用范围广，对进出口相关植物及产品筛查具有指导意义。
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