猪细小病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101575651B

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN200910087100.1

    申请日:2009-06-24

    Abstract: 本发明涉及一种猪细小病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的猪细小病毒(PPV)序列,在其保守序列区域设计了PPV LAMP引物;采用本发明人设计并配制的病毒DNA提取试剂提取PPV病毒DNA,使用本发明建立的PPV LAMP反应体系进行检测,反应结束后加入显色剂判定结果,结果显示在63℃45min,PPV病毒DNA获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明:本方法可对2.3pg PPV病毒的DNA模板进行高效扩增,显示出本方法高度的敏感性,通过特异性实验和临床样品的PPV的检测,结果显示本发明的方法及试剂盒适合用于PPV的检测工作。

    猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101629217A

    公开(公告)日:2010-01-20

    申请号:CN200910087563.8

    申请日:2009-06-30

    Abstract: 本发明涉及一种猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的SIV不同亚型的基因序列,针对PA序列相对保守区域设计了SIV RT-LAMP简并引物6条,以猪流感H1、H3、H5、H9亚型毒株为模板,建立了可以检测所有亚型猪流感毒的RT-LAMP方法。利用LA-320 LAMP Tubidimeter仪分析反应过程并判定结果,显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃反应45min,所有实验用的4种亚型SIV样品RNA均获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明:本方法可对100TCID 50 SIV样品RNA进行10 -4 稀释后仍可高效扩增,显示出本方法高度的敏感性;通过特异性实验和19份临床样品的SIV病原的RT-LAMP检测,有5份样品检测到病料中SIV核酸为阳性,与RT-PCR、鸡胚分离结果一致,经基因芯片分型鉴定验证,综合结果符合率为100%。显示本方法特异、敏感、快速,适合用于各种试验条件下SIV的检测。

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