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公开(公告)号:CN105949286A
公开(公告)日:2016-09-21
申请号:CN201610518191.X
申请日:2016-07-04
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C07K14/18 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C07K2319/02 , C07K2319/21 , C12N2770/24322 , G01N33/56983 , G01N2469/10 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及牛病毒性腹泻病毒I型E2蛋白的表达及应用。其优点为:(1)建立了高效获取BVDV E2蛋白的表达、纯化方法,可制备纯的BVDV E2蛋白;(2)仅用BVDV的E2蛋白免疫兔子制备抗体,比用全病毒免疫牛本身制备的抗体特异性好,背景浅,易判定;使用FITC标记二抗,建立了间接荧光法,因此敏感性更好;操作简单:采用预混液,减少操作时间;(3)用纯的BVDV E2蛋白包被,优化了封闭条件、血清及抗体保存液,建立了BVDV抗体间接ELISA方法,组装了敏感且价格低廉的BVDV抗体间接ELISA试剂盒,可改变长期依赖进口BVDV抗体ELISA试剂盒的局面。
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公开(公告)号:CN103981139B
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201410240895.6
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与A因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN103014043B
公开(公告)日:2015-03-11
申请号:CN201210508638.7
申请日:2012-12-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种口蹄疫灭活疫苗安全种毒载体及应用,即在该载体基础上构建不同血清型的口蹄疫灭活疫苗安全生产种毒。本发明中构建的嵌合病毒既保留了经典疫苗毒株细胞适应性良好的优点,又能通过插入流行毒株的结构蛋白克服抗原匹配性不高的缺点,可快速拯救病毒进行口蹄疫灭活疫苗的生产;以本载体构建的A型或Asia Ⅰ型或O型不同毒株嵌合病毒为弱毒,均具有良好的生物安全性,因病毒中缺失了L蛋白,在自然条件下不发生毒力返强,并且病毒对乳鼠、猪或牛的致病力大大降低或者无致病性。安全性高,不会引起口蹄疫疫情的发生,非常具有实用价值。
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公开(公告)号:CN101695571B
公开(公告)日:2013-07-03
申请号:CN200910193314.7
申请日:2009-10-26
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司 , 中国兽医药品监察所
IPC: A61K39/187 , A61P31/14 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种利用生物反应器生产猪瘟细胞活疫苗的方法及其猪瘟细胞活疫苗产品,该方法包括如下步骤:将生物反应器和微载体经消毒后接种所述制苗用细胞,并加入细胞生长液进行培养。将生物反应器接种所述含猪瘟兔化弱毒毒种的维持液,继续培养。接毒后1~3日或流加方式收获得到的细胞培养毒液;再加入稳定剂和抗生素,经冷冻真空干燥得到猪瘟细胞活疫苗;本发明使细胞密度大大增加,病毒浓度极大提高;疫苗效价提高,副反应减小;降低劳动强度,减少生产成本;疫苗生产可监控性提高;保证产品质量均一稳定。利用本发明生产的猪瘟细胞活疫苗安全性好、免疫效力高,对猪瘟强毒攻击具有较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN100577204C
公开(公告)日:2010-01-06
申请号:CN200710031812.2
申请日:2007-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所 , 广东永顺生物制药有限公司
IPC: A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法。本发明包括如下技术步骤:(1)选择细胞系作为制苗用细胞;(2)制苗用细胞的传代与培养;(3)细胞毒种的繁殖;(4)制苗毒液的繁殖;(5)配苗、分装及冻干。本发明具有生产工艺简单且稳定、易操作,病毒含量高,批间差异小,质量易控,可显著提高疫苗产量和质量。利用本发明生产的猪瘟活疫苗安全性好、免疫效力高,对猪瘟强毒攻击具有完全的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN105510571A
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201510920475.7
申请日:2015-12-11
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/53
CPC classification number: G01N33/94
Abstract: 本发明涉及一种口蹄疫灭活疫苗效力检验方法。本发明所述的方法包括:(1)每批疫苗每个剂量免疫4~8只Balb/c系小鼠,疫苗免疫剂量可分为1头份,1/2头份,1/4头份三个剂量组,第28天采血,分离血清;(2)通过口蹄疫阻断ELISA方法检测血清特异性抗体,抗体阻断ELISA效价-log10X高于2.0以上,变异系数低于12%,即判为合格。本发明为口蹄疫灭活疫苗效力检验提供了一种新的方法,通过上述方法免疫Balb/c系小鼠,检测血清可较好的反映疫苗中有效抗原含量,替代本动物免疫攻毒试验。
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公开(公告)号:CN102221618B
公开(公告)日:2013-07-31
申请号:CN201110170442.7
申请日:2011-06-23
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12N7/01
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟兔化弱毒标记疫苗毒株的构建及疫苗的制备方法。包括如下步骤:(1)猪瘟兔化弱毒株(C株或Chinese株)全长感染性克隆的构建方法;(2)标记蛋白基因的引入方法;(3)猪瘟兔化弱毒标记疫苗病毒的拯救;(4)病毒的繁殖;(5)病毒液检验;(6)疫苗制造;(7)疫苗成品检验,包括安全检验和效力检验。本发明构建的猪瘟兔化弱毒株标记疫苗,不仅保持了猪瘟兔化弱毒株安全性好,免疫原性优良等特点,而且该毒株稳定性好,细胞生产病毒含量高,能用于工业化大生产,免疫猪体后可产生标记蛋白特异性抗体,以此来区分免疫和自然感染,对防控净化猪瘟及紧急免疫都具有重大意义。
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公开(公告)号:CN101575650B
公开(公告)日:2012-03-28
申请号:CN200910087099.2
申请日:2009-06-24
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/68 , G01N21/78 , G01N27/447 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSSV)序列,设计了PRSSV RT-LAMP反应系统所需引物;采用本发明人设计并配制的病毒RNA提取试剂(LBB II-RNA)提取PRSSV病毒RNA,使用本发明建立的PRSSV RT-LAMP反应体系进行检测,反应结束后加入显色剂判定结果,结果显示在63℃45min,PRSSV病毒RNA获得了高效的特异性扩增;再利用SpuI酶切进行猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株和NSP2变异株(高致病性蓝耳病毒株)的快速检测。相较现有技术,本发明具有检测速度快,灵敏度强并能区分检测美洲型经典毒株和NSP2变异株(高致病性蓝耳病毒株),而且反应成本低、操作便捷,适合多层次检测需求。
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公开(公告)号:CN101586169B
公开(公告)日:2012-02-08
申请号:CN200910087562.3
申请日:2009-06-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型(PCV2)LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的PCV2基因序列,在其序列保守区域设计了PCV2 LAMP引物4条;以PCV2 HuB株、PCV2LN株病毒DNA为模板,使用本研究建立的PCV2 LAMP反应体系进行LAMP反应。利用LA-320LAMP Tubidimeter仪分析反应过程和反应结束后加入SYBRgreenI显色剂判定结果,结果显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃30min,PCV2DNA获得了高效的特异性扩增,加入SYBRgreenI显色判定与仪器分析显示结果一致。通过敏感性试验证明:本方法可对50ngPCV2的DNA模板进行10-7稀释后仍可高效扩增,显示出本方法高度的敏感性;通过特异性试验和临床样品的PCV2核酸的LAMP检测,结果显示本方法特异、简单、迅速,适合用于PCV2的检测工作。
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公开(公告)号:CN102221618A
公开(公告)日:2011-10-19
申请号:CN201110170442.7
申请日:2011-06-23
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/68 , C12N15/85 , C12N7/01 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟兔化弱毒标记疫苗毒株的构建及疫苗的制备方法。包括如下步骤:(1)猪瘟兔化弱毒株(C株或Chinese株)全长感染性克隆的构建方法;(2)标记蛋白基因的引入方法;(3)猪瘟兔化弱毒标记疫苗病毒的拯救;(4)病毒的繁殖;(5)病毒液检验;(6)疫苗制造;(7)疫苗成品检验,包括安全检验和效力检验。本发明构建的猪瘟兔化弱毒株标记疫苗,不仅保持了猪瘟兔化弱毒株安全性好,免疫原性优良等特点,而且该毒株稳定性好,细胞生产病毒含量高,能用于工业化大生产,免疫猪体后可产生标记蛋白特异性抗体,以此来区分免疫和自然感染,对防控净化猪瘟及紧急免疫都具有重大意义。
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